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    紡錘體組裝檢測(cè)點(diǎn)基因BubR1的研究進(jìn)展

    2011-10-22 11:04:07陳曌君綜述
    關(guān)鍵詞:著絲點(diǎn)紡錘體微管

    陳曌君,李 鋒,楊 軍 綜述

    (1.浙江大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院毒理系,浙江 杭州 310058;2.山西省侯馬市人民醫(yī)院,山西 侯馬 043000)

    上世紀(jì)90年代初期,研究人員在酵母基因篩查試驗(yàn)中找到一系列與紡錘體檢測(cè)點(diǎn)調(diào)控有關(guān)的基因,并證實(shí)這些基因在高等動(dòng)物中高度保守,其編碼的蛋白是紡錘體檢測(cè)點(diǎn)(spindle assembly checkpoint,SAC)的重要組成成分[1-2]。SAC成員主要包括Mad1(mitotic arrestdeficient 1)、Mad2,Bub1(budding uninhibited by benzimidazoles 1)、Bub3,BubR1(Bub-related 1),Msp1(monopolar spindle 1),Aurora B 等蛋白[3]。其中,BubR1是 SAC中的重要組分,在調(diào)控SAC的監(jiān)測(cè)機(jī)制中起著重要的作用。近來有研究表明,BubR1不但參與監(jiān)測(cè)有絲分裂過程中微管與著絲點(diǎn)的結(jié)合,還在細(xì)胞減數(shù)分裂過程、DNA損傷應(yīng)答、腫瘤、不孕和衰老[4-7]等方面起到重要的調(diào)控作用。現(xiàn)將紡錘體檢測(cè)點(diǎn)蛋白BubR1的功能及研究現(xiàn)狀做一綜述。

    1 BubR1在紡錘體檢測(cè)點(diǎn)中的作用

    紡錘體檢測(cè)點(diǎn)又稱有絲分裂檢測(cè)點(diǎn),在監(jiān)測(cè)染色體的正常分離及阻止非整倍體形成的過程中起到重要的作用。在細(xì)胞有絲分裂中期,只有當(dāng)染色體全部正確地與來自紡錘體兩極的微管結(jié)合并排列到赤道板上,有絲分裂后期促進(jìn)因子(anaphase-promoting complex/cyclosome,APC/C)才能與其活化因子Cdc20結(jié)合,并通過泛素化其底物(如CyclinB1、Securin)使細(xì)胞進(jìn)入有絲分裂后期[8]。否則,SAC這一檢測(cè)通路將會(huì)被激活,從而阻止細(xì)胞由分裂中期進(jìn)入后期。

    1.1 BubR1在有絲分裂SAC中的作用 在有絲分裂中,BubR1主要是感受姐妹染色單體上著絲點(diǎn)間的張力[9]以及著絲粒相關(guān)蛋白 E(centromere associated protein-E,CENP-E)共同監(jiān)測(cè)著絲點(diǎn)上微管的附著狀態(tài)[10]。一旦著絲點(diǎn)與微管未連接或著絲點(diǎn)間的張力不平衡將導(dǎo)致SAC監(jiān)測(cè)機(jī)制的激活[8]。SAC被激活后,BubR1借助其結(jié)構(gòu)上所具有的不依賴Mad2的Cdc20結(jié)合位點(diǎn)與Cdc20蛋白結(jié)合并抑制其活性[11-12]。另外,BubR1也可通過Mad2與Cdc20結(jié)合,形成Bub3-BubR1-Cdc20復(fù)合體從而抑制APC/C 的活性[13-14];同時(shí)研究顯示,BubR1 先于Mad2與Cdc20結(jié)合,且對(duì)APC/C的抑制能力更強(qiáng)[15]。BubR1還可與Bub3、Mad2 和Cdc20形成有絲分裂檢測(cè)點(diǎn)復(fù)合物(mitotic checkpoint complex,MCC)四聚體,抑制 APC/C的活性[16-17],從而阻止細(xì)胞進(jìn)入有絲分裂后期。只有當(dāng)所有的紡錘體微管與著絲點(diǎn)正確連接,產(chǎn)生適當(dāng)?shù)膹埩Γ琒AC監(jiān)測(cè)機(jī)制關(guān)閉,Cdc20被釋放,細(xì)胞才能進(jìn)入有絲分裂后期[4]。

    BubR1基因的缺失將導(dǎo)致SAC的妥協(xié)反應(yīng)[18]。研究表明,BubR1基因缺失的細(xì)胞能夠逃逸微管解聚劑——諾考達(dá)唑(nocodazole)引起的有絲分裂阻滯而進(jìn)入分裂后期,造成細(xì)胞具有異常的染色體數(shù)目,即非整倍體。BubR1在SAC上的作用存在一定的劑量依賴效應(yīng)。Bohers等[19]人的實(shí)驗(yàn)表明:在有絲分裂過程中,細(xì)胞經(jīng)紡錘體干擾物——秋水仙堿(colchicine)處理后所引起細(xì)胞阻滯的比例與細(xì)胞中BubR1的表達(dá)水平呈正相關(guān);且BubR1減少將引起染色體的超前分離(premature chromatid separation,PCS),當(dāng) BubR1 的水平低于50%時(shí),非整倍體的數(shù)量明顯增加。因此,BubR1的作用與其數(shù)量有關(guān),且影響著非整倍體的產(chǎn)生。

    1.2 BubR1在減數(shù)分裂SAC中的作用 在減數(shù)分裂與有絲分裂過程中SAC的不同之處僅僅在于減數(shù)分裂I期染色體間所產(chǎn)生的張力是來自于同源染色體而非姐妹染色單體。當(dāng)同源染色體上的著絲點(diǎn)與微管沒有正確的連接或是在同源染色體間產(chǎn)生不適當(dāng)?shù)膹埩?,就?huì)激活SAC,使細(xì)胞停滯于前中期。在減數(shù)分裂II期,染色體與微管的連接、SAC的激活等均與有絲分裂相一致[20]。Wei[4]等人研究表明:BubR1基因缺失的卵母細(xì)胞經(jīng)nocodazole處理后,能逃逸SAC依賴的細(xì)胞周期停滯;BubR1的過度表達(dá)會(huì)使細(xì)胞停滯在第一次減數(shù)分裂中期的時(shí)間延長(zhǎng);而BubR1表達(dá)不足則會(huì)加速細(xì)胞減數(shù)分裂的過程。這些結(jié)果揭示了BubR1是第一次減數(shù)分裂中期SAC所必需的,這可能是由于BubR1表達(dá)增加/不足引起紡錘體檢測(cè)點(diǎn)信號(hào)增強(qiáng)/減弱,從而延長(zhǎng)/縮短了減數(shù)分裂的時(shí)間,符合“檢測(cè)點(diǎn)信號(hào)增強(qiáng)”假說。

    2 BubR1參與DNA損傷應(yīng)答調(diào)控

    當(dāng)細(xì)胞進(jìn)入有絲分裂期后遇到DNA損傷,通過啟動(dòng)“自殺”或者激活SAC來延緩細(xì)胞有絲分裂的過程,給細(xì)胞足夠時(shí)間將錯(cuò)誤予以修復(fù),從而來維持基因的完整性。在酵母、果蠅或是哺乳動(dòng)物細(xì)胞[21-23]中SAC都能通過停滯有絲分裂的過程來應(yīng)答DNA損傷,而BubR1作為SAC蛋白,在此過程中起著重要的作用。Hyunsook和Lee等[24-25]報(bào)道了經(jīng)阿霉素(一種抗腫瘤藥物)處理細(xì)胞產(chǎn)生雙鏈斷裂(double strand breaks,DSBs)后,大量的 BubR1結(jié)合到著絲點(diǎn)上,其磷酸化的時(shí)間延長(zhǎng),與對(duì)照組相比有絲分裂過程延遲9 h,這可能是由于DSBs改變了染色體的拓?fù)浣Y(jié)構(gòu),從而影響了著絲點(diǎn)-微管粘附的狀態(tài),引發(fā)了BubR1對(duì)此產(chǎn)生的一系列應(yīng)答反應(yīng)。另外,在酵母[24]、BRCA2缺失細(xì)胞[25]等研究表明 DNA損傷檢驗(yàn)點(diǎn)(DNA damage checkpoint,DDC)與 SAC在 DNA 損傷修復(fù)中起著協(xié)同作用,而BubR1可能是介導(dǎo)這兩條通路交叉應(yīng)答(cross-talk)上的重要因子。Dai[5]等人也證實(shí)了這一結(jié)論:經(jīng)阿霉素和紫外線誘導(dǎo)的BubR1+/-MEFs細(xì)胞DNA受損后,引起有絲分裂停滯,同時(shí)伴隨著γH2AX、p53、p21、PARP-1蛋白表達(dá)水平的降低。

    3 BubR1的磷酸化

    細(xì)胞內(nèi)BubR1蛋白的數(shù)量與其功能相關(guān),且共價(jià)修飾尤其是磷酸化修飾在其功能的調(diào)控上也起著重要的作用。研究表明,BubR1作為Plk1激酶的底物,能被Plk1磷酸化,磷酸化后的BubR1對(duì)維持著絲點(diǎn)-微管連接的穩(wěn)定性起著重要的作用,但不是其與SAC或APC/C連接所必須的[26-28]。Elowe 等[26]人研究表明,削弱BubR1與Plk1之間的關(guān)聯(lián),會(huì)使BubR1磷酸化缺失,最終導(dǎo)致著絲點(diǎn)-微管穩(wěn)定性的降低。而且,BubR1的S676位點(diǎn)磷酸化對(duì)著絲點(diǎn)張力敏感。當(dāng)染色體排列在赤道板上即姐妹染色體著絲粒上形成張力時(shí),S676位點(diǎn)上的磷酸化消失;當(dāng)再次用紫杉醇短暫處理后,pS676又會(huì)快速地出現(xiàn)。另外,Wong等[29]在非洲蟾蜍卵提取物的研究中發(fā)現(xiàn),BubR1作為Plk1的底物,磷酸化后產(chǎn)生的3F3/2磷酸化表位在SAC中有一定的作用。然而,Timothy[10]等在BubR1上找到4個(gè)有絲分裂特有的磷酸化位點(diǎn),這些位點(diǎn)不能夠被Plk1和Aurora B激酶磷酸化,且BubR1基因S670位點(diǎn)和S1034位點(diǎn)上的磷酸化對(duì)著絲點(diǎn)與微管間連接的缺失高度敏感,而對(duì)著絲點(diǎn)上的張力不敏感[10],與之前Elowe等人證實(shí)的pS676位點(diǎn)對(duì)著絲點(diǎn)張力敏感的結(jié)論剛好相反[26]。這可能是BubR1磷酸化的位置是由微管粘附的狀態(tài)和著絲點(diǎn)上的張力所決定的。另外,還有研究報(bào)道[15]BubR1的磷酸化和乙?;荁ubR1由APC/C復(fù)合物的抑制劑轉(zhuǎn)變?yōu)锳PC/C底物的過程。

    4 BubR1在腫瘤形成、不孕、衰老中的作用

    由于BubR1對(duì)染色體的分離有特殊檢測(cè)功能,近來越來越多有關(guān)腫瘤方面的研究聚焦在BubR1這個(gè)重要的因子上。許多研究[30-31]表明,BubR1基因的缺失或半缺失(haploinsufficiency)導(dǎo)致染色體不穩(wěn)定,最終觸發(fā)腫瘤的形成,如肺癌、結(jié)直腸癌。Kakeji等[6]報(bào)道50.3%的胃癌患者BubR1蛋白表達(dá)水平明顯增加,而且BubR1蛋白表達(dá)水平與DNA非整倍體間存在顯著的關(guān)聯(lián)性;BubR1高表達(dá)的患者常伴有腫瘤的深度浸潤(rùn),以及生存率的降低。這可能是由于BubR1的過度表達(dá)導(dǎo)致MCC的減少,從而致使SAC監(jiān)測(cè)能力下降,讓染色體不穩(wěn)定的細(xì)胞逃避監(jiān)測(cè)后直接進(jìn)入有絲分裂后期,最終造成DNA非整倍體的產(chǎn)生。

    在腫瘤治療中,常利用抗癌藥物誘導(dǎo)基因損傷,激活細(xì)胞周期檢測(cè)點(diǎn)信號(hào)傳導(dǎo)通路,使細(xì)胞分裂停滯或者誘導(dǎo)其凋亡。然而,有許多因素可造成腫瘤對(duì)化學(xué)藥物的治療效果不佳,其中檢測(cè)點(diǎn)成分(如BubR1)表達(dá)異常所致的檢測(cè)點(diǎn)功能失常就是重要的原因之一[32]。因此,BubR1在腫瘤治療中倍受關(guān)注。

    此外,BubR1蛋白表達(dá)水平與機(jī)體的不孕、衰老等有著密切的關(guān)系[7]。研究表明[33]:BubR1-/-大鼠的胚胎不能正常發(fā)育;BubR1-/H大鼠(表達(dá)BubR1蛋白水平的量是野生型的4%)的胚胎雖然能夠發(fā)育至出生,但出生后只能存活數(shù)小時(shí)。Baker等[34]人觀察到BubR1H/H的大鼠出生時(shí)生長(zhǎng)狀態(tài)良好,但出生2~3個(gè)月就會(huì)表現(xiàn)出一些異常癥狀,如:雙側(cè)白內(nèi)障、真皮和皮下脂肪減少、惡病質(zhì)、損傷修復(fù)能力下降、生命周期減短等衰老的癥狀。4個(gè)月大的BubR1H/H大鼠的精子量是野生型大鼠的1/4;體外受精實(shí)驗(yàn)(BubR1H/H大鼠的精子和野生型大鼠的卵子結(jié)合)表明受精后的卵子發(fā)育為正常胚胎的數(shù)量明顯減少,僅為正常大鼠受孕后胚胎數(shù)的1/13。

    5 展望

    目前,雖然BubR1的功能及其作用機(jī)制已較為明確,但大部分僅限于體外實(shí)驗(yàn)或動(dòng)物實(shí)驗(yàn),特別是在腫瘤的形成和治療上,仍有許多細(xì)節(jié)亟待解決。因此,對(duì)BubR1基因結(jié)構(gòu)、功能以及它與其他相關(guān)因子間相互作用等的深入研究,勢(shì)必有益于進(jìn)一步闡明BubR1與腫瘤、不孕、衰老等相關(guān)疾病的聯(lián)系,從而為解決這些困擾人類已久的問題提供新的思路。

    [1]HOYT M A,TOTIS L,ROBERTS B T S.Cerevisiae genes required for cell cycle arrest in response to loss of microtubule function [J].Cell,1991,66(3):507-517.

    [2]WEISS E,WINEY M.The Saccharomyces cerevisiae spindle pole body duplication gene MPS1 is part of a mitotic checkpoint[J].J Cell Biol,1996,132(1-2):111-123.

    [3]CAHILL D P,LENGAUER C,YU J,et.al Mutations of mitotic checkpoint genes in human cancers[J].Nature,1998,392(6673):300-303.

    [4]WEI L,LIANG X W,ZHANG Q H,et al.BubR1 is a spindle assembly checkpoint protein regulating meiotic cell cycle progression of mouse oocyte[J].Cell Cycle,9(6):1112-1121.

    [5]FANG Y,LIU T,WANG X,et al.BubR1 is involved in regulation of DNA damage responses [J].Oncogene,2006,25(25):3598-3605.

    [6]ANDO K,KAKEJI Y,KITAO H,et al.High expression of BUBR1 is one of the factors for inducing DNA aneuploidy and progression in gastric cancer[J].Cancer Sci,101(3):639-645.

    [7]KIM M,KAO G D.Newly identified roles for an old guardian:profound deficiency of the mitotic spindle checkpoint protein BubR1 leads to early aging and infertility[J].Cancer Biol Ther,2005,4(2):164-165.

    [8]LI M,F(xiàn)ANG X,WEI Z,YORK J P,et al.Loss of spindle assembly checkpoint-mediated inhibition of Cdc20 promotes tumorigenesis in mice [J].J Cell Biol,2009,185(6):983-994.

    [9]SKOUFIAS D A,ANDREASSEN P R,LACROIX F B,etal.Mammalianmad2 andbub1/bubR1 recognize distinct spindle-attachment and kinetochore-tension checkpoints[J].Proc Natl Acad Sci USA,2001,98(8):4492-4497.

    [10]HUANG H,HITTLE J,ZAPPACOSTA F,et al.Phosphorylation sitesin BubR1 thatregulate kinetochore attachment,tension,and mitotic exit[J].J Cell Biol,2008,183(4):667-680.

    [11]SCZANIECKA M,F(xiàn)EOKTISTOVA A,MAY K M,et al.The spindle checkpoint functions of Mad3 and Mad2 depend on a Mad3 KEN box-mediated interaction with Cdc20-anaphase-promoting complex(APC/C)[J].J Biol Chem,2008,283(34):23039-23047.

    [12]DAVENPORT J,HARRIS L D,GOORHA R.Spindle checkpoint function requires Mad2-dependent Cdc20 binding to the Mad3 homology domain of BubR1 [J].Exp Cell Res,2006,312(10):1831-1842.

    [13]NILSSON J,YEKEZARE M,MINSHULL J,et al.The APC/C maintainsthe spindle assembly checkpoint by targeting Cdc20 for destruction[J].Nat Cell Biol,2008,10(12):1411-1420.

    [14]ZHANG J,AHMAD S,MAO Y.BubR1 and APC/EB1 cooperate to maintain metaphase chromosome alignment[J].J Cell Biol,2007,178(5):773-784.

    [15]CHOI E,CHOE H,MIN J,et al.BubR1 acetylation at prometaphase is required for modulating APC/C activity and timing of mitosis[J].Embo J,2009,28(14):2077-2089.

    [16]YU H.Regulation of APC-Cdc20 by the spindle checkpoint[J].Curr Opin Cell Biol,2002,14(6):706-714.

    [17]CHAN G K,YEN T J.The mitotic checkpoint:a signaling pathway that allows a single unattached kinetochore to inhibit mitotic exit[J].Prog Cell Cycle Res,2003,5(431-439.

    [18]RAO C V,YAMADA H Y,YAO Y,et al.Enhanced genomic instabilities caused by deregulated microtubule dynamics and chromosome segregation:a perspective from genetic studies in mice [J].Carcinogenesis,2009,30(9):1469-1474.

    [19]BOHERS E,SARAFAN-VASSEUR N,DROUET A,et al.Gradual reduction of BUBR1 protein levels results in premature sister-chromatid separation then in aneuploidy [J].Hum Genet,2008,124(5):473-478.

    [20]TAYLOR S S,SCOTT M I,HOLLAND A J.The spindle checkpoint:a quality control mechanism which ensures accurate chromosome segregation[J].Chromosome Res,2004,12(6):599-616.

    [21]GARBER P M,RINE J.Overlapping roles of the spindle assembly and DNA damage checkpoints in the cell-cycle response to altered chromosomes in Saccharomyces cerevisiae [J].Genetics,2002,161(2):521-534.

    [22]ROYOUA,MACIASH,SULLIVANW.The Drosophila Grp/Chk1 DNA damage checkpoint controls entry into anaphase [J].Curr Biol,2005,15(4):334-339.

    [23]NITTA M,KOBAYASHI O,HONDA S,et al.Spindle checkpoint function is required for mitotic catastropheinduced byDNA-damagingagents[J].Oncogene,2004,23(39):6548-6558.

    [24]MYUNG K,SMITH S,KOLODNER R D .Mitotic checkpoint function in the formation of gross chromosomalrearrangements in Saccharomyces cerevisiae[J].Proc Natl Acad Sci USA,2004,101(45):15980-15985.

    [25]LEE H,TRAINER A H,F(xiàn)RIEDMAN L S,et al.Mitotic checkpoint inactivation fosters transformation in cells lacking the breast cancer susceptibility gene,Brca2 [J].Mol Cell,1999,4(1):1-10.

    [26]ELOWE S,HUMMER S,ULDSCHMID A,et al.A Tension-sensitive Plk1 phosphorylation on BubR1 regulates the stability of kinetochore microtubule interactions[J].Genes Dev,2007,21(17):2205-2219.

    [27]LENART P,PETRONCZKI M,STEEGMAIER M,et al.The small-molecule inhibitor BI 2536 reveals novel insights into mitotic roles of polo-like kinase 1 [J].Curr Biol,2007,17(4):304-315.

    [28]MATSUMURA S,TOYOSHIMA F,NISHIDA E.Polo-like kinase 1 facilitates chromosome alignment during prometaphase through BubR1 [J].J Biol Chem,2007,282(20):15217-15227.

    [29]WONG O K,F(xiàn)ANG G.Cdk1 phosphorylation of BubR1 controls spindle checkpoint arrest and Plk1-mediated formation of the 3F3/2 epitope[J].J Cell Biol,2007,179(4):611-617.

    [30]DAI W,WANG Q,LIU T,et al.Slippage of mitotic arrest and enhanced tumor development in mice with BubR1 haploinsufficiency [J].Cancer Res,2004,64(2):440-445.

    [31]RAO C V,YANG Y M,SWAMY M V,et al.Colonic tumorigenesis in BubR1+/-ApcMin/+compound mutant mice is linked to premature separation ofsisterchromatidsand enhanced genomic instability [J].Proc Natl Acad Sci USA,2005,102(12):4365-4370.

    [32]VOGEL C,HAGER C,BASTIANS H.Mechanisms of mitotic cell death induced by chemotherapymediated G2 checkpoint abrogation [J].Cancer Res,2007,67(1):339-345.

    [33]WANGQ,LIUT,F(xiàn)ANGY,etal.BUBR1 deficiency results in abnormal megakaryopoiesis[J].Blood,2004,103(4):1278-1285.

    [34]BAKER D J,JEGANATHAN K B,CAMERON J D,et al.BubR1 insufficiency causes early onset of aging-associated phenotypes and infertility in mice[J].Nat Genet,2004,36(7):744-749.

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