公豬異味控制疫苗效力試驗

劉志南,楊漢春

(中國農業(yè)大學動物醫(yī)學院,北京 海淀 100193)

公豬異味(boar taint)是未去勢公豬肉中存在的一種令人討厭的異味、騷味、膻氣。未去勢公豬約有50%的幾率出現異味,而母豬和去勢過的公豬也有1%～3%存在異味[1]。產生公豬異味的成分,主要是兩種化合物,即雄酮(androstenone)和糞臭素(skatole)。雄酮是由睪丸分泌的一種甾類化合物,糞臭素是小腸中色氨酸分解后的產物。這兩種化合物具有高度的親脂性,在豬的脂肪組織中優(yōu)先累積,在豬肉烹制過程中釋放出來[2]。

傳統控制公豬異味的方法是手術去勢。目前,手術去勢仍是消除公豬異味十分有效的途徑。然而,手術去勢給仔豬帶來巨大的應激和痛苦,增加感染和死亡幾率,并剝奪了公豬的自然合成代謝因子。與公豬相比,去勢豬要消耗更多的飼料,并且會導致豬的生長性能明顯下降和過度的脂肪沉積[3-7]。

異普克(improvac)是一種公豬異味控制疫苗,可通過兩次免疫替代傳統的手術去勢來達到控制公豬異味的目的,同時發(fā)揮公豬巨大的生產優(yōu)勢來獲得更大利益。

本試驗通過異普克免疫豬與手術去勢公豬和完整公豬進行的對比,測定脂肪樣本中的雄酮和糞臭素的含量,血清中的睪酮和免疫抗體水平,睪丸的寬度等來評價異普克的免疫效力,探討在我國通過免疫來替代手術去勢、進而提高養(yǎng)豬生產性能的可行性。

1 材料與方法

1.1 試驗豬 廣西某大型豬場,品種為杜長大三元雜交豬。

1.2 異普克 輝瑞澳大利亞Parkville生產廠提供,經農業(yè)部批準進口到中國。100 mL塑料瓶包裝,2℃～8℃冷藏、避光保存。批號和有效期見表1。

表1 異普克疫苗和有效期

1.3 動物挑選、分組、分欄 試驗中所有公豬的日齡差異最大1周,將每窩健康公豬隨機分配到各試驗組,使平均體重差異達到最小化。試驗豬總數為400頭,分成5組:手術去勢組(T 01)80頭,異普克組240頭(3批疫苗 ×80頭,T 02、T 03、T 04),對照組(不去勢不免疫公豬,T 05)80頭。生理鹽水注射和異普克免疫均分別在15周齡和19周齡。23周齡時試驗結束,屠宰所有試驗豬。試驗設計見表2。

表2 試驗設計

所有試驗豬在斷奶時稱重,根據同欄中體重差異最小化的原則按體重進行分欄。欄位是隨機分配的。試驗過程中可以變換各欄的分布位置,但欄內的試驗動物不變。

1.4 異普克免疫 耳后皮下注射,兩次免疫至少間隔4周。首免在15周齡,二免在19周齡。使用

0.5 英寸(12 mm)、16號針頭和N J Philips Secure Plus 注射器。

1.5 樣本采集和檢測

1.5.1 血液樣品 檢測血清中睪酮和Gn RF(促性腺激素釋放因子)抗體的水平。分別在首免前1 d和屠宰前1 d,從頸靜脈采集血樣約10 mL,分離血清。上海Frontage實驗室,應用ELISA測定血清中Gn RF抗體水平,以液相色譜-串聯質譜色譜法(LC-MS/MS)檢測血清中睪酮的含量,檢出限量LOQ為0.10 ng/m L。

1.5.2 脂肪樣品 檢測糞臭素和雄酮含量。屠宰時,分別采集所有試驗豬的皮下脂肪20 g,標記后冷凍保存。上海 Frontage實驗室,雄酮濃度以 LCMS方法檢測(LOQ=0.20μg/g),用高效液相色譜熒光法檢測糞臭素含量(LOQ=0.0187μg/g)。糞臭素感觀閾值是0.200μg/g,雄酮為1.000μg/g。

1.6 睪丸寬度測量 在屠宰前采血時,用游標卡尺測量每頭豬兩個睪丸最寬處的寬度。

1.7 數據分析 首要效力變量是公豬異味參數(糞臭素、雄酮)和睪酮。次要效力變量是睪丸大小。所有的假設檢驗按照0.05的顯著水平進行檢驗(雙側檢驗)。

2 結果與分析

2.1 脂肪樣品

2.1.1 雄酮 T 05與其他處理組相比,雄酮濃度的最小均方(least square meat,LSM)顯著高于其他處理組。T03免疫組中有1頭豬(T 3386)雄酮濃度為0.604μg/g,此濃度值仍然低于感觀異味閾值(1.000μg/g)。T 02,T 03和T04及 T 01,雄酮濃度均低于1.000μg/g的閾值(見表3)。

表3 脂肪樣本中雄酮的最小均方 (μg/g)

2.1.2 糞臭素 糞臭素最小均方值(表4),T 05的糞臭素濃度顯著高于其他各處理組。免疫組與T 01組相比,沒有顯著差異。

表4 脂肪樣本中糞臭素的最小均方 (μg/g)

2.2 血清樣品

2.2.1 睪酮 免疫前,T 01組顯著低于其他各處理組(表5)。屠宰時,T 01和免疫各組睪酮濃度沒有顯著差異,重要的是疫苗免疫各組與 T 05組相比,睪酮水平顯著下降(表6)。

表5 首免前血清中睪酮最小均方值 (ng/m L)

2.2.2 Gn RF抗體 T 01或T 05與其他任何處理組比較,血清中Gn RF的抗體滴度在免疫前沒有顯著差異(表7)。但屠宰前,免疫動物與非免疫動物相比,各免疫組Gn RF的抗體滴度顯著高于T 01組和 T 05組(表8)。

表6 屠宰前血清中睪酮的最小均方值 (ng/m L)

2.3 睪丸寬度 屠宰前測量T 05和各免疫組豬的睪丸寬度(表 9)。免疫豬平均睪丸寬度減少約30%。在T 02、T 04組中各有1頭豬,T 03組中有2頭豬睪丸最寬處大于110 mm,T 05組73頭豬中有36頭大于110 mm。

表7 首免前GnRF抗體滴度的幾何平均數

表8 屠宰前GnRF抗體滴度的幾何平均數

注:T01 vs T02,T 03,T 04,P≤0.0001;T 05 vs T02,T03,T04,P≤0.0001

表9 屠宰時測量睪丸寬度 (mm)

3 結語

決定異普克效力的主要參數是公豬異味(糞臭素和雄酮)和睪酮。通過手術去勢組(T 01)與3個免疫組(T 02,T 03和T 04)中的任意一組比較,脂肪中雄酮和糞臭素以及血清中睪酮濃度均無顯著差異,3批異普克中任何一批均有效。因此,在國內現行的養(yǎng)豬生產條件下,異普克能夠替代手術去勢達到有效控制公豬異味的目的。

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