血液分析儀散點圖異常對瘧疾診斷的應(yīng)用價值

[摘要] 目的 利用瘧原蟲感染后患者血常規(guī)參數(shù)及散點圖變化規(guī)律，探索快速簡便發(fā)現(xiàn)瘧原蟲感染的方法。方法 對15例瘧疾患者的血常規(guī)參數(shù)及散點圖進行分析，總結(jié)出瘧原蟲感染散點圖的變化規(guī)律。結(jié)果 瘧疾患者外周血在Sysmex XE2100的DIFF散點圖和白細胞/嗜堿性粒細胞散點圖中嗜酸性粒細胞、不典型淋巴細胞、嗜堿性粒細胞等特定區(qū)域出現(xiàn)異常散點圖，并伴有不同程度的血細胞減少。 結(jié)論 分析血細胞分析儀的DIFF散點圖和白細胞/嗜堿性粒細胞散點圖時，疑有瘧原蟲感染，進行血涂片鏡檢，將提高瘧原蟲檢出率。

[關(guān)鍵詞] 瘧原蟲；散點圖；血液分析儀

[中圖分類號] R254.5 [文獻標識碼] B [文章編號] 1673-9701（2011）36-80-02

The Application Value of Hematology Analyzer Scattergram in Malaria Diagnosis

WANG Xiaoou CHEN Xiaojian SHU Kuangyi LI Mianmian LI Fang

Department of Clinical Laboratory，the Second Affiliated Hospital of Wenzhou Medical College，Wenzhou 325027，China

[Abstract] Objective To explore a quick and feasible method of screening malaria parasite by the alarm information of complete blood cell analysis and scattergram for patients with malarial parasite infected. Methods Analyzed complete blood counts and scattergram in 15 malaria patient，and summarized their changes. Results Abnormal scattergram in definite region of Sysmex XE2100 DIFF and WBC/basophile such as eosinophil，atypical lymphocytes and basophile were found in peripheric blood of patients with reduction of blood cell in different degree. Conclusion Microscopic review is used when scattergram of hematology DIFF analysis and WBC/basophile shows possibly malarial parasite infected，the rate of detection will be greatly improved.

[Key words] Malarial Parasite；Scatter；Hematology analyzer

瘧疾是熱帶病中最嚴重的一種寄生蟲病，分布遍及全球。瘧疾的確診取決于瘧原蟲的找到與否，顯微鏡血涂片觀察對查找瘧原蟲至關(guān)重要?，F(xiàn)在各家醫(yī)院自動化血液分析儀的應(yīng)用普及，大大減輕了檢驗人員的工作量，但同時檢驗工作者也忽視了血液的血涂片顯微鏡檢查。由于血涂片顯微鏡鏡檢復(fù)查率減少或者對分析儀分析過程中出現(xiàn)的警告提示和異常散點圖圖像不夠重視，使散發(fā)病例誤診漏診機會大為增加。本文對近兩年本院發(fā)現(xiàn)的15例瘧疾病例進行分析，利用瘧原蟲感染后血常規(guī)參數(shù)及散點圖變化規(guī)律，探索快速簡便發(fā)現(xiàn)瘧原蟲感染的方法，現(xiàn)報道如下。

1 材料和方法

1.1 病例資料

2009年2月～2010年10月期間本院確診的瘧疾病例共15例，其中間日瘧原蟲感染13例，男性9例，女性4例，年齡14～50歲；惡性瘧原蟲感染2例，均為男性，年齡29～44歲。

1.2 實驗儀器

日本Olympus CH20雙目光學(xué)顯微鏡，用于血涂片顯微鏡鏡檢分析；Sysmex XE-2100五分類血細胞分析儀和原裝配套試劑，由日本希森美康公司提供；血涂片用瑞氏-姬姆薩復(fù)合染液進行染色，染液按陸永綏主編的《臨床檢驗管理與技術(shù)規(guī)程》第二版的要求配制[1]。

1.3 檢測方法

在患者高熱寒戰(zhàn)期，用美國BD公司生產(chǎn)的乙二胺四乙酸二鉀鹽真空抗凝管（Vacutainer EDTA-K2）采集靜脈血2mL，應(yīng)用Sysmex XE-2100全自動血液分析儀進行血液常規(guī)分析。

1.4 瘧疾確診

患者高熱寒戰(zhàn)期，取靜脈血做血涂片，瑞氏-姬姆薩染色后，油鏡下觀察，找到各期瘧原蟲即可確診。

2 結(jié)果

2.1 13例間日瘧患者血常規(guī)基本參數(shù)情況

白細胞計數(shù)偏低9例，占69.2%；紅細胞計數(shù)偏低6例，占46.2%；血紅蛋白值偏低3例，占23.1%；紅細胞壓積偏低10例，占76.9%；血小板計數(shù)13例病人均偏低。

2.2 間日瘧的散點圖特征

DIFF通道顯示：5例提示出現(xiàn)嗜酸性粒細胞數(shù)增加的患者，在橘紅色嗜酸性粒細胞散點圖的左側(cè)出現(xiàn)異常分布的橘紅色點；6例嗜酸性粒細胞與中性粒細胞無法區(qū)分，在兩個區(qū)域融合出現(xiàn)異常白色點；2例白細胞無法分類，在上述同區(qū)域同樣出現(xiàn)異常白色點。綜上所述，13例瘧疾患者散點圖均在（圖1B）可疑區(qū)域出現(xiàn)異常點圖，并在另一箭頭所示提示有碎片增多（圖1B）。WBC/BASO通道顯示：未見明顯變化。PLT圖顯示：出現(xiàn)不同程度的異常拖尾現(xiàn)象（圖2）。

2.3 惡性瘧患者血常規(guī)基本參數(shù)變化

與臨床正常參考值比較，2例惡性瘧患者均出現(xiàn)白細胞計數(shù)減少、紅細胞壓積降低和血小板計數(shù)減少，其中一例出現(xiàn)紅細胞計數(shù)減少。惡性瘧的散點圖特征提示異淋或嗜堿性粒細胞增多，并提示細胞碎片增多（圖1C箭頭所示），血小板直方圖也出現(xiàn)異常拖尾現(xiàn)象（圖2）。

3 討論

Sysmex XE-2100血細胞分析儀應(yīng)用半導(dǎo)體激光流式細胞原理結(jié)合細胞化學(xué)熒光染色技術(shù)對外周血進行檢測，使用WBC/BASO和WBC的DIFF檢測通道，并可得到白細胞散點圖（X軸表示側(cè)向散射光強度，Y軸表示前向散射光強度）和直方圖表示。血細胞分析儀用半導(dǎo)體激光照射標本，并根據(jù)各個血細胞特點產(chǎn)生結(jié)果，側(cè)向熒光反映細胞中核糖核酸（RNA）和脫氧核糖核酸（DNA）的含量，側(cè)向散射光反映細胞內(nèi)涵物，前向散射光反映細胞體積，如細胞核和胞漿內(nèi)含的顆粒，從而保證了白細胞分類的質(zhì)量[2，3]。

患者感染瘧原蟲以后，紅細胞遭到紅細胞內(nèi)期瘧原蟲的直接破壞，是瘧疾患者發(fā)生貧血的原因之一。脾臟中巨噬細胞增多，吞噬有瘧原蟲感染的紅細胞，宿主產(chǎn)生特異性抗體后，易形成抗原抗體復(fù)合物附著于正常成熟紅細胞，從而引起免疫性溶血。瘧疾發(fā)作次數(shù)越頻繁，病程越長，將導(dǎo)致貧血越嚴重[4]，所以多例病人表現(xiàn)為紅細胞減少。瘧疾發(fā)作期，紅細胞內(nèi)瘧原蟲成熟裂殖體脹破紅細胞膜，裂殖子和瘧原蟲的代謝產(chǎn)物、變性和殘留的血紅蛋白及紅細胞碎片等一同流入血流，形成大量紅細胞碎片，這是引起DIFF散點圖中細胞碎片增多的原因。

患者感染瘧原蟲后脾功能亢進，淋巴巨噬細胞增生，吞噬能力增強，不僅吞噬受瘧原蟲感染的細胞，還吞噬未受感染的或受損的細胞以及血小板，從而使PLT降低[5]。也有人認為瘧原蟲作為抗原刺激機體免疫系統(tǒng)產(chǎn)生血小板相關(guān)抗體，血小板和相關(guān)抗體結(jié)合后經(jīng)過脾臟紅髓時，與巨噬細胞接觸充分，大量血小板通過FC受體被巨噬細胞吞噬[6]，故外周血液中血小板顯著減少[7]。血小板減低、細胞碎片的增多等原因?qū)е略谘“逯狈綀D上表現(xiàn)為拖尾及尾部抬高現(xiàn)象（圖2）。

瘧原蟲寄生于紅細胞后，胞內(nèi)出現(xiàn)異常內(nèi)容物，被寄生的紅細胞被儀器檢測出有顆粒及DNA（或RNA），從而被誤認為是白細胞或其他異常細胞。間日瘧感染的紅細胞胞體脹大，內(nèi)容物較多、較大，細胞類似于嗜酸性粒細胞，在DIFF散點圖中出現(xiàn)中性粒細胞與嗜酸性粒細胞圖形分界不清晰，在此區(qū)域形成散點濃染或者灰色圖；惡性瘧感染的紅細胞胞體不變或偏小且內(nèi)容物相對較少、較小，細胞類似于嗜堿性粒細胞，在DIFF散點圖和WBC/BASO散點圖上表現(xiàn)為不典型淋巴細胞和嗜堿性粒細胞區(qū)域有散點圖存在并且增多而散在（圖1）。

綜上所述，在Sysmex XE-2100血液自動分析儀中，被瘧原蟲感染的紅細胞易被誤認為白細胞或其他非紅系的異常細胞，且在DIFF散點圖中嗜酸性粒細胞、細胞碎片、不典型淋巴細胞、嗜堿性粒細胞等特定區(qū)域出現(xiàn)異常。如散點圖中提示有大量細胞碎片，且在圖1B箭頭所示細胞碎片和嗜酸性粒細胞區(qū)域出現(xiàn)異常，則高度懷疑為間日瘧原蟲感染，與文獻報道一致[8]；如散點圖中提示有大量細胞碎片，且在圖1C箭頭所示不典型淋巴細胞和嗜堿性粒細胞區(qū)域出現(xiàn)異常，則高度懷疑為惡性瘧原蟲感染。這種情況下，檢驗人員應(yīng)主動聯(lián)系臨床醫(yī)生或者患者，了解患者的臨床癥狀和表現(xiàn)，了解患者的流行病學(xué)，并嚴格按照操作規(guī)程在患者高熱寒戰(zhàn)期采取靜脈血做血液常規(guī)及血涂片檢查以提高檢出陽性率。

總之，在分析血細胞分析儀的DIFF散點圖和白細胞/嗜堿性粒細胞散點圖時，發(fā)現(xiàn)懷疑有瘧原蟲感染的異常散點圖，可以進行血涂片仔細鏡檢，提高瘧原蟲檢出率。

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（收稿日期：2011-09-27）