妊娠滋養(yǎng)細(xì)胞疾病研究進(jìn)展

張志杰(綜述)，黃桂香(審校)

(1.包頭醫(yī)學(xué)院，內(nèi)蒙古 包頭014060;2.包頭市中心醫(yī)院婦產(chǎn)科，內(nèi)蒙古 包頭014040)

人類滋養(yǎng)細(xì)胞是有異于體細(xì)胞的特殊細(xì)胞，具有獨(dú)特的分化特點(diǎn)和生物學(xué)特性。妊娠滋養(yǎng)細(xì)胞疾病的發(fā)生、發(fā)展更是多因素參與、極其復(fù)雜的病理過程。因其臨床及生物學(xué)的特殊性一直引起婦產(chǎn)科學(xué)界的極大興趣。近年來，在遺傳學(xué)、流行病學(xué)及診斷與治療方面，對(duì)妊娠滋養(yǎng)細(xì)胞疾病的研究取得了長(zhǎng)足的進(jìn)展。

1 p57kip2抑癌印跡基因

p57kip2抑癌印跡基因是不遵循孟德爾遺傳規(guī)律的一種依靠單親傳遞遺傳性狀的單等位基因，是細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶抑制因子的一員，參與細(xì)胞周期調(diào)控、促進(jìn)凋亡、誘導(dǎo)分化，并且在胚胎發(fā)育過程中起作用。通過與相應(yīng)周期蛋白結(jié)合干擾細(xì)胞周期而抑制細(xì)胞增殖發(fā)揮抗腫瘤作用。p57kip2存在基因組印跡缺失可能導(dǎo)致人類胚胎發(fā)育畸形和參與多種腫瘤的發(fā)生和發(fā)展。近年來，國(guó)內(nèi)外學(xué)者注意到在某些婦科疾病(如水泡狀胎塊)中存在p57kip2基因組印跡缺失現(xiàn)象。古聰敏等［1］應(yīng)用免疫組化方法檢測(cè)p57kip2蛋白在正常成熟胎盤、不同類型水泡狀胎塊及水泡狀流產(chǎn)組織中的表達(dá)情況，研究顯示p57kip2蛋白在10例正常成熟胎盤、20例水泡狀流產(chǎn)組織中的細(xì)胞滋養(yǎng)層細(xì)胞、絨毛間質(zhì)細(xì)胞和絨毛外滋養(yǎng)細(xì)胞團(tuán)核表達(dá)陽性，合體滋養(yǎng)層細(xì)胞不表達(dá);完全性水泡狀胎塊組織的絨毛間質(zhì)細(xì)胞和細(xì)胞滋養(yǎng)層細(xì)胞p57kip2蛋白不表達(dá)，陽性表達(dá)僅見于絨毛外散在滋養(yǎng)細(xì)胞團(tuán)中;25例完全性水泡狀胎塊組織的絨毛間質(zhì)細(xì)胞和細(xì)胞滋養(yǎng)層細(xì)胞p57kip2均表達(dá)陽性。研究表明p57kip2蛋白在完全性水泡狀胎塊組織和部分性水泡狀胎塊的表達(dá)和分布有明顯差異，可作為胎塊分型診斷的客觀輔助指標(biāo)。近年來對(duì)p57kip2與妊娠性滋養(yǎng)細(xì)胞疾病關(guān)系進(jìn)行了大量研究［2］。目前比較肯定的是p57kip2作為抑癌印跡基因的作用，鑒于完全性葡萄胎缺乏母系基因組的遺傳學(xué)特征，p57kip2在葡萄胎表達(dá)缺失，而部分性葡萄胎中則表達(dá)較強(qiáng)，可用于兩者的鑒別診斷，并肯定其診斷有效率與染色體倍型分析的一致性。從而克服了大體檢查作為臨床葡萄胎鑒別診斷主要手段，但帶有一定主觀性的缺點(diǎn)［2］。Thaker等［3］研究發(fā)現(xiàn)其他印跡基因與p57kip2的作用相同，但p57kip2作為周期蛋白抑制因子是否對(duì)妊娠性滋養(yǎng)細(xì)胞疾病的發(fā)病起作用還不清楚。

2 E-鈣黏素

E-鈣黏素(E-cadherin，E-cd)是一種鈣依賴性的、具有使細(xì)胞之間產(chǎn)生黏附功能的糖蛋白。E-cd是一種跨膜蛋白，它集中定位于細(xì)胞的側(cè)緣，介導(dǎo)上皮細(xì)胞之間黏附并維持上皮細(xì)胞的極性，通過形成E-cd-β-cata-α-cata功能復(fù)合體行使功能，通常在上皮細(xì)胞間起連接作用。在胚胎發(fā)育，形態(tài)發(fā)生以及維持成年組織上皮極性和完整性方面起著重要作用。在絨毛的細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞之間、細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞和合體滋養(yǎng)細(xì)胞之間的連接處起一定作用。有研究表明［4］，許多腫瘤(如乳腺癌、結(jié)腸癌、胃癌、膀胱癌)均可出現(xiàn)E-cd減少，E-cd減少使腫瘤細(xì)胞之間的黏附力降低，腫瘤細(xì)胞容易脫落而出現(xiàn)轉(zhuǎn)移。因此，E-cd的增加被看作抑制腫瘤轉(zhuǎn)移的因素，并且發(fā)現(xiàn)其低表達(dá)與腫瘤的不良預(yù)后相關(guān)。同樣，也有研究發(fā)現(xiàn)E-cd基因的表達(dá)與絨癌細(xì)胞Bewo侵蝕力有關(guān)［5］。

Xue等［6］檢測(cè)了12例正常胎盤絨毛、15例完全性葡萄胎、5例絨毛膜上皮癌中的E-cd，發(fā)現(xiàn)于6例正常絨毛和9例完全性葡萄胎中出現(xiàn)E-cd基因啟動(dòng)子的超甲基化，E-cd于葡萄胎和絨毛膜上皮癌中的表達(dá)少于正常絨毛中。Balaram等［7］采用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)發(fā)現(xiàn)E-cd于葡萄胎和絨毛膜上皮癌中表達(dá)明顯少于正常絨毛中。研究表明E-cd基因啟動(dòng)子的超甲基化、E-cd表達(dá)減少與妊娠滋養(yǎng)細(xì)胞腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。王春陽等［8］采用免疫組化S-P法檢測(cè)10正常早期絨毛、10例完全性葡萄胎、20例侵襲性葡萄胎、19例絨癌中E-cd與p53的表達(dá)，研究顯示，隨著妊娠滋養(yǎng)細(xì)胞腫瘤病變進(jìn)展E-cd表達(dá)逐漸減弱，在惡性妊娠滋養(yǎng)細(xì)胞腫瘤中表達(dá)明顯減弱，絨癌中表達(dá)最弱，與上述研究結(jié)果一致。E-cd表達(dá)減弱與妊娠滋養(yǎng)細(xì)胞腫瘤浸潤(rùn)能力強(qiáng)、預(yù)后差有關(guān)，E-cd表達(dá)減弱促進(jìn)了妊娠滋養(yǎng)細(xì)胞腫瘤惡性進(jìn)展。

3 KISS-1

KISS-1基因是一種腫瘤轉(zhuǎn)移抑制因子，對(duì)腫瘤轉(zhuǎn)移有較強(qiáng)的抑制作用。在人類的許多正常組織(如胎盤、心臟、腦、肝臟、骨骼肌、腎臟)中均可檢測(cè)到KISS-1，在胎盤和大腦的表達(dá)水平最高［9］。國(guó)外學(xué)者研究提示［10］，該基因可能定位于人類胎盤組織的合體滋養(yǎng)細(xì)胞中。Bilban等［11］發(fā)現(xiàn)，KISS-1和KISS-1受體在妊娠前期(妊娠中滋養(yǎng)細(xì)胞侵蝕性最強(qiáng)的階段)的表達(dá)明顯高于足月妊娠期(滋養(yǎng)細(xì)胞的侵蝕性較低或消失的階段)。國(guó)內(nèi)外學(xué)者發(fā)現(xiàn)［12，13］，在具有高度浸潤(rùn)活性的侵蝕性葡萄胎組和絨癌組組織中，KISS-1基因顯著低于早期妊娠組和葡萄胎組，而葡萄胎組有顯著低于正常妊娠組。KISS-1基因隨著滋養(yǎng)細(xì)胞腫瘤侵蝕性的增加而降低。雖然KISS-1抑制滋養(yǎng)細(xì)胞轉(zhuǎn)移、浸潤(rùn)的機(jī)制尚不明確，但其可能機(jī)制為［14］:①KISS-1在妊娠前期滋養(yǎng)層細(xì)胞中的表達(dá)產(chǎn)物Kp-10能增加滋養(yǎng)層細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度，活化鈣調(diào)節(jié)蛋白依賴性蛋白激酶。該酶具有調(diào)節(jié)平滑肌細(xì)胞運(yùn)動(dòng)的功能，從而抑制滋養(yǎng)層細(xì)胞的浸潤(rùn)。而Ca2+濃度的增加，還可抑制腫瘤細(xì)胞的增殖，誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞分化和凋亡。②正常妊娠的前3個(gè)月，妊娠滋養(yǎng)層細(xì)胞分泌基質(zhì)金屬蛋白酶2和基質(zhì)金屬蛋白酶9降解細(xì)胞外基質(zhì)，從而使其能遷移和侵襲子宮內(nèi)膜。Kp-10可能通過下調(diào)基質(zhì)金屬蛋白酶9的活性抑制滋養(yǎng)細(xì)胞的轉(zhuǎn)移、浸潤(rùn)。由此可見，KISS-1基因在控制滋養(yǎng)細(xì)胞侵蝕、浸潤(rùn)行為及抑制滋養(yǎng)細(xì)胞腫瘤的轉(zhuǎn)移、浸潤(rùn)過程中具有重要作用，有望成為預(yù)測(cè)和判斷滋養(yǎng)細(xì)胞轉(zhuǎn)移的臨床指標(biāo)之一。

4 骨橋蛋白

馬小玲等［15］研究發(fā)現(xiàn)，骨橋蛋白(osteopontin，OPN)作為一種細(xì)胞外基質(zhì)，在介導(dǎo)細(xì)胞/細(xì)胞間以及細(xì)胞/細(xì)胞外基質(zhì)間的相互作用中起著重要作用，幾乎參與了生殖的全過程，受精、著床及胎盤形成。因此，在子宮和胎盤的連接、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)中起重要作用。OPN在有合體滋養(yǎng)細(xì)胞層(侵襲性的)定位的正常胎盤的母兒交界面表達(dá)，故推測(cè)葡萄胎與妊娠相關(guān)的疾病可能與OPN表達(dá)異常存在著一定的聯(lián)系。張宇［16］應(yīng)用免疫組化方法對(duì)正常早孕婦女絨毛40例、葡萄胎20例組織中OPN和基質(zhì)金屬蛋白酶2的表達(dá)情況進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果顯示:OPN在人早孕絨毛組織的滋養(yǎng)層細(xì)胞胞質(zhì)中陽性表達(dá)，且隨孕周增加，表達(dá)呈逐漸上升趨勢(shì);OPN在葡萄胎中表達(dá)明顯下降，且在完全性葡萄胎中比部分性葡萄胎中表達(dá)更低。國(guó)外有文獻(xiàn)報(bào)道，葡萄胎組織中OPN的表達(dá)明顯低于正常妊娠胎盤組織，如Feng等［17］采用抑制性消減雜交技術(shù)結(jié)合cDNA微陣列的方法比較完全性葡萄胎和同孕齡的早孕胎盤中基因的差別，發(fā)現(xiàn)OPN明顯下降。而Batorfi等［18］采用反轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)和免疫組織化學(xué)的方法檢測(cè)葡萄胎組織和同孕齡早孕胎盤組織中OPN的表達(dá)情況，也發(fā)現(xiàn)葡萄胎組織的OPN mRNA和蛋白表達(dá)明顯減少。薛菡等［19］采用免疫組化檢測(cè)方法研究發(fā)現(xiàn)，OPN在早孕期中的絨毛膜滋養(yǎng)層、絨毛外滋養(yǎng)細(xì)胞胞漿及胞膜中有較強(qiáng)的表達(dá)，提示在妊娠早期時(shí)OPN在調(diào)節(jié)滋養(yǎng)細(xì)胞侵入子宮過程中起一定的作用。與Briese等［20］報(bào)道的結(jié)果一致，在葡萄胎的滋養(yǎng)細(xì)胞層中OPN亦表達(dá)，但其表達(dá)量低于正常早孕絨毛組，這可能與完全性葡萄胎中滋養(yǎng)細(xì)胞侵蝕力下降有關(guān)，結(jié)果與Batorfi等［18］的一致。由此推測(cè)OPN的表達(dá)下降可能與葡萄胎的發(fā)生有一定關(guān)系。

5 Th1/Th2類細(xì)胞因子

目前認(rèn)為葡萄胎本身可能就存在良、惡性區(qū)分，現(xiàn)有手段尚不能鑒別兩者的細(xì)微變化。人體內(nèi)CD4+Th細(xì)胞可分為Th1與Th2細(xì)胞，Th1細(xì)胞分泌白細(xì)胞介素(interleukin，IL)2、IL-12、干擾素 γ、腫瘤壞死因子 β，Th2 細(xì)胞分泌 IL-4、5、6、10;兩細(xì)胞亞群均能分泌的細(xì)胞因子有粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞刺激因子、腫瘤壞死因子α、IL-3等。Th1和Th2細(xì)胞通過各自分泌的細(xì)胞因子相互制約，它們之間的平衡決定著機(jī)體細(xì)胞免疫與體液免疫之間的平衡。Karmakar等［21］研究發(fā)現(xiàn)，IL-12能顯著抑制絨毛膜癌細(xì)胞的運(yùn)動(dòng)與侵襲能力。Saito等［22］研究發(fā)現(xiàn)，Th1/Th2類細(xì)胞因子表達(dá)的失衡與滋養(yǎng)細(xì)胞疾病的發(fā)生發(fā)展相關(guān)，腫瘤組織多分泌Th2類細(xì)胞因子，機(jī)體處于Th2類細(xì)胞因子的優(yōu)勢(shì)狀態(tài)是腫瘤免疫逃逸機(jī)制之一，Th1/Th2細(xì)胞因子向Th2漂移時(shí)，葡萄胎惡變傾向增高。根據(jù)細(xì)胞因子的變化比病理組織變化更加敏感，可在細(xì)胞因子方面尋找比人絨毛膜促性腺激素更為敏感的葡萄胎臨床指標(biāo)來指導(dǎo)治療，以解決臨床上治療滯后的現(xiàn)象。

6 結(jié)語

滋養(yǎng)細(xì)胞腫瘤的轉(zhuǎn)移、浸潤(rùn)過程及其復(fù)雜，多因子參與，且相互作用。滋養(yǎng)細(xì)胞腫瘤的發(fā)生打破了滋養(yǎng)細(xì)胞巧妙的平衡，影響了細(xì)胞繁殖、分化、凋亡、侵蝕的細(xì)胞進(jìn)程。隨著對(duì)葡萄胎研究的深入，了解到滋養(yǎng)細(xì)胞腫瘤惡變的機(jī)制是多方面、多步驟的，有待于繼續(xù)研究。如果能在分子水平發(fā)現(xiàn)其變化，則有利于對(duì)葡萄胎的惡變作出早期診斷及干預(yù)，為預(yù)防性化療提供更準(zhǔn)確的指征，進(jìn)而逆轉(zhuǎn)或去除滋養(yǎng)細(xì)胞腫瘤的惡化，盡可能縮短低危葡萄胎的隨訪時(shí)間，使患者有更好的依從性。

［1］古聰敏，杜家輝，陳永鴻，等.印跡基因p57kip2［J］.臨床與實(shí)驗(yàn)病理學(xué)雜志，2008，24(3):349-352

［2］Merchant SH，Amin MB，Viswanatha DS，et al.p57kip2immunohistochemistry in early molar pregnancies:emphasis on its complementary role in the differential diagnosis of hydropic abortuses［J］.Hnm Pathol，2005，36(2):180-186.

［3］Thaker HM，Berlin A，Tycko B，et al.Immunohistochemistry for the imprinted gene product IPL/PHLDA2 for facilitating the differential diagnosis ofcomplete hydatidiform mole［J］.J Reprod Med，2004，49(8):630-636.

［4］Brown LM，Lacey HA，Baker PN，et al.E-cadherin in the assessment of aberrant placental cytotrophoblast turnover in pregnancies complicated by pre-eclampsia［J］.Histochem Cell Biol，2005，124(6):499-506.

［5］Rahnama F，Shafiei F，Gluckman PD，et al.Epigenetic regulation of human trophoblastic cell migration and invasion［J］.Endocrinology，2006，147(11):5275-5283.

［6］Xue WC，Chan KY，F(xiàn)eng HC，et al.Promoter hypermethylation of multiple genes in hydatidiform mole and choriocarcinoma［J］.J Mol Diagn，2004，6(4):326-334.

［7］Balaram P，Alex S，Panikkar B，et al.Adhesion-related proteins E-cadherin，P-cadherin，CD44and CD44v6，and antimetastatic protein nm23H1 in complete hydatidiform moles in relation to invasion potential［J］.Int J Gynecol Cancer，2004，4(3):532-539.

［8］王春陽，胡建功，邵雪齋，等.妊娠滋養(yǎng)細(xì)胞腫瘤中E-cadherin和p53的表達(dá)研究［J］.中國(guó)誤診學(xué)雜志，2009，9(12):2776-2778.

［9］Muir AI，Chamberlain L，Elshourbagy NA，et al.AXOR12，a novel human G protein-coupled receptor，activated by the peptide Kiss-1［J］.Biol Chem，2001，276(31):28969-28975.

［10］Horikoshi Y，Matsumoto H，Takatsu Y，et al.Dramatic elevation of plasma metast in concentrations in human pregnancy:Metastin as a novel placent-aderived hormone in humans［J］.Clin Endoccrinol Metab，2003，88(2):914-919.

［11］Bilban M，Ghaffari-Tabrizi N，Hintermann E，et al.Kisspeptin-10，a KiSS-1/metastin-derived decapeptide，is a physiological invasion inhibitor of primary human trophoblasts［J］.Cell Sci，2004，117(8):1319-1328.

［12］Janneau JL，Maldonado-Estrada J，Tachdjian G，et al.Transcriptional expression of genes involved in cell invasion and migration by normal and tumoral trophoblast cells［J］.Clin Endocrinol Metab，2002，87(11):5336-5339.

［13］喬寵，程大麗，張淑蘭.KiSS-1基因和基質(zhì)金屬蛋白酶-9在滋養(yǎng)細(xì)胞浸潤(rùn)調(diào)控中的作用［J］.中華醫(yī)學(xué)雜志，2005，85(12):839-842.

［14］Kotani M，Detheux M，Vandenbogaerde A，et al.The metastasis suppressor gene KiSS-1 encodes kisspeptins，the natural ligands of the orphan G protein-coupled receptor GPR54［J］.Biol Chem，2001，276(37):34631-34636.

［15］馬小玲，張玉泉.骨橋蛋白與葡萄胎的關(guān)系研究進(jìn)展［J］.中國(guó)生育健康雜志，2009，20(2):127-128.

［16］張宇.骨橋蛋白和MMP-2在人早孕絨毛及葡萄胎中的表達(dá)［D］.大連:大連醫(yī)科大學(xué)，2007.

［17］Feng HC，Tsao SW，Ngan HY，et al.Differential gene expression identified in complete hydatidiform mole by combining suppression subtractive hybridization and cDNA microarray［J］.Placenta，2006，27(4/5):521-526.

［18］Batorfi J，F(xiàn)ulop V，Kim JH，et al.Osteopontin is down-regulated in hydatidiform mole［J］.Gynecol Oncol，2003，89(1):134-139.

［19］薛菡，李紅發(fā).骨橋蛋白在葡萄胎、先兆子癇疾病中的表達(dá)［J］.中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志，2009，19(5):747-750.

［20］Briese J，Oberndorfer M，Patschenik C，et al.Osteopontin is colocalized with the adhesion molecule CEACAM1 in the extravillous trophoblast ofthehuman placentaand enhancesinvasion of CEACAM1-expressing placental cells［J］.Clin Endocrinol Metab，2005，90(9):5407-5413.

［21］Karmakar S，Dhar R，Das C.Inhibition of cytotrophoblastic(JEG-3)cell invasion by interleukin 12 involves an interferonrmediated pathway［J］.Biol Chem，2004，279(53):55297-55307.

［22］Saito S，Nakashima A，Myojo-Higuma S，et al.The balance between cytotoxic NK cells and regulatory NK cells in human pregnancy［J］.Reprod Immunol，2008，77(1):14-22.