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    高效液相色譜法快速測定大米中的4種煙堿農(nóng)藥殘留量

    2011-10-13 08:07:00乙小娟朱加葉夏擁軍
    食品科學(xué) 2011年6期
    關(guān)鍵詞:呋蟲胺噻蟲胺吡蟲啉

    乙小娟,朱加葉,丁 萍,夏擁軍

    (張家港出入境檢驗檢疫局,江蘇 張家港 215600)

    高效液相色譜法快速測定大米中的4種煙堿農(nóng)藥殘留量

    乙小娟,朱加葉,丁 萍,夏擁軍

    (張家港出入境檢驗檢疫局,江蘇 張家港 215600)

    建立使用高通量(RRHT)色譜柱的高效液相色譜法同時測定大米中呋蟲胺、噻蟲胺、吡蟲啉、吡蟲清四種煙堿農(nóng)藥殘留量的方法。樣品用乙腈提取,采用ENVI-Florisil和Carb復(fù)合固相萃取柱萃取凈化,液相色譜高通量RRHT色譜柱,258nm紫外測定,外標(biāo)法定量。檢測過程快速準(zhǔn)確,2.5min時4種農(nóng)藥可完全分離。樣品中加標(biāo)回收率為75.5%~96.0%,相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.49%~4.36%,最低檢出限達(dá)到0.004mg/kg。峰面積與標(biāo)準(zhǔn)溶液質(zhì)量濃度在0.1~1.0mg/L范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系,線性回歸系數(shù)大于0.9996。

    呋蟲胺;噻蟲胺;吡蟲啉;吡蟲清;液相色譜;高通量色譜柱;固相萃取;大米

    煙堿類殺蟲劑的作用機制主要是通過選擇性控制昆蟲神經(jīng)系統(tǒng)煙堿型乙酰膽堿酯酶受體,阻斷昆蟲中樞神經(jīng)系統(tǒng)的正常傳導(dǎo),從而導(dǎo)致害蟲出現(xiàn)麻痹進(jìn)而死亡[1]??捎行Х乐瓮崮?、鞘翅目、雙翅目和鱗翅目等害蟲,對用傳統(tǒng)殺蟲劑防治產(chǎn)生抗藥性的害蟲也有良好的活性。

    從20世紀(jì)80年代中期由德國拜耳公司成功開發(fā)出第一個煙堿類殺蟲劑一吡蟲啉問世到目前為止,已有十幾個產(chǎn)品商品化或即將商品化[1]。如呋蟲胺(dinotefuran)、噻蟲胺(clothianidin)、吡蟲啉(imidacloprid)、啶蟲脒(acetamiprid,又名吡蟲清)等[2-4],日本已規(guī)定大米中這4種煙堿類農(nóng)藥最高殘留限量(MRL)為0.01~2mg/kg[5],澳大利亞對谷物中吡蟲啉的最高殘留限量是0.05mg/kg[6]。

    目前有文獻(xiàn)報道用HPLC-MS/MS檢測食品中的呋蟲胺[7]。文獻(xiàn)[8-10]報道用高效液相色譜法測定(HPLC)測定茶葉、蔬菜、水果中吡蟲啉的殘留。文獻(xiàn)[11-15]檢測蔬菜、茶葉和水果中吡蟲啉或啶蟲脒,文獻(xiàn)[16]報道了茶葉中6種煙堿農(nóng)藥的HPLC-MS/MS檢測。目前尚未見使用高通量色譜柱的液相色譜方法同時檢測大米中4種煙堿類殺蟲劑殘留的報道。本實驗對大米中呋蟲胺、噻蟲胺、吡蟲啉、吡蟲清的高效液相色譜測定方法進(jìn)行研究,考察不同質(zhì)量濃度的呋蟲胺、噻蟲胺、吡蟲啉、吡蟲清在Florisil-Carb復(fù)合固相萃取柱上的保留行為。本方法采用乙腈提取,復(fù)合固相萃取柱凈化,HPLC-DAD分離檢測,外標(biāo)法定量,旨在建立采用快速分離高通量色譜柱(rapid resolution high throughput,RRHT)同時測定大米樣品中呋蟲胺、噻蟲胺、吡蟲啉、吡蟲清殘留量的液相色譜方法。

    1 材料與方法

    1.1 材料、試劑與儀器

    稻谷經(jīng)清理、碾米、成品整理后的成品大米。

    呋蟲胺、噻蟲胺、吡蟲啉、吡蟲清標(biāo)準(zhǔn)品(純度≥97%);乙腈(色譜純);正己烷(農(nóng)殘級);丙酮(紫外光譜純);氯化鈉(分析純),140℃烘烤4h,置于干燥器內(nèi)備用。

    HP1200高效液相色譜儀(附DAD檢測器) 美國安捷倫公司;R200旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器 瑞士公司;KQ-500D超聲波清洗器 昆山超聲儀器有限公司;SPE小柱處理系統(tǒng) 美國Supelco公司;Superclean ENVI-Florisil(500mg/3mL)和Superclean ENVI-Carb(500mg/3mL)固相萃取柱;T25勻漿機 德國IKA公司。

    1.2 方法

    1.2.1 樣品中呋蟲胺、噻蟲胺、吡蟲啉、吡蟲清的提取

    稱取25g粉碎試樣,置于250mL具塞錐形瓶中,加30mL水浸泡15min,準(zhǔn)確加入乙腈50mL,振蕩提取30min后過濾,濾液收集到裝有5~7g氯化鈉的100mL具塞量筒中,收集濾液60~80mL,蓋上塞子,劇烈振蕩,靜置,使乙腈相和水相分層,從100mL具塞量筒中吸取25.00mL乙腈溶液,放入125mL心型瓶中,旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀50℃以下濃縮至近干。用1mL丙酮溶解殘渣,待殘渣完全溶解后,加入9 m L正己烷,混勻,待凈化。

    1.2.2 固相萃取凈化樣品

    將Florisil和Carb固相萃取柱用連接頭上下串聯(lián)起來(Carb固相萃取柱在上),5mL正己烷預(yù)淋洗,將1.2.1節(jié)制備的溶液移入Florisil和Carb的復(fù)合柱中,棄去流出液。然后用10mL丙酮-正己烷(50:50)淋洗柱子,收集15mL淋洗液,旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀50℃以下濃縮至近干,用乙腈-水(30:70)定容至1mL,經(jīng)0.22μm濾器濾至樣品瓶內(nèi),待測。

    1.2.3 標(biāo)準(zhǔn)溶液配制及標(biāo)準(zhǔn)曲線

    準(zhǔn)確稱取適量的呋蟲胺、噻蟲胺、吡蟲啉、吡蟲清標(biāo)準(zhǔn)品,用乙腈配制成100mg/L標(biāo)準(zhǔn)儲備液,用乙腈-水(30:70)將儲備液稀釋成0.10、0.20、0.40、0.60、0.80、1.0mg/L混合標(biāo)準(zhǔn)溶液系列。按選定色譜條件進(jìn)樣,以混合標(biāo)準(zhǔn)溶液中呋蟲胺、噻蟲胺、吡蟲啉、吡蟲清的質(zhì)量濃度(X)和組分色譜峰面積(Y)作標(biāo)準(zhǔn)曲線,4種化合物在0.1~1.0mg/L范圍內(nèi)線性關(guān)系良好,其線性方程和相關(guān)系數(shù)見表1。

    表1 呋蟲胺、噻蟲胺、吡蟲啉、吡蟲清的線性方程和相關(guān)系數(shù)Table 1 Linear equations and correlation coefficients of four neonicotinoid residues

    1.3 色譜條件

    色譜柱:XDB C18(4.6mm×50mm,1.8μm) RRHT;色譜柱溫度:25℃;流動相:A為體積分?jǐn)?shù)0.2%的甲酸溶液,B為乙腈。

    梯度洗脫:流動相:0.2%甲酸溶液(A)和乙腈(B);梯度洗脫程序:0min時,5% B;0~1.5min,線性增加至35% B,保持到3.5min,再升至75%,4.5min結(jié)束,之后進(jìn)行系統(tǒng)平衡,平衡時間2min;流速2mL/min;進(jìn)樣量2μL;檢測波長258nm,采集時間0.01min。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 樣品提取劑的選擇

    煙堿類農(nóng)藥屬于極性物質(zhì),易溶于甲醇、乙腈等[16],本實驗以乙腈為提取劑對大米中的煙堿類農(nóng)藥進(jìn)行提取。結(jié)果表明,用乙腈提取樣品,不僅可以減少大米中油脂的提取量,而且煙堿類農(nóng)藥的回收率也能滿足要求。為了更好地保證乙腈滲入大米體內(nèi),在大米中先加入適量的水浸潤大米樣品,使其細(xì)胞完全漲開,再加入乙腈振蕩,可提高提取效率。

    2.2 固相萃取柱的選擇

    Florisil屬于一種正相固相萃取柱,對極性較強的化合物吸附力較強,是從有機基體中去除或分離極性物質(zhì)的理想之選,它可以有效地吸附樣品中的脂肪酸和葉黃素[17]。選用Florisil柱凈化,用體積比1:9的丙酮-正己烷溶解提取液殘渣,采用體積比1:1的正己烷-丙酮洗脫,洗脫液中仍有黃色色素存在;然后通過使用Florisil和Carb混合凈化柱凈化,色素被活性炭吸附,減少了色素的干擾。當(dāng)收集洗脫液15mL時,通過實驗發(fā)現(xiàn),洗脫液中呋蟲胺、噻蟲胺、吡蟲啉、吡蟲清4種煙堿農(nóng)藥的回收率可達(dá)95%以上。但是直接用10mL體積比為1:9的丙酮-正己烷溶解提取液殘渣,再用弗羅里硅土和活性炭混合凈化柱凈化,四種農(nóng)藥的回收率低,均小于60%;改用1mL丙酮溶解提取液殘渣,再加入9mL正己烷混勻凈化,回收率符合實驗要求。這可能是由于煙堿農(nóng)藥的極性大,體積比為1:9的丙酮-正己烷不能完全溶解樣品提取液殘渣中呋蟲胺、噻蟲胺、吡蟲啉、吡蟲清的緣故。

    2.3 液相色譜柱的選擇

    快速分離高通量(RRHT)色譜柱是指柱內(nèi)填料粒徑為1.8μm、長度只有50mm的液相色譜柱,這種色譜柱在保證分離度的情況下,可以大大提高分析時間,縮短檢測周期[18]。采用XDB C18(4.6mm×50mm,1.8 μ m) RRHT柱在2.5min時就達(dá)到了4種煙堿農(nóng)藥的完全分離(圖1),比使用常規(guī)(4.6mm×150mm,5μm)色譜柱加快了十幾分鐘,大大提高了工作效率。

    圖1 呋蟲胺、噻蟲胺、吡蟲啉、吡蟲清標(biāo)準(zhǔn)溶液色譜圖Fig.1 HPLC chromatograms of four neonicotinoid standards

    2.4 檢測波長的選擇

    對于紫外-可見檢測器,檢測時一般選擇對樣品有最大吸收的波長進(jìn)行,以獲得最大的靈敏度和抗干擾能力,對4種標(biāo)準(zhǔn)樣品進(jìn)行了光譜掃描,呋蟲胺在270nm處有最大吸收,噻蟲胺在260nm處有最大的吸收,吡蟲啉在270nm處有最大的吸收,吡蟲清在250nm處有最大的吸收,綜合考慮4種農(nóng)藥同時檢測的靈敏度,實驗結(jié)果表明,當(dāng)檢測波長設(shè)定為258nm時,相同質(zhì)量濃度的呋蟲胺、噻蟲胺、吡蟲啉、吡蟲清標(biāo)準(zhǔn)溶液能夠獲得相似的靈敏度,最終選擇258nm作為檢測波長。

    2.5 流動相的優(yōu)化

    在等度反相分離時,通過對標(biāo)準(zhǔn)溶液的實驗表明,當(dāng)乙腈-水體積比為35:65左右時,檢測的靈敏度達(dá)到最佳,但呋蟲胺峰型不是很好。當(dāng)使用0.2%甲酸為流動相A,起始梯度為95% A+5% B時,峰型改善,1.5min后梯度上升至35% B,在所使用的梯度條件下,可將所有色譜峰在2.5min左右達(dá)到基線分離。整個分析4.5min結(jié)束。

    2.6 溶劑效應(yīng)

    使用純乙腈作定容溶劑時,由于樣品溶劑強度大于乙腈-水流動相,呋蟲胺的峰形有所拖尾(伸舌),會引起譜峰展寬和變形而導(dǎo)致定量不準(zhǔn),而后面的3個峰不受影響,溶解樣品有機相比例遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于起始流動相中有機相比例時,色譜峰(尤其是較早洗脫的色譜峰)會有展寬現(xiàn)象。本實驗在乙腈中加入一定量的水調(diào)節(jié)溶劑強度,峰形窄而對稱,峰形得到明顯改善。將乙腈-水(30:70)作為樣品溶劑進(jìn)樣,進(jìn)樣量大時呋蟲胺的峰明顯拖尾,通過實驗將樣品量定為2μL。

    2.7 回收率及精密度實驗

    按RSN=10計算,本方法呋蟲胺、噻蟲胺、吡蟲啉和吡蟲清的最低檢出限均為0.004mg/kg。

    采用添加回收的方法,在空白大米樣品中,分別稱取3份不含呋蟲胺、噻蟲胺、吡蟲啉、吡蟲清的大米樣品,分別添加10μg/mL混合標(biāo)準(zhǔn)溶液0.025、0.05、0.10mL,每份樣品按樣品檢測方法重復(fù)檢測6次,測得呋蟲胺回收率在87.5%~94.0%之間,相對標(biāo)準(zhǔn)偏差在0.57%~2.48%之間;噻蟲胺回收率在79.0%~90.0%之間,相對標(biāo)準(zhǔn)偏差在0.49~3.80%之間;吡蟲啉回收率在75.5%~96.0%之間,相對標(biāo)準(zhǔn)偏差在2.82%~3.91%之間;吡蟲清回收率在91.8%~94.5%之間,相對標(biāo)準(zhǔn)偏差在1.01%~4.36%之間。結(jié)果見表2。0.01mg/kg加標(biāo)色譜圖見圖2。

    表2 呋蟲胺、噻蟲胺、吡蟲啉、吡蟲清的回收率和精密度Table 2 Results of precision and recovery rate experiments

    圖2 大米加標(biāo)圖譜Fig.2 HPLC chromatogram of spiked rice sample

    3 結(jié) 論

    運用液相色譜高通量柱同時測定了大米中4種煙堿農(nóng)藥。所建立的方法簡便快速,2.5min內(nèi)在色譜上即可達(dá)到4種農(nóng)藥完全分離;準(zhǔn)確度和精密度高,加標(biāo)回收率在75.5%~96.0%,相對標(biāo)準(zhǔn)偏差在0.49%~4.36%;方法靈敏度高,最低檢出限達(dá)到0.004mg/kg。完全可滿足進(jìn)出口大米中4種煙堿農(nóng)藥的檢測要求。

    [1] 張國生, 侯廣新. 煙堿類殺蟲劑的應(yīng)用、開發(fā)現(xiàn)狀及展望[J]. 農(nóng)藥科學(xué)與管理, 2004, 25(3): 22-26.

    [2] 朱麗華. 新型煙堿農(nóng)藥呋蟲胺的開發(fā)沿革[J]. 世界農(nóng)藥, 2004, 26(2):16-19.

    [3] 孫越. 新煙堿類化合物的合成極其殺蟲活性研究[J]. 農(nóng)藥譯叢, 1996,18(6): 19-21.

    [4] 慕長煒, 覃兆海. 吡啶類農(nóng)藥的研究進(jìn)展[J]. 現(xiàn)代農(nóng)藥, 2003, 2(3):4-8.

    [5] 《食品中農(nóng)業(yè)化學(xué)品殘留限量》編委會. 食品中農(nóng)業(yè)化學(xué)品殘留限量: 藥品卷日本肯定列表制度[S]. 北京: 中國標(biāo)準(zhǔn)出版社, 2006.

    [6] 主要貿(mào)易國家和地區(qū)食品中農(nóng)獸藥殘留限量標(biāo)準(zhǔn)委員會. 主要貿(mào)易國家和地區(qū)食品中農(nóng)獸藥殘留限量標(biāo)準(zhǔn)[S]. 北京: 中國標(biāo)準(zhǔn)出版社,2006.

    [7] 李立, 付建, 初玉圣, 等. 食品中呋蟲胺殘留量的HPLC-MS/MS檢測方法研究[J]. 食品科學(xué), 2008, 29(11): 538-540.

    [8] 湯富彬, 劉光明, 羅逢健, 等. 茶葉中吡蟲啉殘留量的HPLC測定方法[J]. 農(nóng)藥, 2004, 43(12): 561-562.

    [9] 劉承蘭, 劉豐茂, 李莉, 等. 高效液相色譜法測定蘆筍中多菌靈和吡蟲啉殘留[J]. 農(nóng)藥學(xué)學(xué)報, 2004, 6(4): 93-96.

    [10] 陳黎, 王金芳, 杜鵬, 等. 韭菜中吡蟲啉和啶蟲脒殘留的微波處理-逆固相分散法凈化及液相色譜檢測[J]. 分析化學(xué), 2008, 36(10): 1364-1368.

    [11] 謝文, 丁慧瑛, 蔣曉英. 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜檢測蔬菜和茶葉中吡蟲啉的殘留量[J]. 色譜, 2006, 24(6): 633-635.

    [12] 何強, 趙潔, 孔祥紅, 等. HPLC法同時測定蘋果及濃縮蘋果汁中吡蟲清等4種農(nóng)藥的殘留量[J]. 分析實驗室, 2008, 27(6): 64-66.

    [13] POUS X, RUIZ M J, PICO Y, et al. Determination of imidacloprid,metalaxyl, myclobutanil, propham, and thiabendazole in fruits and vegetables by liquid chromatpography-atmospheric pressure chemical ionization-mass spectrometry[J]. Anal Chem, 2001, 371(2): 182-189.

    [14] SANNINO A, BOLZONI L, BANDINI M J. Application of liquid chromatography with electrospray tandem mass spectrometry to the determination of a new generation of pesticides in processed fruits and vegetables[J]. Journal of Chromatography A, 2004, 1036(2): 161-169.

    [15] 謝文, 丁慧瑛, 蔣曉英, 等. 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜檢測蔬菜和茶葉中吡蟲啉的殘留量[J]. 色譜, 2006, 24(6): 633-635.

    [16] 謝文, 錢艷, 丁慧瑛, 等. 液相色譜電噴霧電離三級四極桿質(zhì)譜法測定茶葉中6種煙堿類農(nóng)藥殘留[J]. 分析化學(xué), 2009, 37(4): 495-499.

    [17] 林谷園, 張金虎, 趙建暉, 等. 固相萃取-氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法檢測進(jìn)出口蔬菜產(chǎn)品中百菌清殘留[J]. 福建分析測試, 2009, 18(4): 13-16.

    [18] 吳獻(xiàn)花, 林紅, 李海濤, 等. 用快速分離柱高效液相色譜法測定食品中重金屬元素的研究[J]. 食品科學(xué), 2005, 26(6): 218-220.

    Determination of Neonicotinoid Residues in Rice by HPLC

    YI Xiao-juan,ZHU Jia-ye,DING Ping,XIA Yong-jun
    (Zhangjiagang Entry-exit Inspection and Quarantine Bureau, Zhangjiagang 215600, China)

    A reverse phase high performance liquid chromatography (RP-HPLC) method has been developed for determining dinotefuran, clothianidin, imidacloprid and acetamiprid residues in rice. Neonicotinoid residues were extracted from the sample by acetonitrile, and then cleaned up with ENVI-Florisil and carb SPE tube. The HPLC detection was performed using a DAD detector in the external standard mode. Results indicated that average recovery rates in spiked samples were in the range of 75.5%-96.0%, the relative standard deviations varied between 0.49% and 4.36% and the detection limit was 0.004 mg/kg. A good linear correlation between peak areas and the concentrations of four neonicotinoid residues was observed in the range of 0.1-1000μg/mL with a calibration coefficient of 0.9996.

    dinotefuran;clothianidin;imidacloprid;acetamiprid;high performance liquid chromatography;solid phase extraction;rice

    O657.7

    A

    1002-6630(2011)06-0169-04

    2010-05-04

    江蘇省出入境檢驗檢疫局科研項目(2006KJ14)

    乙小娟(1967—),女,副主任技師,本科,主要從事進(jìn)出口食品檢測研究。E-mail:yxj671001@yahoo.com.cn

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