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    微波提取樹莓籽中原花青素工藝

    2011-10-13 08:07:12張佰清張艷艷李龍杰
    食品科學 2011年6期
    關(guān)鍵詞:葡萄籽樹莓花青素

    張佰清,張艷艷,李龍杰

    (沈陽農(nóng)業(yè)大學食品學院,遼寧 沈陽 110866)

    微波提取樹莓籽中原花青素工藝

    張佰清,張艷艷,李龍杰

    (沈陽農(nóng)業(yè)大學食品學院,遼寧 沈陽 110866)

    目的:探討微波提取樹莓籽中原花青素的方法,選出最佳的提取工藝參數(shù)。方法:以原花青素提取率為指標,考察乙醇體積分數(shù)、微波功率、料液比、微波時間4個因素對樹莓籽中原花青素微波提取的影響。結(jié)果:樹莓籽質(zhì)量2g、乙醇體積分數(shù)60%、微波功率300W、料液比1:10(g/mL)的條件下提取時間3min為最佳工藝,采用該工藝條件,樹莓籽的提取率最高可達7.19mg/g,約為傳統(tǒng)水提法提取率的3倍。結(jié)論:微波提取樹莓籽中原花青素耗時少、效率高。

    樹莓籽;原花青素;微波輔助提取

    原花青素(procyanidins,PC)是植物中廣泛存在的一類多酚化合物的總稱。這類化合物是由不同數(shù)量的兒茶素或表兒茶素結(jié)合而成,在酸性溶液中加熱可降解和氧化形成花色素[1-2]。國內(nèi)外大量醫(yī)學和藥理學研究表明,PC具有多方面的生理活性:具有很強的抗氧化和清除自由基的作用,還有護肝解毒、降血壓、降血脂、消炎、抗癌、治療心血管疾病等功效[3-5]。

    國外關(guān)于從植物種子中提取PC的報道很多[6-7],一般采用水煮法[8]和溶劑提取法[9-10]。水煮法耗能大,操作困難。溶劑提取法得率高,但成本高安全性低,更可能造成環(huán)境污染。近年來,微波技術(shù)以其促進反應(yīng)的高效性和選擇性加熱、操作簡便、副產(chǎn)物少、產(chǎn)率高及產(chǎn)物易于提純等優(yōu)點,已應(yīng)用于有機合成、酯化等反應(yīng)中,目前也有文獻報道用于天然產(chǎn)物的提取[11-14]。本研究通過對樹莓籽進行微波處理,研究微波作用于溶劑浸取樹莓籽PC過程,分析各因素對原花青素浸取率的影響,并最終確定最佳提取條件和影響浸提的顯著性因素,為微波在樹莓籽中原花青素提取方面的應(yīng)用提供一定參考。

    1 材料與方法

    1.1 材料與試劑

    樹莓籽 遼寧今日農(nóng)業(yè)有限公司撫順農(nóng)業(yè)園區(qū)。兒茶素對照品 中國藥品生物制品檢定所;試劑均為分析純;實驗用水為去離子水。

    1.2 儀器與設(shè)備

    MAS-I微波萃取器 上海新儀微波化學科技有限公司;UV-2000紫外-可見分光光度計 Unico上海儀器有限公司;RE52-AA真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀 上海亞榮生化儀器廠。

    1.3 方法

    1.3.1 PC提取方法

    樹莓籽用粉碎機粉碎,過40目篩,以石油醚(60~90℃)用索氏提取器提取油脂,晾干,加入適量提取溶劑,置于微波提取罐中進行微波提取。將提取后的混合物于5000r/min離心10min,得到提取液,取上清液定容至10mL容量瓶中待測定。

    1.3.2 PC含量測定方法

    [10]的香草醛-鹽酸法。采用香草醛-鹽酸法測定樹莓籽提取物中原花青素的含量,添加6mL 4%香草醛甲醇溶液和3mL濃鹽酸,在避光(20℃)的條件下反應(yīng)15h,測得的原花青素含量具有較高的精確度。

    1.3.3 原花青素提取的單因素試驗

    考察提取溶劑體積分數(shù)、提取時間、微波功率、液料比各單因素對提取液中原花青素提取率的影響。1.3.4 原花青素提取工藝的試驗設(shè)計

    在單因素試驗的基礎(chǔ)上,確定Box-Behnken設(shè)計的自變量,以提取液中原花青素含量為響應(yīng)值,通過響應(yīng)面曲面分析(response surface analysis,RSA)進行提取條件的優(yōu)化。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 PC提取的單因素試驗

    2.1.1 提取溶劑體積分數(shù)對PC提取率的影響

    提取溫度60℃、微波功率400W、料液比1:10(g/mL)、提取時間3min條件下,考察乙醇體積分數(shù)20%、40%、60%、80%、100%對原花青素提取效果的影響,結(jié)果如圖1a所示。

    圖1a中0%乙醇對應(yīng)的2.19mg/g是傳統(tǒng)水提法(水作為提取劑,60℃水浴加熱1h)的原花青素提取率。由此可得知,水雖然是PC的良好溶劑,但水并不是最適合PC的提取。隨著乙醇體積分數(shù)增大,PC含量也逐漸增大,當乙醇體積分數(shù)為60%時,含量達到最大即7.41mg/g,隨后開始逐漸下降。此外,隨著乙醇體積分數(shù)的增大,提取液的表觀澄清度越來越好。這是由于高體積分數(shù)乙醇可以除去多糖、寡糖和少量粗蛋白等雜質(zhì)。因此,微波提取樹莓籽中原花青素的溶劑應(yīng)以60%乙醇溶液為宜。

    2.1.2 微波功率對提取效果的影響

    提取溫度60℃、乙醇體積分數(shù)60%、料液比1:10(g/mL)、提取時間3min條件下,考察微波功率100、200、300、400、500、600W對原花青素提取效果的影響,結(jié)果如圖1 b所示。

    由圖1b看出,微波功率在200~400W范圍內(nèi)PC的含量呈上升趨勢,當微波功率超過400W以后提取的PC含量緩慢下降。這是因為微波功率過高,提取時樣品的溫度會瞬間升高,造成樹莓籽PC的氧化損失,使提取率降低。由試驗得知,微波功率在400W時,提取率可達8.91mg/g,此功率提取效果最佳。

    2.1.3 料液比對提取效果的影響

    提取溫度60℃、乙醇體積分數(shù)60%、微波功率400W、提取時間3min條件下,考察料液比(g/mL)1:5、1:10、1:15、1:20、1:25、1:30對原花青素提取效果的影響,結(jié)果如圖1 c所示。

    由圖1c可以看出,隨著液料比值的減小,加快整個溶媒的傳質(zhì)過程,提取率會明顯提高,但當料液比小于1:10(g/mL)時,PC提取率增加的幅度不大,而且料液比過小,溶劑用量和下一步濃縮工藝的能耗都會增加。料液比在1:10(g/mL)時的提取率是6.45mg/g,所以選擇料液比1:10(g/mL)左右比較合適。

    圖1 乙醇體積分數(shù)(a)、微波功率(b)及料液比(c)對PC提取率的影響Fig.1 Effects of ethanol concentration, microwave power and material/liquid ratio on extraction rate of procyanidins from raspberry seeds

    2.2 微波提取樹莓籽中原花青素工藝優(yōu)化響應(yīng)面試驗

    以乙醇體積分數(shù)、微波溫度、微波功率作為考察對象,采用響應(yīng)面分析法安排試驗,以獲取最適工藝參數(shù),試驗因素水平見表1,響應(yīng)面試驗數(shù)據(jù)見表2。

    表1 響應(yīng)面試驗因素水平編碼表Table 1 Coded factors and their coded levels in response surface design

    表2 響應(yīng)面試驗設(shè)計及結(jié)果Table 2 Arrangement and experimental results of response surface design

    對試驗數(shù)據(jù)進行多項式擬合回歸,得到回歸方程為:Y= 7.107143+0.2355X1+0.615375X2-2.832643X12。

    對回歸方程進行方差分析,結(jié)果見表3。

    表3 回歸方程的方差分析Table 3 Analysis of variance for the developed regression equation

    從表3可以看出,模型顯著(P<0.01),PC提取率與試驗中3個因素的回歸方程的F值為15.35639,方程顯著?;貧w方程的線性相關(guān)系數(shù)為0.9961,說明因變量與3個自變量之間的線性關(guān)系顯著。

    回歸方程各項的方差分析(表4)表明,對于因變量Y的一次項、二次項、交互項都是顯著的,因此各項因素與PC提取率之間的關(guān)系不是簡單的線性關(guān)系,而是二次關(guān)系,各因素之間存在一定的交互作用,同時失擬項也進一步表明回歸方程可以較好地描述各因素與響應(yīng)值之間的真實關(guān)系,因此可以利用該回歸方程確定最佳的PC提取工藝條件。

    表4 回歸方程各項的方差分析Table 4 Analysis of variance for each term of the developed regression equation

    圖2 Y=f(X1,X2)的響應(yīng)面圖Fig.2 Response surface plot ofY=f(X1,X2)

    圖3 Y=f(X1,X3)的響應(yīng)面圖Fig.3 Response surface plot ofY=f(X1,X3)

    圖4Y=f(X2,X3)的響應(yīng)面圖Fig.4 Response surface plot ofY=f(X2,X3)

    圖2 ~4直觀地給出了各兩因素交互作用的響應(yīng)面圖。從響應(yīng)面的最高點可以看出,在所選的范圍內(nèi)存在極值,即是響應(yīng)面的最高點。比較幾個圖可知,因素X1(乙醇體積分數(shù))、X2(微波波功率)對響應(yīng)值的影響較大,表現(xiàn)為曲線比較陡,這與回歸分析的結(jié)果吻合。由SAS分析得到最大響應(yīng)值(Y)時,對應(yīng)的編碼值分別為X1=0.028、X2=-0.875、X3=0.371。與其相對應(yīng)的原花青素的最佳提取條件為乙醇體積分數(shù)60.28%、微波功率312.50W、料液比1:10.74(g/mL),原花青素提取率預(yù)測值7.21mg/g。

    為檢驗響應(yīng)面法的可行性,采用得到的最佳微波提取條件進行原花青素提取的近似驗證實驗,乙醇體積分數(shù)60%、超聲波功率300W、料液比1:10(g/mL),3次平行實驗得到的得率驗證值為7.19mg/g,與預(yù)測值相對誤差為0.27%。因此響應(yīng)面法可以優(yōu)化原花青素微波提取。

    3 結(jié) 論

    微波輔助提取樹莓籽中原花青素的最佳工藝為乙醇體積分數(shù)60%、微波功率300W、料液比1:10(g/mL),在此條件下原花青素的提取率可達7.19mg/g。利用該方法提取率比傳統(tǒng)水提法提高了約2倍。

    參考文獻:

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    Optimization of Microwave Extraction for Procyanidins from Raspberry Seeds

    ZHANG Bai-qing,ZHANG Yan-yan,LI Long-jie
    (College of Food Science, Shenyang Agricultural University, Shenyang 110866, China)

    Objective: To explore the microwave-assisted extraction of procyanidins from raspberry seeds and screen the optimal extraction parameters. Methods: The response surface design was used to investigate the effects of ethanol concentration,microwave power, material-liquid ratio and microwave time on extraction rate of procyanidins from raspberry seeds. Results: The optimal extraction conditions were ethanol concentration of 60%, ultrasonic power of 300 W, material/liquid ratio of 1:10 (g/mL)and microwave extraction time of 3 min. Under the optimal extraction conditions, the extraction rate of procyanidins from raspberry seeds was up to 7.19 mg/g, which exhibited a 3-fold enhancement compared with traditional water extraction. Conclusion: The optimized microwave extraction process for procyanidins from raspberry seeds is highly efficient and less time consumption.

    raspberry seeds;procyanidins;microwave-assisted extraction

    TS201.1

    A

    1002-6630(2011)06-0025-04

    2010-04-27

    張佰清(1966—),男,副教授,博士,主要從事食品加工技術(shù)研究。E-mail:sybaiqingxl@sina.com

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