甲硝唑和替硝唑體外抑制陰道毛滴蟲療效比較

毛明輝，侯欣喜，劉 俊，張歡歡，萬殊岑，徐 慧，毛川江，楊宗琪，趙 勇

（川北醫(yī)學(xué)院 病原中心，四川 南充637007）

陰道毛滴蟲主要寄生在人體的陰道及泌尿道，易引起滴蟲性陰道炎、前列腺炎等疾病，并與其他性傳播疾病共同影響人類健康，甚至導(dǎo)致不孕不育。甲硝唑?yàn)橹委煹蜗x性陰道炎的首選藥物，但近年來表現(xiàn)出高耐藥性。本實(shí)驗(yàn)特將甲硝唑和替硝唑作比較，以期為臨床治療提供參考。

1 材料與方法

1.1 藥物

甲硝唑注射液（100mL：0.5g，四川科倫藥業(yè)股份有限公司，產(chǎn)品批號：C090524－B2），替硝唑注射液（100mL：0.4g，四川科倫藥業(yè)股份有限公司，產(chǎn)品批號：C090921－G1）。現(xiàn)配現(xiàn)用。

1.2 肝浸湯的制備［6］

成分：牛肝15g、氯化鈉0.5g、蛋白胨2g、半胱氨酸鹽酸鹽0.2g、麥芽糖1g及蒸餾水100mL。制法：將牛肝15g切成小塊，于100mL蒸餾水中置4℃冰箱內(nèi)過夜，次日煮沸1h，過濾取濾液，不足100mL用蒸餾水補(bǔ)足。每100mL濾液分別加入上述營養(yǎng)成分，加熱溶解，調(diào)節(jié)pH至6.0［7］，8磅壓力下消毒20min后，于37℃恒溫箱密閉培養(yǎng)24h，證明無菌后即加青霉素使其濃度為1萬U／mL［6］，冰箱凍存。臨用前加無菌滅活牛血清20%。

1.3 蟲株及提純

陰道毛滴蟲來自川北醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院婦科門診患者，取確診患者陰道后穹窿分泌物于5mL培養(yǎng)基（1mL滅活無菌牛血清＋4mL含青霉素30萬U／mL，鏈霉素2萬U／mL的肝浸湯）中37℃下培養(yǎng)12h，后連續(xù)轉(zhuǎn)種于含青霉素濃度為10萬U／mL，鏈霉素濃度為1萬U／mL的肝浸湯中37℃下培養(yǎng)至染色涂片無菌即可。

1.4 體外藥敏實(shí)驗(yàn)

設(shè)置A、B、C組，培養(yǎng)基均為5mL（1mL滅活無菌牛血清＋3.5mL肝浸湯含青霉素和鏈霉素各5萬U＋0.5mL稀釋的藥液）。A、B組為實(shí)驗(yàn)組，C為空白對照組。A組加無菌生理鹽水稀釋的甲硝唑0.5mL，B組加同樣稀釋的替硝唑0.5mL，C組加入無菌生理鹽水0.5mL。A、B組的抗毛滴 蟲 藥 物 濃 度 都 設(shè) 為 5μg／mL、50μg／mL、100μg／mL、200μg／mL、500μg／mL、1 000μg／mL、1 500μg／mL、2 000μg／mL，且每個(gè)濃度下均設(shè)10支試管。將A、B、C三組放于37℃恒溫箱培養(yǎng)24h，混勻后用血球計(jì)數(shù)板觀察活蟲，計(jì)算相對抑制率。相對抑制率＝活蟲數(shù)／總蟲數(shù)×100%。

2 結(jié)果

2.1 甲硝唑、替硝唑的效果比較

空白對照組的活蟲率均在90%以上，結(jié)果見表1。

表1 甲硝唑、替硝唑的效果比較

2.2 甲硝唑和替硝唑的量—效曲線

甲硝唑和替硝唑的量—效曲線，結(jié)果見圖1。

圖1 甲硝唑和替硝唑的量—效曲線

3 討論

本實(shí)驗(yàn)中使用的甲硝唑具廣譜抗厭氧菌和抗原蟲的作用，是治療滴蟲性陰道炎的首選藥，但其在體內(nèi)作用效果因其半衰期短、生物利用度小等原因而遜于替硝唑，且副作用也很大。替硝唑是WHO推薦的集體和個(gè)人治療滴蟲性陰道炎最佳選擇。從實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，同濃度下甲硝唑的相對抑制率低于替硝唑，這與邵啟祥等［5］報(bào)道相似。兩藥濃度在5μg／mL、500μg／mL、2 000μg／mL時(shí)，甲硝唑的相對抑制率分別為3.2%、16.4%、60.8%；替硝唑的相對抑制率分別為4.2%、21.3%、76.4%，此說明隨兩藥的濃度升高其藥效也不斷增強(qiáng)。對此，毛維丹等［4］的報(bào)道中也有相似結(jié)論。當(dāng)濃度為200μg／mL及以下時(shí)，甲硝唑的相對抑制率與替硝唑差異不大；當(dāng)兩藥物濃度高于200μg／mL時(shí)，替硝唑作用明顯好于甲硝唑且兩藥均不超過20%；當(dāng)濃度高于500μg／mL時(shí)，兩藥體外抑制陰道滴蟲的作用效果明顯增強(qiáng)且甲硝唑和替硝唑在2000μg／mL時(shí)分別達(dá)到60.8%和76.4%，效果顯著。其體外抗陰道毛滴蟲報(bào)道中，劉淑英等［3］已證實(shí)在3μg／mL時(shí)作用效果不及甲硝唑，而據(jù)邵啟祥等［5］報(bào)道，同劑量下，甲硝唑效果均不及替硝唑。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果與邵啟祥等［5］相似，而與劉淑英［3］有差別，這可能與藥物劑型和蟲株等有關(guān)。闞全程（1999）［2］、劉淑英等（2003）［3］均報(bào)道替硝唑?yàn)?μg／mL，甲硝唑?yàn)?μg／mL時(shí)蟲體全部死亡；王芃芃（1995）［1］報(bào)道的甲硝唑和替硝唑的致死濃度均在5μg／mL；邵啟祥［5］報(bào)道兩種藥物的 MIC和 MBC分別為甲硝唑陰道泡騰片是50μg／mL和100μg／mL，而替硝唑?yàn)?5μg／mL和50μg／mL，兩藥同效果下濃度相差一倍；毛維丹［4］報(bào)道甲硝唑在2 500μg／mL時(shí)抑制率為51.2%；本實(shí)驗(yàn)在2 000μg／mL時(shí)甲硝唑和替硝唑分別為60.8%和76.4%。從引用文獻(xiàn)和本實(shí)驗(yàn)看，替硝唑和甲硝唑抑制陰道毛滴蟲的濃度從幾微克到幾千微克不等，各自殺蟲效應(yīng)雖可能與蟲株的耐藥性以及藥物的劑型等因素有關(guān)，但是從時(shí)間上看，陰道毛滴蟲的耐藥性在增強(qiáng)趨勢非常明顯，這足以引起臨床醫(yī)務(wù)工作者對陰道毛滴蟲的耐藥性以及合理用藥的重視。

［1］王芃芃，鄧珊珊，嚴(yán)曉嵐.替硝唑體外抗陰道毛滴蟲試驗(yàn)［J］.實(shí)用寄生蟲病雜志，1995，3（3）：120－121.

［2］闞全程，于 玲，馬春會(huì).替硝唑栓體內(nèi)外抗陰道毛滴蟲作用［J］.中國現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué)，1999，16（2）：62－64.

［3］劉淑英，于 玲.替硝唑栓體內(nèi)外抗陰道毛滴蟲作用研究［J］.臨床醫(yī)學(xué)，2003，23（4）：57－58.

［4］毛維丹，梁菲菲，孫貝蒂，等.3種藥物體外抗陰道毛滴蟲作用比較觀察［J］.應(yīng)用預(yù)防醫(yī)學(xué)，2008，14（4）：200－202.

［5］邵啟祥，李良菊，李衛(wèi)競，等.替硝唑陰道泡騰片體內(nèi)外抗陰道毛滴蟲感染的實(shí)驗(yàn)研究［J］.鎮(zhèn)江醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，1998，1（8）：5－6.

［6］徐露，王宇學(xué)，周玉娟.肝浸湯培養(yǎng)陰道毛滴蟲的改進(jìn)［J］.實(shí)用醫(yī)技雜志，2008，15（18）：2 366－2 367.

［7］郭步平，李宇飛.不同pH肝浸湯培養(yǎng)基培養(yǎng)陰道毛滴蟲的觀察［J］.中國病原生物學(xué)雜志，2006，1（1）：20－21.