復方甲酮栓的制備與質(zhì)量控制

鄧昌國，王秀萍，劉義福，馬雪花，童麗健，雍美玲，王璇（.蘭州軍區(qū)烏魯木齊總醫(yī)院藥劑科，烏魯木齊市 80000；.解放軍第6醫(yī)院藥劑科，阿勒泰市 8000；.石河子大學藥學院，石河子市 800）

復方甲酮栓的制備與質(zhì)量控制

鄧昌國1＊，王秀萍1，劉義福2，馬雪花3，童麗健1，雍美玲1，王璇1（1.蘭州軍區(qū)烏魯木齊總醫(yī)院藥劑科，烏魯木齊市 830000；2.解放軍第16醫(yī)院藥劑科，阿勒泰市 832000；3.石河子大學藥學院，石河子市 832002）

目的：制備復方甲酮栓并建立其質(zhì)量標準。方法：以甲硝唑和酮康唑為主藥制備復方甲酮栓；采用雙波長法測定復方甲酮栓中甲硝唑和酮康唑的含量。結(jié)果：所制栓劑的鑒別、檢查等符合《中國藥典》2010年版相關(guān)規(guī)定；甲硝唑和酮康唑檢測濃度線性范圍分別為 0.60～1.40、0.40～1.20μg·mL－1（r＝0.9999、0.9998）；平均回收率分別為104.78%（RSD＝0.14%）、101.77%（RSD＝0.05%）。結(jié)論：本制劑制備工藝簡便可行，質(zhì)量穩(wěn)定、可控。

復方甲酮栓；甲硝唑；酮康唑；制備；質(zhì)量控制

為了治療婦科滴蟲性、霉菌性、老年性、混合感染性陰道炎及宮頸糜爛等常見病，我院自制了甲硝唑栓（主要成分為甲硝唑）和復方酮替栓（主要成分為酮康唑和替硝唑），已獲蘭州軍區(qū)聯(lián)勤部衛(wèi)生部批準（蘭制字（2006）B02024號和蘭制字（2006）F02002號），這2種制劑均在臨床上取得了較為滿意的治療效果。為了獲得同樣的療效，并降低治療成本（因為替硝唑價格是甲硝唑市場價的近3倍），筆者又制備了復方甲酮栓，其主要成分為甲硝唑和酮康唑。該栓劑用法為每晚1粒，設(shè)計劑量每粒含甲硝唑和酮康唑各0.1g。設(shè)計依據(jù)是：甲硝唑[1]用于治療滴蟲病，每晚用量是200mg；酮康唑[1]用于陰道感染，每次用量是200～400mg，由于合并用藥故二者劑量均減小，符合臨床用藥原則。為控制其中甲硝唑和酮康唑的含量，筆者利用雙波長法[2]，在222、277nm波長處分別測定其中酮康唑和甲硝唑的含量，建立了相應的質(zhì)量控制方法。

1 儀器與試藥

Lambda 14紫外-可見分光光度計（美國珀金埃爾默有限責任公司）；AE240S型分析天平（梅特勒-托利多儀器（上海）有限公司）。

甲硝唑?qū)φ掌罚ㄖ袊幤飞镏破窓z定所，批號：100191-200305，純度：99.9%）；酮康唑?qū)φ掌罚暇┌拙从钪扑幱邢挢熑喂?，批號：KE090104，純度：99.9%）；甘油（南昌白云藥業(yè)有限公司，批號：20091206）；維生素E（浙江新昌制藥廠，批號：090207，純度：＞99%）；冰片（新疆本草堂中藥飲片有限公司，批號：09100802）；混合脂肪酸甘油酯（湖北東信藥業(yè)有限公司，批號：090649）；復方甲酮栓（蘭州軍區(qū)烏魯木齊總醫(yī)院藥劑科自制，批號：091221、091222、091223、091224、091225，規(guī)格：每粒1g，含甲硝唑和酮康唑均為0.1g）；其余試劑均為分析純。

2 處方與制備

2.1 處方

酮康唑30g，甲硝唑30g，冰片15g，甘油6mL，吐溫-806mL，維生素E 6mL，月桂氮酮15mL，混合脂肪酸甘油酯245.4g，制成300粒。

2.2 制備

取混合脂肪酸甘油酯置于容器中，加熱至熔化，等溫度降至60℃以下，加入冰片，攪拌使其溶解，分別依次加入甘油、吐溫-80、維生素E、月桂氮酮、甲硝唑、酮康唑，攪拌均勻，灌模，冷卻，凝固，刮平，脫模，包裝即得。

3 質(zhì)量控制

3.1 性狀

本品為脂肪性基質(zhì)制成的白色栓劑。

3.2 鑒別

甲硝唑：取本品2粒，加適量蒸餾水溶解，濾過，加氫氧化鈉試液2mL，溫熱，即得紫紅色溶液，滴稀鹽酸使成酸性后即變成黃色，再滴加過量氫氧化鈉試液則變成橙紅色[3]。

酮康唑：取本品1粒，加適量蒸餾水溶解，濾過，加0.1mol·L－1鹽酸5mL，滴加碘化鉍鉀試液，則出現(xiàn)橙紅色沉淀[4]。

3.3 檢查

3.3.1 重量差異。取栓劑10粒，精密稱定總重量，求得平均重量后，再分別精密稱定各粒的重量，每粒重量與平均粒重比較，規(guī)定限度范圍為±7.5%。結(jié)果，每粒重量與平均粒重相比，其重量差異在±5%以內(nèi)。

3.3.2 融變時限。取栓劑3粒，在室溫放置1h后，按規(guī)定裝置和方法進行操作，應在30min內(nèi)全部融化、軟化或觸壓時無硬心。結(jié)果，樣品在25min內(nèi)全部融化。

3.3.3 衛(wèi)生學檢查。按相應的檢驗方法檢查樣品，結(jié)果細菌數(shù)和霉菌數(shù)均符合規(guī)定，未檢出綠膿桿菌和大腸桿菌。

3.4 溶液的制備

3.4.1 對照品溶液。精密稱定甲硝唑、酮康唑?qū)φ掌犯?0mg，分別置于100mL容量瓶中，用0.1mol·L－1鹽酸溶液溶解并加至刻度，搖勻。再各取10mL分別置于100mL容量瓶中，加0.1mol·L－1鹽酸溶液至刻度，搖勻，備用。

3.4.2 供試品溶液。精密稱取復方甲酮栓0.1g（約含甲硝唑、酮康唑各10mg），放置在100mL的燒杯中，加0.1mol·L－1鹽酸溶液適量，在水?。?0℃以下）上加熱溶解，轉(zhuǎn)移至100mL的容量瓶中，用0.1mol·L－1鹽酸溶液加至刻度，搖勻，過濾，棄去初濾液，取續(xù)濾液10mL置于100mL容量瓶中，加0.1mol·L－1鹽酸溶液至刻度，搖勻，備用。

3.4.3 空白輔料溶液。精密稱取不含主藥甲硝唑和酮康唑的空白基質(zhì)0.1g，按照“3.4.2”項下的方法制備空白輔料溶液。

3.5 波長的選擇

取“3.4”項下4種溶液，在200～400nm波長范圍內(nèi)進行紫外掃描，結(jié)果見圖1。

圖1 紫外掃描光譜1.空白輔料；2.甲硝唑?qū)φ掌罚?.酮康唑?qū)φ掌罚?.供試品Fig 1 UV scanning spectrum1.blank excipients；2.metronidazole control；3.ketoconazole control；4.sample

由圖1可見，甲硝唑的最大吸收波長為277nm[4]，酮康唑的最大吸收波長為222nm[4]，在上述波長處輔料有少量吸收，對主藥分析有干擾，而用同批次的空白輔料溶液作空白對照，可消除干擾。

3.6 標準曲線的建立

分別精密吸取甲硝唑?qū)φ掌啡芤?、4、5、6、7mL，置于50mL容量瓶中，加0.1mol·L－1鹽酸溶液至刻度，搖勻，在277nm波長處測吸光度，以濃度（c）對吸光度（A）進行線性回歸；分別精密吸取酮康唑?qū)φ掌啡芤?、3、4、5、6mL，置于50mL容量瓶中，加0.1mol·L－1鹽酸溶液至刻度，搖勻，在222nm波長處測A，以c對A進行線性回歸，求得回歸方程。2種成分的線性關(guān)系見表1。

表1 線性關(guān)系Tab 1 Results of linear relationship

表1結(jié)果表明，甲硝唑、酮康唑檢測濃度線性范圍分別為0.60～1.40、0.40～1.20μg·mL－1。

3.7 回收率試驗

精密量取不含主藥甲硝唑和酮康唑的空白輔料溶液6份，分別加入一定量的甲硝唑和酮康唑?qū)φ掌啡芤?，分別向6份樣品中加0.1mol·L－1鹽酸溶液適量，在水?。?0℃以下）上加熱溶解，轉(zhuǎn)移至100mL的容量瓶中，用0.1mol·L－1鹽酸溶液加至刻度，搖勻。過濾，棄去初濾液，取續(xù)濾液10mL置于100mL容量瓶中，加0.1mol·L－1鹽酸溶液至刻度，搖勻。在222、277nm波長處，以空白輔料溶液作為空白對照，分別測定吸光度并計算甲硝唑和酮康唑的回收率，結(jié)果見表2。

3.8 精密度試驗

表2 加樣回收率試驗結(jié)果（n＝6）Tab 2Results of recovery tests（n＝6）

取供試品溶液5份，連續(xù)5次測定并計算含量。結(jié)果，甲硝唑的平均含量為107.05%，RSD＝0.46%；酮康唑的平均含量為96.78%，RSD＝1.25%，表明該方法的精密度能達到含量分析要求。

3.9 穩(wěn)定性試驗

選取供試品溶液1份，分別于0、1、2、4、6、8h測定吸光度。結(jié)果，222nm波長時平均吸光度為0.7285，RSD＝1.41%；277nm波長時平均吸光度為0.4365，RSD＝0.77%，表明供試品溶液在8h內(nèi)穩(wěn)定，能滿足含量測定要求。

3.10 樣品含量測定

將酮康唑和甲硝唑?qū)φ掌啡芤涸?22、277nm處分別測吸光度，以0.1mol·L－1的鹽酸溶液為空白對照。當檢測波長為222nm時，酮康唑1cmE1%＝530.6，甲硝唑1cmE1%＝205.3；當檢測波長277nm時，酮康唑1cmE1%＝25.5，甲硝唑1cmE1%＝389[3]。

根據(jù)Beer-Lambert定律和光吸收加和性原理，采用雙波長法進行含量測定，聯(lián)立方程求解，即：

上述公式中的A、c與Beer-Lambert定律的含義相同，即A代表吸光度，c代表濃度。

精密稱定5份復方甲酮栓樣品，每份0.1g（約含甲硝唑、酮康唑各10mg），分別加入0.1mol·L－1鹽酸溶液適量，在水?。?0℃以下）上加熱溶解，轉(zhuǎn)移至100mL的容量瓶中，用0.1mol·L－1鹽酸溶液加至刻度，搖勻，過濾，棄去初濾液，取續(xù)濾液10mL置于100mL容量瓶中，加0.1mol·L－1鹽酸溶液至刻度，搖勻，在222、277nm波長處以同批次的空白輔料溶液為空白對照分別測吸光度，代入上述方程。計算出酮康唑和甲硝唑的濃度及標示量，結(jié)果見表3（標示含量在90%～110%的范圍內(nèi)為含量合格）。

4 討論

王曉燕等[5]報道采用反相高效液相色譜（RP-HPLC）法測定酮甲霜中酮康唑和甲硝唑的含量，該制劑與筆者研制的復方甲酮栓有如下區(qū)別：（1）用途不同：酮甲霜用于治療皮膚病，復方甲酮栓用于治療婦科疾病。（2）劑型不同：酮甲霜為軟膏劑（或乳膏劑），而復方甲酮栓為栓劑。（3）含量測定方法不同：酮甲霜使用RP-HPLC法，RP-HPLC法中使用儀器較為昂貴，多數(shù)醫(yī)療單位無力購買，且操作人員需經(jīng)過專門培訓才能熟練掌握操作方法；而復方甲酮栓使用紫外分光光度法，該法操作簡便、快速，結(jié)果準確，且紫外分光光度儀的普及率高。

制劑中酮康唑與甲硝唑均為咪唑類化合物，合用無配伍禁忌。甲硝唑除用于抗滴蟲和阿米巴原蟲外，廣泛地用于抗厭氧菌感染[1]。酮康唑可抑制真菌細胞膜麥角甾醇的生物合成，從而抑制其生長，臨床用于治療陰道白色念珠菌病，以及白色念珠菌、類球孢子菌、組織胞漿菌等引起的全身感染。二者合用擴大了抗菌譜。該栓劑中加入吐溫-80和月桂氮酮，使栓劑穩(wěn)定性明顯提高。處方中維生素E可以促進皮膚黏膜新陳代謝，月桂氮酮可以促進藥物的黏膜吸收，冰片具有止痛和溫和的防腐作用，因此各組分合用后使栓劑具有更好的療效[6]。酮康唑和甲硝唑在乙醇和鹽酸液中都有紫外吸收，而采用鹽酸液可不經(jīng)分離，用雙波長法直接測定其含量，方法簡單，重復性好。

綜上所述，本制劑制備工藝簡便可行，質(zhì)量穩(wěn)定、可控。

表3 樣品含量測定結(jié)果（n＝5）Tab 3Results of content determination of samples（n＝5）

[1] 陳新謙，金有豫，湯 光.新編藥物學[M].第15版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2003：124-125、147-148.

[2] 馬廣慈，唐任寰，鄭斯成，等.藥物分析方法與應用[M].北京：科學出版社，2000：246-251.

[3] 劉震東，李建平，何鳳慈.復方氧氟沙星栓劑的制備與質(zhì)量標準研究[J].沈陽藥科大學學報，2000，17（1）：52.

[4] 國家藥典委員會編.中華人民共和國藥典（二部）[S].2010年版.北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010：153、1066-1067.

[5] 王曉燕，高 丹.RP-HPLC法測定酮甲霜中酮康唑和甲硝唑的含量[J].中國醫(yī)藥導報，2010，7（12）：79.

[6] 賈立平，李玉蓮，王 芳，等.復方酮替栓的制備及臨床應用[J].中國醫(yī)院藥學雜志，2001，21（11）：51.

Preparation and Quality Control of Compound Jiatong Suppositories

DENG Chang-guo，WANG Xiu-ping，TONG Li-jian，YONG Mei-ling，WANG Xuan（Dept.of Pharmacy，Urumqi General Hospital of Lanzhou Military Command，Urumqi 830000，China）
LIU Yi-fu（Dept.of Pharmacy，No.16Hospital of PLA，Aletai 832000，China）
MA Xue-hua（College of Pharmaceutical Sciences，Shihezi University，Shihezhi 832002，China）

OBJECTIVE：To prepare Compound jiatong suppositories，and to establish its quality standard.METHODS：Compound jiatong suppositories were prepared with metronidazole and ketoconazole as main components.Double wavelength coefficient method was used to determine the contents of metronidazole and ketoconazole.RESULTS：The identification and examination of preparation were in line with the standards stated in Chinese Pharmacopeia（2010edition）.The linear ranges of metronidazole and ketoconazole were 0.60～1.40μg·mL－1（r＝0.9999）and 0.40～1.20μg·mL－1（r＝0.9998）.The average recovery rates were 104.78%（RSD＝0.14%）and 101.77%（RSD＝0.05%），respectively.CONCLUSION：The method is feasible and simple，and the quality of preparation is stable and controllable.

Compound jiatong suppositories；Metronidazole；Ketoconazole；Preparation；Quality control

R943；R984

A

1001-0408（2011）25-2365-03

2011-01-07

2011-01-25）