銀杏葉復(fù)方制劑對(duì)實(shí)驗(yàn)性脾虛證模型小鼠內(nèi)臟器官發(fā)育及其抗氧化酶活性的影響研究

李焰 楊小燕 王華 周孝瓊 王千金 楊匯

摘要：采用利血平復(fù)制脾虛證小鼠模型，觀察銀杏葉復(fù)方制劑對(duì)實(shí)驗(yàn)性脾虛證模型小鼠內(nèi)臟器官發(fā)育及其抗氧化酶活性的影響。結(jié)果表明，①銀杏葉復(fù)方組小鼠胃、腎的指數(shù)較脾虛模型組有所提高但差異不顯著（Ｐ＞０．０５）；銀杏葉復(fù)方組小鼠小腸、脾的指數(shù)顯著高于脾虛模型組（Ｐ＜０．０５），與對(duì)照組差異不顯著（Ｐ＞０．０５）；脾虛模型組小鼠的肝、肺指數(shù)顯著高于銀杏葉復(fù)方組（Ｐ＜０．０５），銀杏葉復(fù)方組小鼠的肝、肺指數(shù)與對(duì)照組差異不顯著（Ｐ＞０．０５），提示銀杏葉復(fù)方有促進(jìn)脾虛小鼠脾胃發(fā)育和促進(jìn)肝臟的解毒作用，對(duì)脾虛模型小鼠的腎、肺功能亦有改善作用。②銀杏葉復(fù)方組小鼠脾臟、腎臟中ＭＤＡ含量較脾虛模型組顯著降低（Ｐ＜０．０５），而肝臟組織中ＳＯＤ和ＧＳＨ－Ｐｘ含量較脾虛模型組顯著提高（Ｐ＜０．０５），同時(shí)脾臟、腎臟和肝臟中Ｔ－ＡＯＣ含量較脾虛模型組顯著提高（Ｐ＜０．０５）。提示銀杏葉復(fù)方對(duì)脾虛小鼠的脾臟、腎臟和肝臟的功能有良好的保護(hù)作用。

關(guān)鍵詞：銀杏葉復(fù)方；脾虛證；利血平；內(nèi)臟器官；抗氧化酶；小鼠

中圖分類號(hào)：Ｓ８１６．７９文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：Ａ文章編號(hào)：0439－８114（２０11）15－3120-04

Ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ Ｇｉｎｋｇｏ bｉｌｏｂａ Ｃｏｍｐｏｕｎｄ ｏｎ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ Ｖｉｓｃｅｒａｌ Ｏｒｇａｎｓ ａｎｄ Ａｎｔｉｏｘｉｄａｓｅ Ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ Ｓｐｌｅｅｎ Ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ Ｍｏｕｓｅ

ＬＩ Ｙａｎ１，２，ＹANG Ｘｉａｏ－ｙａｎ１，２，ＷANG Ｈｕａ１，２，ＺHOU Ｘｉａｏ－ｑｉｏｎｇ１，３，ＷANG Ｑｉａｎ－ｊｉｎ１，ＹANG Ｈｕｉ１

（１．Ｃｏｌｌｇｅ ｏｆ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ｏｆ Ｌｏｎｇｙａｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ， Ｌｏｎｇｙａｎ ３６４０００，Ｆｕｊａｎ ，Ｃｈｉｎａ；

２． Ｋｅｙ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｏｆ Ｐｒｅｖｅｎｔｉｖｅ Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ， Ｅｄｕｃａｔｉｏｎａｌ Ｃｏｍｍｉｓｓｉｏｎ ｏｆ Ｆｕｊｉａｎ Ｐｒｏｖｉｎｃｅ，Ｌｏｎｇｙａｎ ３６４０００，Ｆｕｊａｎ ，Ｃｈｉｎａ；

３．Ｆｕｊｉａｎ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｃｅｎｔｅｒ ｆｏｒ Ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ ａｎｄ Ｃｏｎｔｒｏｌ ｏｆ Ｚｏｏｎｏｓｉｓ ａｎｄ Ｖｉｒａｌ Ｄｉｓｅａｓｅｓ； Ｌｏｎｇｙａｎ ３６４０００，Ｆｕｊａｎ ，Ｃｈｉｎａ）

Ａｂｓｔｒａｃｔ： Sｐｌｅｅｎ ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ ｍｏｕｓｅ ｉｎｄｕｃｅｄ ｂｙ ｒｅｓｅｒｐｉｎｅ ｗｅｒｅ ｕｓｅｄ ｔｏ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｇｉｎｋｇｏ ｃｏｍｐｏｕｎｄ ｏｎ ｔｈｅ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ ｖｉｓｃｅｒａｌ ｏｒｇａｎｓ ａｎｄ ｔｈｅｉｒ ａｎｔｉｏｘｉｄａｓｅ ａｃｔｉｖｉｔｙ． Ｔｈｅ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ｍｏｕｓｅ ｗｅｒｅ ｄｉｖｉｄｅｄ ｉｎｔｏ ｔｈｒｅｅ ｇｒｏｕｐｓ ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ ｇｉｎｋｇｏ ｃｏｍｐｏｕｎｄ ｇｒｏｕｐ （ＧＣ）， ｓｐｌｅｅｎ ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ ｇｒｏｕｐ （ＳＤ） ａｎｄ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ （Ｃｏｎｔｒｏｌ）． Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｕｇｇｅｓｔｅｄ ｔｈａｔ ｇｉｎｋｇｏ ｂｉｌｏｂａ ｃｏｍｐｏｕｎｄ ｃｏｕｌｄ ｐｒｏｍｏｔｅ ｔｈｅ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ ｓｐｌｅｅｎ ａｎｄ ｓｔｏｍａｃｈ ａｎｄ ａｃｃｅｌｅｒａｔｅ ｔｈｅ ｄｅｔｏｘｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｌｉｖｅｒ， ａｎｄ ａｌｓｏ ｉｍｐｒｏｖｅ ｔｈｅ ｆｕｎｃｔｉｏｎ ｏｆ ｋｉｄｎｅｙ ａｎｄ ｌｕｎｇ ｏｆ ｓｐｌｅｅｎ ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ ｍｏｕｓｅ． Ｔｈｅ ｉｎｄｅｘｅｓ ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ ｓｔｏｍａｃｈ， ｋｉｄｎｅｙ， ｓｍａｌｌ ｉｎｔｅｓｔｉｎｅ ａｎｄ ｓｐｌｅｅｎ ｉｎ ＧＣ appeared ｈｉｇｈｅｒ ｔｈａｎ ｔｈｏｓｅ ｉｎ ＳＤ ｗｈｉｌｅ ｔｈｅ ｉｎｄｅｘｅｓ ｏｆ ｓｍａｌｌ ｉｎｔｅｓｔｉｎｅ ａｎｄ ｓｐｌｅｅｎ ｗｅｒｅ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｈｉｇｈｅｒ， ｂｕｔ ｔｈｅ ｉｎｄｅｘｅｓ ｏｆ ｌｉｖｅｒ ａｎｄ ｌｕｎｇ ｉｎ ＧＣ ｗｅｒｅ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｌｏｗｅｒ ｔｈａｎ ｉｎ ＳＤ， ｗｈｅｒｅａｓ ｎｏ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ ａｍｏｎｇ ａｌｌ ｉｎｄｅｘｅｓ ｗａｓ ｆｏｕｎｄ ｂｅｔｗｅｅｎ ＧＣ ａｎｄ ｔｈｅ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ． Ｃｏｍｐａｒｅｄ ｗｉｔｈ ＳＤ ｇｒｏｕｐ， ｉｔ ｗａｓ ｆｏｕｎｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ＭＤＡ ｃｏｎｔｅｎｔ ｉｎ ｔｈｅ ｓｐｌｅｅｎ ａｎｄ ｋｉｄｎｅｙ ｏｆ ＧＣ ｇｒｏｕｐ ｗａｓ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｌｏｗｅｒ， ｗｈｉｌｅ ｔｈｅ ＳＯＤ ａｎｄ ＧＳＨ－Ｐｘ ｃｏｎｔｅｎｔ ｉｎ ｌｉｖｅｒ ａｎｄ ｔｈｅ Ｔ－ＡＯＣ ｃｏｎｔｅｎｔ ｉｎ ｓｐｌｅｅｎ， ｋｉｄｎｅｙ ａｎｄ ｌｉｖｅｒ ｗｅｒｅ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｈｉｇｈｅｒ．

Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： ｇｉｎｋｇｏ ｂｉｌｏｂａ ｃｏｍｐｏｕｎｄ； sｐｌｅｅｎ ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ ｓｙｎｄｒｏｍｅ； rｅｓｅｒｐｉｎｅ； vｉｓｃｅｒａｌ ｏｒｇａｎｓ； aｎｔｉｏｘｉｄａｓｅ； mｉｃｅ

銀杏（Ｇｉｎｋｇｏ ｂｉｌｏｂａ Ｌ．）是現(xiàn)存種子植物中最古老的孑遺植物［１］。銀杏葉被用作藥物已有５００余年的歷史，早在宋朝我國(guó)民間就已使用銀杏葉治療哮喘和支氣管炎?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究表明，銀杏葉及其提取物中含有豐富的黃酮類活性物質(zhì)和萜內(nèi)酯等有效成分，具有抗氧化、清除體內(nèi)有毒游離自由基、擴(kuò)張血管、保護(hù)機(jī)體組織和耐缺氧、抗脂質(zhì)過氧化、改善神經(jīng)調(diào)節(jié)功能等作用［２］。我國(guó)不僅是銀杏資源的古國(guó)，而且是銀杏資源大國(guó)，擁有量占全世界總量的７０％以上，具有較大的開發(fā)優(yōu)勢(shì)，但對(duì)銀杏葉的開發(fā)利用尚處于起步階段，落后于世界上一些先進(jìn)國(guó)家，較長(zhǎng)時(shí)間停留在葉子出口或提取粗產(chǎn)品的水平，造成了國(guó)有資源的浪費(fèi)［３］。銀杏葉的食用安全性較高［４］，目前臨床上銀杏葉制劑和復(fù)方銀杏葉制劑多用于治療心血管疾病，有關(guān)銀杏葉及其復(fù)方制劑用于畜禽疾病防治且作為畜禽飼料添加劑的報(bào)道較少見，并且僅停留在單方制劑（銀杏葉提取物）這個(gè)小范圍內(nèi)，缺乏在銀杏葉復(fù)方制劑方面的深入研究。復(fù)方中藥是單味藥物治病的進(jìn)一步發(fā)展，既能發(fā)揮單味藥的特長(zhǎng)，又能彌補(bǔ)單味藥的不足，更能增強(qiáng)效力。在大力提倡綠色食品的今天，中草藥具有的天然性、毒副作用小、不易產(chǎn)生耐藥性等優(yōu)勢(shì)是抗生素和化學(xué)合成藥物所無法比擬的。因此，本試驗(yàn)在課題組前期研究的基礎(chǔ)上，利用銀杏葉與中草藥（黃芪、白術(shù)、黨參、茯苓）配制成銀杏葉復(fù)方制劑，通過藥理學(xué)試驗(yàn)，對(duì)小鼠腹腔注射利血平復(fù)制脾虛證模型小鼠，觀察銀杏葉復(fù)方制劑對(duì)脾虛小鼠內(nèi)臟器官發(fā)育情況的影響，并結(jié)合銀杏葉復(fù)方制劑對(duì)脾臟、腎臟和肝臟的抗氧化能力進(jìn)行比較研究，為科學(xué)利用我國(guó)銀杏葉這一優(yōu)勢(shì)資源、研究一種以銀杏葉為主的中草藥飼料添加劑提供理論依據(jù)。

１材料和方法

１．１材料

１．１．１銀杏葉復(fù)方制劑的制備銀杏葉干粉由長(zhǎng)沙博健生物科技有限公司提供，產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)號(hào)：Ｑ／ＡＤＰＧ００１－２００８；黃芪、黨參、白術(shù)、茯苓購(gòu)于福建紫金醫(yī)藥連鎖有限公司，質(zhì)量符合中華人民共和國(guó)獸藥典（２００５版）標(biāo)準(zhǔn)。上述５種藥物按照質(zhì)量比為

５∶２∶１∶１∶１的比例混勻，采用水煮醇提的方法，首先分別用８倍、６倍和５倍量水煎煮１ ｈ，混合煎煮液并濃縮至１００ ｍＬ，再將煎煮液分別用７５％和８５％的乙醇混合過夜，并調(diào)節(jié)ｐＨ值至７．０左右，去除沉淀后用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮，制得每毫升含１ ｇ生藥的濃縮液。

１．１．２利血平注射液（１ ｍｇ／ｍＬ）廣東邦民制藥有限公司生產(chǎn)，產(chǎn)品批號(hào)０８０３０７。

１．１．３試驗(yàn)動(dòng)物６周齡ＫＭ種小鼠，雌性，體重２３～２８ ｇ，購(gòu)于福建醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心。

１．１．４實(shí)驗(yàn)性脾虛證模型小鼠的建立依據(jù)中醫(yī)脾虛證診斷參考標(biāo)準(zhǔn)，選擇利血平造脾虛模型，使用劑量參考文獻(xiàn)［５］進(jìn)行。通過動(dòng)物試驗(yàn)，以小鼠便溏、食欲減少、消瘦、呆立、群聚、活動(dòng)明顯減少等明顯脾虛體征為脾虛證模型復(fù)制成功，確定小鼠脾虛證模型使用劑量為０．２ ｍＬ/ｋｇ。

１．２試驗(yàn)動(dòng)物分組

ＫＭ種小鼠６０只，雌性，隨機(jī)分為對(duì)照組、脾虛模型組和銀杏葉復(fù)方組。每組設(shè)５個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)４只小鼠。對(duì)照組給予生理鹽水，分別灌胃（０．３ ｍＬ/ｄ）和腹腔注射（０．２ ｍＬ/ｋｇ）；脾虛模型組給予生理鹽水灌胃（０．３ ｍＬ/ｄ）和腹腔注射利血平（０．２ ｍＬ/ｋｇ），于第三天出現(xiàn)與文獻(xiàn)報(bào)道相符的癥狀；銀杏葉復(fù)方組分別給予銀杏葉復(fù)方制劑灌胃（０．３ ｍＬ/ｄ）和腹腔注射利血平（０．２ ｍＬ/ｋｇ）。每天給藥１次，連續(xù)１４ ｄ。

１．３測(cè)定指標(biāo)與方法

１．３．１小鼠內(nèi)臟器官指數(shù)測(cè)定小鼠在結(jié)束造模后禁食一夜，于次日上午從每個(gè)重復(fù)各?。敝恍∈螅瑪囝i處死后分別剖取心、肝、肺、脾、腎、胃和小腸，用濾紙吸干血跡并稱重，按以下公式計(jì)算內(nèi)臟器官指數(shù)：

內(nèi)臟器官指數(shù)＝內(nèi)臟器官重量／體重×１００％。

１．３．２小鼠肝臟、脾臟和腎臟組織抗氧化性能測(cè)定小鼠在結(jié)束造模后禁食一夜，于次日上午從每個(gè)重復(fù)各取一只小鼠，斷頸處死后分別剖取肝臟、脾臟和腎臟，用生理鹽水制成２０％的組織勻漿待測(cè)。丙二醛（ＭＤＡ）、谷胱甘肽過氧化物酶（ＧＳＨ－Ｐｘ）、超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）、總抗氧化能力（Ｔ－ＡＯＣ）含量均用購(gòu)自南京建成生物工程研究所的試劑盒測(cè)定，試劑配制和操作步驟按說明書進(jìn)行。

１．４數(shù)據(jù)處理

采用ＳＰＳＳ １０．０軟件進(jìn)行Ｏｎｅ－Ｗａｙ ＡＮＯＶＡ分析和Ｄｕｎｃａｎ氏多重比較，結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示。

２結(jié)果與分析

２．１銀杏葉復(fù)方制劑對(duì)脾虛模型組小鼠內(nèi)臟器官指數(shù)的影響

由表１可見，銀杏葉復(fù)方組小鼠胃和腎的器官指數(shù)均高于脾虛模型組（Ｐ＞０．０５），但低于對(duì)照組（Ｐ＜０．０５）；銀杏葉復(fù)方組小鼠小腸和脾的指數(shù)均顯著高于脾虛模型組（Ｐ＜０．０５），與對(duì)照組差異不顯著（Ｐ＞０．０５）；脾虛模型組的小鼠肝臟指數(shù)顯著高于對(duì)照組和銀杏葉復(fù)方組（Ｐ＜０．０５），銀杏葉復(fù)方組與對(duì)照組的小鼠肝臟指數(shù)差異不顯著（Ｐ＞０．０５）；脾虛模型組的小鼠肺臟指數(shù)顯著高于銀杏葉復(fù)方組和對(duì)照組（Ｐ＜０．０５），銀杏葉復(fù)方組的小鼠肺臟指數(shù)與對(duì)照組相比差異不顯著（Ｐ＞０．０５）。

２．２銀杏葉復(fù)方制劑對(duì)脾虛模型組小鼠脾臟、腎臟和肝臟組織抗氧化性能的影響

２．２．１銀杏葉復(fù)方制劑對(duì)脾虛模型組小鼠脾臟組織抗氧化性能的影響由表２可見，脾虛模型組小鼠脾臟ＭＤＡ含量極顯著高于對(duì)照組（Ｐ＜０．０１），ＳＯＤ、ＧＳＨ－Ｐｘ、Ｔ－ＡＯＣ含量均極顯著低于對(duì)照組（Ｐ＜０．０１）。銀杏葉復(fù)方組小鼠脾臟ＭＤＡ含量極顯著低于脾虛模型組（Ｐ＜０．０１），與對(duì)照組相比差異不顯著（Ｐ＞０．０５）；銀杏葉復(fù)方組小鼠脾臟ＳＯＤ、ＧＳＨ－Ｐｘ含量較脾虛模型組有所提高但差異不顯著（Ｐ＞０．０５）；銀杏葉復(fù)方組小鼠脾臟Ｔ－ＡＯＣ含量較脾虛模型組顯著提高（Ｐ＜０．０５）。

２．２．２銀杏葉復(fù)方制劑對(duì)脾虛模型組小鼠腎臟組織抗氧化性能的影響由表３可見，脾虛模型組小鼠腎臟ＭＤＡ含量顯著高于對(duì)照組（Ｐ＜０．０５），ＳＯＤ、ＧＳＨ－Ｐｘ含量均低于對(duì)照組，但差異不顯著（Ｐ＞０．０５），Ｔ－ＡＯＣ含量顯著低于對(duì)照組（Ｐ＜０．０５）。銀杏葉復(fù)方組小鼠腎臟ＭＤＡ含量較脾虛模型組顯著降低（Ｐ＜０．０５），與對(duì)照組含量差異不顯著（Ｐ＞０．０５）；銀杏葉復(fù)方組小鼠腎臟ＳＯＤ、ＧＳＨ－Ｐｘ含量與脾虛模型組和對(duì)照組相比差異不顯著（Ｐ＞０．０５），銀杏葉復(fù)方組小鼠腎臟Ｔ－ＡＯＣ含量較脾虛模型組顯著提高（Ｐ＜０．０５），與對(duì)照組相比差異不顯著（Ｐ＞０．０５）。

２．２．３銀杏葉復(fù)方制劑對(duì)脾虛模型組小鼠肝臟組織抗氧化性能的影響由表４可見，脾虛模型組小鼠肝臟ＭＤＡ含量極顯著高于對(duì)照組（Ｐ＜０．０１），ＳＯＤ、ＧＳＨ－Ｐｘ、Ｔ－ＡＯＣ含量均極顯著低于對(duì)照組（Ｐ＜０．０１）。銀杏葉復(fù)方組小鼠肝臟ＭＤＡ含量與脾虛模型組相比差異不顯著（Ｐ＞０．０５），ＳＯＤ和ＧＳＨ－Ｐｘ含量較脾虛模型組極顯著提高（Ｐ＜０．０１），Ｔ－ＡＯＣ含量較脾虛模型組也顯著提高（Ｐ＜０．０５）。

３討論

３．１銀杏葉復(fù)方制劑對(duì)脾虛模型組小鼠內(nèi)臟器官指數(shù)的影響

銀杏葉復(fù)方組小鼠小腸和脾的指數(shù)均顯著高于脾虛模型組且與對(duì)照組差異不顯著，顯示銀杏葉復(fù)方制劑有促進(jìn)脾虛小鼠消化器官和免疫器官發(fā)育的作用。肝臟是重要的解毒器官，研究發(fā)現(xiàn)脾虛證可導(dǎo)致模型動(dòng)物的肝壞死、變性［６］，本試驗(yàn)中脾虛模型組的肝臟指數(shù)顯著高于對(duì)照組和銀杏葉復(fù)方組，而銀杏葉復(fù)方組與對(duì)照組的肝臟指數(shù)差異不顯著，一方面可能是利血平導(dǎo)致脾虛模型小鼠肝臟代償性增生的結(jié)果，同時(shí)與銀杏葉復(fù)方制劑促進(jìn)小鼠肝臟解毒作用有關(guān)。脾虛證的影響學(xué)研究表明，脾陽(yáng)虛證肺紋理的主要改變?yōu)槟：?、紊亂、扭曲、中斷，并有顆粒斑點(diǎn)及網(wǎng)狀陰影［７］。本試驗(yàn)中脾虛模型組的肺臟指數(shù)顯著高于對(duì)照組和銀杏葉復(fù)方組，器官指數(shù)是檢測(cè)反應(yīng)物質(zhì)可能對(duì)臟器有毒性作用的指標(biāo)之一，試驗(yàn)結(jié)果表明利血平亦可導(dǎo)致脾虛模型小鼠肺代償性增生，銀杏葉復(fù)方組的小鼠肺指數(shù)與對(duì)照組相比差異不顯著，表明銀杏葉復(fù)方制劑對(duì)脾虛模型小鼠的肺功能有改善作用。

“脾胃”是中醫(yī)學(xué)上的名稱，一般泛指人體的整個(gè)消化系統(tǒng)，其中主要包括胃腸道等重要器官?！捌⑻撟C”是以消化功能低下為主的多器官和多系統(tǒng)功能減弱的綜合病理變化［８］，故脾胃內(nèi)傷是百病由生的主要內(nèi)容。試驗(yàn)表明，銀杏葉復(fù)方制劑可促進(jìn)脾虛小鼠脾胃發(fā)育和促進(jìn)肝臟的解毒作用，對(duì)脾虛模型小鼠的腎和肺功能亦有改善作用，分析認(rèn)為銀杏葉復(fù)方制劑的這種作用與方中各種有效成分有關(guān)。方中銀杏葉性味甘、苦、澀、平，歸心、肺經(jīng)，有斂肺、平喘、活血化瘀、止痛之功效；黃芪性味甘、溫，歸肺、脾經(jīng)，有補(bǔ)氣固表之功效，可促進(jìn)血清和肝臟蛋白質(zhì)代謝，同時(shí)黃芪中的主要成分——黃芪多糖可改善脾虛小鼠的消化吸收功能［９］；黨參，性味甘、平，入脾、肺經(jīng)，具健脾補(bǔ)肺、益氣生津之功；白術(shù)、茯苓二藥均能益氣健脾，白術(shù)苦溫而善于燥濕，茯苓甘淡而善于滲濕，合而用之，一燥一濕，健脾除濕，相輔相成，成為古今治療脾氣虛證及脾虛泄瀉的經(jīng)典小方和常用藥材。中醫(yī)五行理論認(rèn)為心屬火，脾屬土，而火又生土，所以黃芪、黨參、白術(shù)、茯苓配以銀杏葉相得益彰。

３．２銀杏葉復(fù)方制劑對(duì)脾虛模型組小鼠肝臟、脾臟和腎臟組織抗氧化性能的影響

本試驗(yàn)采用利血平復(fù)制小動(dòng)物脾虛模型是一種成熟的方法，研究表明脾虛動(dòng)物存在體內(nèi)過氧化與抗氧化之間的平衡失調(diào)，脾虛證患者的抗氧化酶（ＧＳＨ－Ｐｘ、ＳＯＤ等）活性降低，ＭＤＡ含量升高［１０－１２］。試驗(yàn)中脾虛模型組小鼠肝、脾和腎臟的ＧＳＨ－Ｐｘ、ＳＯＤ的活性均低于對(duì)照組，而ＭＤＡ含量均高于對(duì)照組，這表明脾虛模型的復(fù)制是成功的。

正常情況下機(jī)體抗氧化體系處于動(dòng)態(tài)平衡狀態(tài)，但在內(nèi)外因的作用下這種平衡被破壞，使機(jī)體產(chǎn)生過多的氧自由基，氧自由基可攻擊生物膜中的多不飽和脂肪酸，引發(fā)脂質(zhì)過氧化反應(yīng)，從而形成脂質(zhì)過氧化物，如ＭＤＡ。ＭＤＡ的含量可反映機(jī)體脂質(zhì)過氧化物的生成速率和強(qiáng)度，間接反映組織氧化損傷程度。機(jī)體對(duì)活性氧和自由基的清除主要由ＳＯＤ、ＧＳＨ－Ｐｘ和Ｔ－ＡＯＣ等酶促系統(tǒng)的活性增強(qiáng)來完成。因此，機(jī)體抗氧化能力可通過血液中ＧＳＨ－Ｐｘ、ＳＯＤ和Ｔ－ＡＯＣ等指標(biāo)來體現(xiàn)。試驗(yàn)中銀杏葉復(fù)方組小鼠脾臟、腎臟中ＭＤＡ含量較脾虛模型組顯著降低，而肝臟組織中ＳＯＤ和ＧＳＨ－Ｐｘ含量較脾虛模型組顯著提高，同時(shí)脾臟、腎臟和肝臟Ｔ－ＡＯＣ含量較脾虛模型組顯著提高，提示銀杏葉復(fù)方制劑對(duì)脾虛小鼠的脾臟、腎臟和肝臟的功能有良好的保護(hù)作用。銀杏葉復(fù)方制劑對(duì)脾虛證小鼠這種良好的預(yù)防效果，與方中銀杏葉等各味藥的抗氧化作用有關(guān)。本試驗(yàn)采用水煮醇提法，最大程度地提取了方中各味藥物的有效成分，其中銀杏葉提取物對(duì)生物體所產(chǎn)生的活性氧具有很強(qiáng)的清除作用，可以延緩衰老［１３］；通過補(bǔ)充外源性抗氧化物質(zhì)或促進(jìn)機(jī)體產(chǎn)生內(nèi)源性抗氧化物質(zhì)，有效拮抗自由基對(duì)細(xì)胞膜的損傷，是一種高效的自由基清除劑［１４］；同時(shí)銀杏葉提取物還可參與調(diào)解和提高過氧化物歧化酶、谷胱甘肽過氧化物酶等抗氧化酶的活性，從而加快了自由基的清除［１５］；黃芪總黃酮是黃芪的主要活性成分之一，具有抗氧化、抗腫瘤、抗突變等多種生物學(xué)功能［１６］；黨參具有上調(diào)抗氧化酶表達(dá)作用，能抵抗氧自由基損傷［１７］；白術(shù)和茯苓均有抗氧化、清除自由基的作用［１８，１９］。上述藥物按一定比例組合，可綜合發(fā)揮其良好的抗氧化作用。

綜上所述，銀杏葉復(fù)方制劑具有促進(jìn)脾虛模型小鼠脾胃發(fā)育和肝臟解毒的作用，對(duì)脾虛模型小鼠的腎和肺功能亦有改善作用?？寡趸囼?yàn)表明，銀杏葉復(fù)方制劑對(duì)脾虛模型小鼠的脾臟、腎臟和肝臟的功能有良好的保護(hù)作用。

參考文獻(xiàn)：

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