LunX mRNA在非小細胞肺癌患者的檢測意義

郝 穎（綜述），付秀華（審校）

（內(nèi)蒙古醫(yī)學院第一附屬醫(yī)院呼吸內(nèi)科，呼和浩特 010059）

肺癌是威脅人類生命的惡性腫瘤之一，其發(fā)病率和病死率乃居惡性腫瘤之首，其中非小細胞肺癌（non-small cell lung cancer，NSCLC）病例占全部肺癌病例的80%。近些年，針對肺癌綜合治療的研究已取得較大成績，但肺癌總的5年生存率仍只有13%，即使Ⅰ、Ⅱ期 NSCLC患者，術后5年生存率也只有 40% ～ 70%［1，2］，其主要限制因素為肺癌的復發(fā)和遠處轉(zhuǎn)移，故及早發(fā)現(xiàn)NSCLC患者是否有微轉(zhuǎn)移存在對疾病的診斷分期、治療方案的選擇及預后評價有積極意義。

1 LunX mRNA與肺癌微轉(zhuǎn)移

肺特異性X蛋白（lungspecific X protein，LunX）mRNA是日本學者Iwao等運用差異顯示技術通過對人體13種不同組織中分離出來的RNA，該基因定位于20p11.1～ q12，全長 1015 bp，包括一個編碼 26 個氨基酸的768個核苷酸的開放式讀碼框。由它所合成的人LunX的相對分子質(zhì)量為26.7×103。研究表明，LunX基因僅在肺組織中特異表達，而在肺外組織不表達［3］。LunX的生理功能暫不明確。微轉(zhuǎn)移是指惡性腫瘤在發(fā)展過程中，播散并存活于血循環(huán)、淋巴道、骨髓及各組織器官中，尚未形成轉(zhuǎn)移結(jié)節(jié)，無臨床表現(xiàn)，CT、B超、骨掃描等常規(guī)檢測方法和臨床病理檢查都難以檢測發(fā)現(xiàn)的一種微量轉(zhuǎn)移。微轉(zhuǎn)移是腫瘤多階段、多步驟中的過程之一，最終轉(zhuǎn)移病灶的形成受到脫落癌細胞的自身生物學特性、機體免疫狀況、局部血供形成等各方面的影響［4］。選擇恰當?shù)陌谢蚴菦Q定檢測結(jié)果是否可靠的重要因素，有研究認為，LunX mRNA對肺癌外周血及區(qū)域淋巴結(jié)微轉(zhuǎn)移具有較高的敏感性和特異性［5，6］，且目前研究發(fā)現(xiàn)的其他肺癌特異性基因較少，因此組織特異性mRNA常被用于檢測肺癌的微轉(zhuǎn)移［7］。

2 LunX mRNA檢測技術及取材部位

反轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應可在106～107個正常細胞中檢出1～10個腫瘤細胞，檢測微轉(zhuǎn)移的靈敏度比傳統(tǒng)的免疫細胞化學方法高出10～100倍，是目前用于診斷NSCLC微轉(zhuǎn)移的最常用技術。熒光實時反轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應實現(xiàn)了基因表達定量檢測，其中，絕對定量準確，但操作過程繁瑣;相對定量操作相對簡單，但定量不夠準確［8］，這成為限制LunX mRNA檢測在臨床廣泛應用的瓶頸，有待一種定量更精準、操作更簡易、價格更經(jīng)濟的檢測技術的問世。肺癌的微轉(zhuǎn)移研究的常規(guī)取材部位包括區(qū)域淋巴結(jié)、外周血、骨髓及胸膜腔微轉(zhuǎn)移，多數(shù)報道是對NSCLC的外周血及淋巴結(jié)微轉(zhuǎn)移的研究，國內(nèi)對骨髓、胸腔積液的實驗研究尚不多。Cheng等［9］在NSCLC患者外周血及胸腔積液中均檢測到LunX mRNA的表達，且是良惡性胸腔積液唯一顯著不同的檢測指標。

3 LunX mRNA與NSCLC的病理分型

LunX mRNA在不同病理類型NSCLC患者的陽性表達各家報道不一。莊翔等［10］通過對60例Ⅰ～Ⅲ期手術肺癌患者、20例肺部良性病變手術患者及10例健康人外周血LunX mRNA檢測后認為，不同病理類型肺癌患者外周血的LunX基因陽性表達無統(tǒng)計學差異，可以避免由于肺癌病理類型較多而導致檢測結(jié)果的假陰性，獲得較好的敏感性。馮斌等［11］的實驗得出同樣結(jié)果，外周血LunX mRNA表達情況在不同病理類型之間差異無明顯統(tǒng)計學意義，說明在中晚期NSCLC患者中不論是腺癌或鱗癌，外周血微轉(zhuǎn)移發(fā)生的機會可能相似。姚舒洋等［12］的實驗結(jié)果，LunX mRNA的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與肺癌病理組織類型無關。但也有研究認為NSCLC患者LunX mRNA的表達與病理類型有相關性。劉宏偉等［13］通過對54例NSCLC患者、50例肺良性病變和25例健康者外周血的研究發(fā)現(xiàn)，腺癌患者外周血LunX mRNA的陽性率高于非腺癌患者，由此可以預測腺癌更容易發(fā)生遠處轉(zhuǎn)移;低分化患者外周血微轉(zhuǎn)移的陽性率高于中分化和高分化患者，說明外周血LunX mRNA的陽性率與患者的細胞分化程度有關，分化程度越低，癌細胞的惡性程度越高，外周血LunX mRNA的陽性檢出率越高。黃同海等［14］的實驗結(jié)果也顯示，LunX mRNA在肺腺癌中表達的陽性率高于鱗癌中的陽性表達。

4 LunX mRNA與NSCLC的分期

多數(shù)學者認為，LunX mRNA表達與TNM分期密切相關。姚舒洋等［12］認為，LunX mRNA表達隨著TNM分期的升高而增多，提示LunX mRNA與肺癌的微轉(zhuǎn)移密切相關。劉宏偉等［13］在研究后發(fā)現(xiàn)，Ⅲ期和Ⅳ期患者LunX mRNA的檢出率明顯高于Ⅰ期和Ⅱ期患者，TNM分期越高，LunX mRNA的陽性率越高。馮斌等［11］作了更加細致的分析:實驗病例中，Ⅳ期患者陽性率顯著高于Ⅲ期，提示肺癌患者分期越晚，腫瘤負荷越大，轉(zhuǎn)移越廣泛，外周血癌細胞檢測陽性率越高，為腫瘤的進一步轉(zhuǎn)移提供條件。莊翔等［10］的研究結(jié)果表明，Ⅰ期和Ⅱ期肺癌患者的LunX mRNA表達差異無統(tǒng)計學意義，Ⅲ期患者與Ⅰ期、Ⅱ期患者的LunX mRNA表達差異有統(tǒng)計學意義，提示LunX mRNA用于檢測早期肺癌微轉(zhuǎn)移以區(qū)別Ⅰ期與Ⅱ期的敏感性不夠，但對中晚期肺癌患者的微轉(zhuǎn)移診斷有幫助。朱廣迎等［15］也有同樣的報道，但Mitas等［5］對24例Ⅰ～Ⅳ期肺癌患者的研究后認為，LunX mRNA的表達與肺癌分期的關系并不密切。

5 LunX mRNA與NSCLC患者的治療

通過檢測NSCLC患者LunX mRNA的表達以明確是否有微轉(zhuǎn)移的存在，從而可對治療方案的制訂提供重要依據(jù)。余小琴等［16］對NSCLC治療前和常規(guī)化療或手術治療后的病例分別進行LunX mRNA檢測，發(fā)現(xiàn)治療前病例陽性率約為0.87%，治療后病例陽性率為0.47%，兩者陽性率有明顯差別，說明LunX mRNA有可能成為考核臨床治療效果，尤其是化療效果的重要參考指標。如上所述，劉宏偉等［13］認為，低分化患者外周血LunX mRNA的陽性率高于中分化和高分化患者，建議臨床上要對病理檢查為細胞分化程度低的NSCLC患者進行全身性化療，防止微轉(zhuǎn)移的發(fā)生。馮斌等［11］對不同客觀療效的亞組分析發(fā)現(xiàn)，化療療效與外周血LunX mRNA表達顯著相關，部分緩解組和穩(wěn)定組患者陽性率均較化療前顯著降低，分別為23.81%、26.09%，而進展組患者陽性率無明顯降低，與化療前相似，提示化療可使有效或穩(wěn)定患者的外周血癌細胞數(shù)量顯著下降，而對病情進展患者的作用不大;化療過程中多次監(jiān)測外周血中循環(huán)癌細胞的LunX mRNA表達情況:化療1周期后外周血LunX mRNA陽性表達率即顯著下降，繼續(xù)化療2周期后陽性率未發(fā)現(xiàn)繼續(xù)降低，提示在全身化療的初始階段，外周血循環(huán)癌細胞的變化情況已經(jīng)可以預示化療的客觀療效。Sher等［17］也認為，循環(huán)癌細胞的檢測為快速判定治療效果和改善預后提供了一種新的方法，特別是外周血LunX mRNA表達轉(zhuǎn)陰的患者從后續(xù)化療中獲益更大，而化療后外周血循環(huán)癌細胞檢測仍陽性的患者提示療效較差，可能從原方案的后續(xù)化療中獲益機會不大，腫瘤細胞可能存在繼發(fā)或原發(fā)耐藥，需要重新制訂治療計劃以充分獲益。

臨床證實，依據(jù)以往的NSCLC TNM分期制訂的治療方案已經(jīng)不能滿足治療需要運用分子生物學的方法發(fā)現(xiàn)早期肺癌微轉(zhuǎn)移，有助于更準確地進行TNM分期，對指導肺癌多學科綜合治療、監(jiān)測治療療效有重要的指導意義。［18］

6 LunX mRNA與NSCLC患者預后評價

莊翔等［10］提出，由于LunX基因在2001年才被發(fā)現(xiàn)，LunX的生物學行為尚不明確，目前缺乏長期隨訪的研究來證實其臨床價值。在短期的隨訪中，朱廣迎等［15］通過6～16個月隨訪LunX基因表達陽性組復發(fā)和轉(zhuǎn)移率為52%，陰性組復發(fā)和轉(zhuǎn)移率為18%（其缺乏統(tǒng)計學意義，可能與病例數(shù)較少有關），提示LunX mRNA陽性表達與轉(zhuǎn)移有較為密切的關系。牛瑞等［19］對74例NSCLC患者進行3年的隨訪觀察發(fā)現(xiàn)，年齡、營養(yǎng)指數(shù)、3年內(nèi)的復發(fā)或轉(zhuǎn)移率與手術切除區(qū)域淋巴結(jié)LunX mRNA檢出率之間有統(tǒng)計學意義上的相關性，可能為患者年齡的增高、機體營養(yǎng)狀況差而導致免疫狀況減低，腫瘤細胞容易形成遠處轉(zhuǎn)移。患者的生存時間與LunX mRNA的表達亦有相關性，對評估預后及個體化治療策略具有重要臨床意義，但存在淋巴結(jié)微轉(zhuǎn)移并非最終一定形成顯性轉(zhuǎn)移，還與癌細胞自身生物學特性、機體免疫狀況、局部微環(huán)境等多因素有關，提示微轉(zhuǎn)移的發(fā)生為多基因、多因素、多步驟綜合作用的結(jié)果。

7 結(jié)語

NSCLC的發(fā)生發(fā)展是一個多因素參與的復雜過程，LunX與NSCLC存在有密切關系，其機制尚不清楚，LunX有望成為早期診斷NSCLC的理想分子標志物。目前，免疫組化技術已經(jīng)應用于臨床，多是對癌組織、淋巴結(jié)等實體組織的檢測，患者必須經(jīng)過有創(chuàng)操作才能獲取標本，甚至手術。反轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應技術對標本取材部位的要求較低，可以選擇外周血、骨髓、淋巴結(jié)、癌組織等多種組織為標本，但因該技術假陰性或假陽性的發(fā)生率較高，限制了其在臨床診斷性檢驗的推廣。故能夠發(fā)明一種取材方便、操作簡易、檢測快捷準確、廉價的新型技術將成為腫瘤研究的新方向。然而，探究LunX與NSCLC預后的關系具有著重大意義。當前與NSCLC相關的分子標志物的研究各家報道不一，LunX能否成為NSCLC的一個獨立的預后指標還值得繼續(xù)研究，有待更多循證醫(yī)學證據(jù)支持。

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