光皮樹(shù)籽油功能性作用的研究

黃翠莉，吳蘇喜，*，郝澤金，肖志紅

(1.長(zhǎng)沙理工大學(xué)化學(xué)與生物工程學(xué)院，湖南長(zhǎng)沙410114; 2.湖南省林業(yè)科學(xué)院，湖南長(zhǎng)沙410004)

光皮樹(shù)籽油功能性作用的研究

黃翠莉1，吳蘇喜1，*，郝澤金1，肖志紅2

(1.長(zhǎng)沙理工大學(xué)化學(xué)與生物工程學(xué)院，湖南長(zhǎng)沙410114; 2.湖南省林業(yè)科學(xué)院，湖南長(zhǎng)沙410004)

為了研究光皮樹(shù)籽油的輔助降血脂功能，將SD大鼠隨機(jī)分成4組:空白對(duì)照組、高脂對(duì)照組、高劑量組、低劑量組，并以高脂飼料建立實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ汀Ｍ瑫r(shí)又對(duì)不同組別大鼠的肝系數(shù)及動(dòng)脈粥樣硬化指數(shù)AI值進(jìn)行比較。結(jié)果表明:光皮樹(shù)籽油能顯著降低大鼠血清總膽固醇、甘油三酯的水平(p＜0.05)，而對(duì)大鼠高密度脂蛋白膽固醇HDL-C水平無(wú)顯著影響(p＞0.05)。由此可知，光皮樹(shù)籽油具有降血脂功能，同時(shí)還具有一定的預(yù)防脂肪肝和防止動(dòng)脈粥樣硬化的作用。

光皮樹(shù)籽油，血脂，脂肪肝，動(dòng)脈粥樣硬化

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

光皮樹(shù)籽 由湖南林業(yè)科學(xué)院提供，經(jīng)去殼、烘干、粉碎后過(guò)0.37mm×0.37mm孔徑的泰勒標(biāo)準(zhǔn)篩(下稱(chēng)“40目篩”)，備用;膽固醇、膽酸鈉 安徽天啟化工科技有限公司提供;豬油、蛋黃粉 市售后自制;CO2純度99.99%(食用級(jí));甘油三酯、總膽固醇、高密度脂蛋白膽固醇試劑盒 北京萬(wàn)泰德瑞診斷技術(shù)有限公司提供;基礎(chǔ)飼料 面粉20%，米粉l0%，玉米20%，鼓皮25%.豆料20%，骨粉2%，魚(yú)粉2%;高脂飼料 基礎(chǔ)飼料80%、膽固醇2%、膽酸鈉0.5%、蛋黃粉5%、豬油12.5%。

表2 不同組別對(duì)大鼠體重的影響(s)

表2 不同組別對(duì)大鼠體重的影響(s)

注:b.高脂對(duì)照組相比較，p＜0.05。

組別 劑量組(mg/kg·d) 大鼠數(shù)量(只) 初始體重(g) 終末體重(g)高脂對(duì)照組1.5 10 157.48±37.28 377.56±29.58 0.0 10 161.28±54.13 394.74±68.15空白對(duì)照組 0.0 10 159.90±34.59 345.18±43.2b高劑量組 7.0 10 157.66±16.23 341.47±46.9b低劑量組

表3 大鼠血脂各項(xiàng)指標(biāo)的比較(s)

表3 大鼠血脂各項(xiàng)指標(biāo)的比較(s)

注:a.與高脂對(duì)照組有極顯著性差異(P＜0.01);b.與高脂對(duì)照組有顯著性差異(P＜0.05);表4、表5同。

組別 劑量組(mg/kg·d) 大鼠數(shù)量(只) TG(mmol/L) TC(mmol/L) HDL-C(mmol/L)高脂對(duì)照組0.0 10 2.73±0.37 2.85±0.55 1.36±0.14空白對(duì)照組 0.0 10 1.02±0.31a 2.09±0.35a 1.77±0.23a高劑量組 7.0 10 1.34±0.52b 2.13±0.31b 1.47±0.18低劑量組 1.5 10 1.81±0.75b 2.48±0.46b1.32±0.25

HA120-50-01型超臨界萃取裝置 江蘇南通華安超臨界萃取有限公司;高速萬(wàn)能粉碎機(jī)北京市永光明醫(yī)療儀器廠;SZC-C脂肪測(cè)定儀 上海纖檢儀器有限公司;GC-14C氣相色譜儀 日本島津;TG16-W微量離心機(jī) 湘儀離心機(jī)儀器有限公司。

1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

SD大鼠，體重(160±10)g，雄性，SD大鼠使用許可證號(hào):SCXK(湘)2009-0013;均由長(zhǎng)沙市開(kāi)福區(qū)東創(chuàng)實(shí)驗(yàn)室動(dòng)物科技服務(wù)部提供。飼養(yǎng)溫度:(25± 2)℃，相對(duì)濕度:55%±2%。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 光皮樹(shù)籽油的制備 稱(chēng)取過(guò)40目篩的去殼光皮樹(shù)籽仁粉200g裝入超臨界CO2萃取裝置［6］的萃取罐中，設(shè)置萃取釜的壓力為25～35MPa、溫度為35～45℃，分離釜的壓力為6～7MPa。泵入CO2，待達(dá)到設(shè)定條件后連續(xù)萃取1～2h，CO2氣化后循環(huán)使用，萃取液從分離釜底部放出，稱(chēng)質(zhì)量收集備用。

1.3.2 油脂的理化指標(biāo)測(cè)定 色澤:參照 GB/T 22460-2008《動(dòng)植物油脂羅維朋色澤的測(cè)定》，使用25.4mm光程玻璃比色皿;酸價(jià):參照GB/T 5530-2005《動(dòng)植物油脂酸值和酸度測(cè)定》酸堿中和滴定法;過(guò)氧化值:參照GB/T 553-2005《動(dòng)植物油脂過(guò)氧化值測(cè)定》。

1.3.3 動(dòng)物分組 購(gòu)買(mǎi)的40只雄性大鼠先每天喂以基礎(chǔ)飼料，等4d適應(yīng)新的生存環(huán)境后再隨機(jī)分成四組。A組:高脂對(duì)照組;B組:空白對(duì)照組;C組:光皮樹(shù)籽油高劑量組;D組:光皮樹(shù)籽油低劑量組。每組10只平均分到兩個(gè)相同籠子里飼養(yǎng)。

1.3.4 劑量選擇 A組喂以高脂飼料并按9mg/kg·d的劑量灌胃生理鹽水，B組喂以基礎(chǔ)飼料并按9mg/kg·d的劑量灌胃生理鹽水，C組、D組喂高脂飼料并分別按7.0、1.5mg/kg·d灌胃光皮樹(shù)籽油。所有動(dòng)物的飼料按100g/kg·d喂食，自由飲水。連續(xù)飼喂7周，每周稱(chēng)其重量并根據(jù)體重改變灌胃劑量。

1.3.5 待測(cè)樣品的制備 實(shí)驗(yàn)大鼠7周后，末次進(jìn)食灌胃后禁食12h，從心臟取血2～3mL置于離心管中，靜止半小時(shí)后3000r/min離心7min，取上層血清備用。

1.3.6 血清的檢測(cè)方法 大鼠血清的總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HLD-C)含量的測(cè)定按試劑盒操作;致動(dòng)脈硬化指數(shù)(AI)=(TC-HDL-C)/HDL-C;肝臟指數(shù)(%)=肝臟重(濕重)(g)/體重(g)×100%。

2 結(jié)果與分析

2.1 光皮樹(shù)籽油的基本理化指標(biāo)

超臨界CO2萃取的光皮樹(shù)籽油的基本理化指標(biāo)如表1所示，達(dá)到國(guó)家一級(jí)食用油標(biāo)準(zhǔn)。

表1 光皮樹(shù)籽油的基本理化指標(biāo)

2.2 不同組別對(duì)大鼠體重的影響

動(dòng)物飼養(yǎng)期間，每周定期稱(chēng)量體重。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后得出每周體重的變化量及其最終體重，見(jiàn)圖1和表2。

圖1 不同組別大鼠每周體重增長(zhǎng)量的變化圖

由圖1可以看出每個(gè)組別老鼠體重的增長(zhǎng)量都是先增加后減少，不同組別之間老鼠體重的增長(zhǎng)量基本上是高脂對(duì)照組＞低劑量組＞空白對(duì)照組＞高劑量組。由表2更明顯地看出，空白對(duì)照組和高劑量組大鼠的體重與高脂對(duì)照組比較，有顯著性差異(p＜0.05)。低劑量組大鼠的體重與高脂對(duì)照組沒(méi)有顯著性差異(p＞0.05)。

2.3 不同組別對(duì)大鼠血脂的影響

通過(guò)對(duì)比血脂各項(xiàng)指標(biāo)的變化來(lái)判斷動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的結(jié)果如何。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的結(jié)果判定有三個(gè):甘油三酯(TG)、總膽固醇(TC)、高密度脂蛋白膽固醇(HLD-C)。大鼠血脂的各項(xiàng)指標(biāo)結(jié)果見(jiàn)表3。

大鼠血脂的各項(xiàng)指標(biāo)與人類(lèi)血脂的各項(xiàng)指標(biāo)相比，對(duì)于甘油三酯(TG)，空白對(duì)照組和高劑量組在正常范圍(0～1.7mmol/L)之內(nèi)，高脂對(duì)照組和低劑量組高出正常范圍;對(duì)于總膽固醇(TC)及高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)，大鼠四個(gè)組別的指標(biāo)都在人類(lèi)指標(biāo)的正常范圍之內(nèi)。

不同組別之間大鼠血脂各項(xiàng)指標(biāo)的比較，由表3可知，高脂對(duì)照組與空白對(duì)照組中血脂的各項(xiàng)指標(biāo)都有極顯著的差異(p＜0.01)，表明本實(shí)驗(yàn)的高脂造模非常成功。光皮樹(shù)籽油高劑量組和低劑量組中的甘油三酯(TG)及總膽固醇(TC)指標(biāo)與高脂對(duì)照組比較有顯著性差異(p＜0.05)，而高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)與高脂對(duì)照組無(wú)顯著性差異，根據(jù)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果判定指標(biāo)可知，光皮樹(shù)籽油具有降低血脂、總膽固醇的作用。光皮樹(shù)籽油高、低劑量組之間相比，三個(gè)指標(biāo)都是劑量越多指標(biāo)越好，進(jìn)一步說(shuō)明了光皮樹(shù)籽油的降血脂作用。

2.4 不同組別對(duì)大鼠肝系數(shù)的影響

脂肪肝的形成，其中一個(gè)比較主要的因素就是高血脂。本實(shí)驗(yàn)主要通過(guò)直觀的肝系數(shù)比較及肝臟外觀比較來(lái)研究脂肪肝與高血脂的關(guān)系。肝系數(shù)見(jiàn)表4。

表4 不同組別大鼠肝系數(shù)的比較(s)

表4 不同組別大鼠肝系數(shù)的比較(s)

組別 劑量組(mg/kg·d)大鼠數(shù)量(只) 肝系數(shù) P值高脂對(duì)照組 0.0 10 0.047±0.002—空白對(duì)照組 0.0 10 0.029±0.001a 0.000高劑量組 7.0 10 0.033±0.005a 0.001低劑量組 1.5 10 0.037±0.005a 0.004

肝系數(shù)越小，預(yù)防脂肪肝的效果越好。由表4可知，肝系數(shù)從小到大的順序是:空白對(duì)照組＜高劑量組＜低劑量組＜高脂對(duì)照組，并且其它三個(gè)組別和高脂對(duì)照組相比較都有極顯著性差異(p＜0.01)。表3實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)也顯示，血脂含量從小到大的順序是:空白對(duì)照組＜高劑量組＜低劑量組＜高脂對(duì)照組，表明脂肪肝的得病率和血脂含量成正相關(guān)關(guān)系。

2.5 不同組別大鼠肝臟病理切片的比較

病理切片是反映大鼠肝臟最準(zhǔn)確、最具有科學(xué)依據(jù)的手段，可以用它來(lái)明確肝臟病的診斷及病變程度。不同組別大鼠肝臟的病理切片圖見(jiàn)圖2。

圖2 不同組別大鼠肝臟的病理切片圖(240×)注:紫黑色的實(shí)點(diǎn)是肝細(xì)胞，亮點(diǎn)的大水泡是脂肪。

在正常情況下，肝臟只含有少量脂肪，約占肝臟重量的3%～4%。在某些異常情況下:肝臟內(nèi)的脂肪含量增加，當(dāng)其脂肪含量超過(guò)肝臟重量(濕重)的5%～10%時(shí)為輕度脂肪肝，超過(guò)10%～25%為中度脂肪肝，超過(guò)25%～50%為重度脂肪肝。

綜上所述，由圖2的病理切片結(jié)果中可以得出，空白對(duì)照組、光皮樹(shù)籽油高劑量組的肝臟屬于正常狀態(tài);低劑量組為中度脂肪肝;高脂對(duì)照組屬于重度脂肪肝。這一結(jié)果也驗(yàn)證了高血脂易造成脂肪肝。

2.6 不同組別對(duì)大鼠動(dòng)脈粥樣硬化指數(shù)的影響

致動(dòng)脈粥樣硬化(AI)值越小，預(yù)防動(dòng)脈粥樣硬化的效果越好。

由表5可知，不同組別實(shí)驗(yàn)大鼠的AI值都偏小，組別之間大鼠的AI值差異比較明顯。其它三組與高脂對(duì)照組比較都具有極顯著性差異(p＜0.01)，空白對(duì)照組差異最顯著，光皮樹(shù)籽油的高劑量組比低劑量組差異性顯著。因此光皮樹(shù)籽油能夠預(yù)防動(dòng)脈粥樣硬化，并隨著劑量的增加效果更好。

表5 不同組別致大鼠動(dòng)脈粥樣硬化指數(shù)的比較s)

表5 不同組別致大鼠動(dòng)脈粥樣硬化指數(shù)的比較s)

組別 劑量組(mg/kg·d)大鼠數(shù)量(只) AI P值高脂對(duì)照組 0.0 10 0.609±0.035—空白對(duì)照組 0.0 10 0.162±0.004a 0.000高劑量組 7.0 10 0.384±0.031a 0.001低劑量組 1.5 10 0.441±0.036a 0.003

3 結(jié)論

動(dòng)物取血的方式一般是脫頸［7-8］或摘眼球［9］，很容易混進(jìn)組織液。本實(shí)驗(yàn)大鼠的血液是從心臟中制取，保證了血液的純度，使實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)更加可靠。

光皮樹(shù)籽油能夠顯著地降低甘油三酯、總膽固醇，具有很好的輔助降血脂的作用;并隨著光皮樹(shù)籽油劑量的增加，其效果更加明顯;但是對(duì)高密度脂蛋白膽固醇的影響效果不顯著。光皮樹(shù)籽油對(duì)脂肪肝還有一定的預(yù)防作用，同時(shí)還可以降低動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)病率。

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Study on the functional effect of the oils from Swida wilsoniana seeds

HUANG Cui-li1，WU Su-xi1，*，HAO Ze-jin1，XIAO Zhi-hong2
(1.College of Chemistry and Bio-engineering，Changsha University of Science＆Technology，Changsha 410004，China; 2.Hunan Academy of Forestry Science，Changsha 410004，China)

In order to study the effects of the oils from Swida wilsoniana seeds on reducing blood lipid and preventing the fatty liver of rats，SD rats were used as experimental animals.Rats were random divided into four groups，namely blank control group，high fat control group，high-dose group and low-dose group.The experimental model was established with high fat feed.At the same time，the liver factor and AI were determined. The oils from Swida wilsoniana seeds can significantly decrease the levels of TG and TC in serum of high fat diet rats(p＜0.05).Each dose had no remarkable effect on HDL-C level in serum of rats(p＞0.05).The results demonstrated the effects of oils from Swida wilsoniana seeds on reducing blood lipid，preventing fatty liver and atherosclerosis.

the oils from Swida wilsoniana seeds;blood fat;fatty liver;atherosclerosis

TS225.1+9

A

1002-0306(2011)11-0403-03

心血管病已成為危害人類(lèi)健康最嚴(yán)重的三大疾病之一，而高血脂又是造成心血管病的主要因素。大量研究資料表明，高血脂癥是腦中風(fēng)、冠心病、心肌梗死、猝死的危險(xiǎn)因素，也是引起人類(lèi)動(dòng)脈粥樣硬化的主要危險(xiǎn)因素。因此有關(guān)降血脂新產(chǎn)品的開(kāi)發(fā)研究日益受到人們的重視。光皮樹(shù)是我國(guó)近年來(lái)大量種植開(kāi)發(fā)的植物燃料油原料樹(shù)種［1］，光皮樹(shù)籽油已被用作優(yōu)質(zhì)生物柴油原料油［2-4］。但是，光皮樹(shù)籽油脂肪酸組成中，含不飽和脂肪酸77.68%，其中油酸38.3%、亞油酸38.85%［5］。從食用角度來(lái)考慮，它應(yīng)該是一種安全的可食用油，只是由于資源的限制而很少被人們當(dāng)做日常食用油罷了。為了開(kāi)發(fā)利用光皮樹(shù)籽油的保健價(jià)值，提高附加值，豐富市場(chǎng)上的木本食用油品種，有必要通過(guò)大鼠動(dòng)物實(shí)驗(yàn)來(lái)研究光皮樹(shù)籽油的降血脂、預(yù)防脂肪肝和抗動(dòng)脈粥樣硬化等功能。有關(guān)光皮樹(shù)籽油在這方面的功能性研究尚未見(jiàn)過(guò)報(bào)道。

2010-10-08 *通訊聯(lián)系人

黃翠莉(1985-)，女，碩士研究生，研究方向:食用油脂資源開(kāi)發(fā)。

國(guó)家林業(yè)公益性行業(yè)科研專(zhuān)項(xiàng)(2010-4071);湖南省科技計(jì)劃項(xiàng)目(2010WK2004，2010Ck3024);長(zhǎng)沙市科技計(jì)劃項(xiàng)目(k1003018-21)。