火焰原子吸收光譜法測(cè)定附子中微量元素的含量

高志祥，孫淑波，王琳，姜志明，孟繁浩#（.中國醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院，沈陽市000；.沈陽職業(yè)技術(shù)學(xué)院基礎(chǔ)部，沈陽市 0045；.沈陽軍區(qū)總醫(yī)院醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)科，沈陽市 005）

附子是毛茛科植物烏頭的側(cè)根（子根），始載于《神農(nóng)百草經(jīng)》，被列于下品：“味辛、溫。主風(fēng)寒咳逆邪氣，溫中，金創(chuàng)，破癥堅(jiān)積聚，血瘕，寒溫，踒蹩拘攣，腳痛不能行步”。附子味辛、甘，性熱，有大毒，功效回陽救逆、補(bǔ)火助陽、散寒止痛，《本草經(jīng)讀》謂附子“為回陽救逆第一品藥”[1]。

大量研究表明，微量元素與許多疾病的發(fā)生發(fā)展有關(guān)[2]。微量元素與健康有密切的關(guān)系，同時(shí)微量元素在許多疾病的病因?qū)W、發(fā)病學(xué)、診斷學(xué)、防治學(xué)方面具有重要的意義[3]。它們?cè)诰S持某些維生素的活性、參與激素的生理作用、協(xié)調(diào)體內(nèi)某些物質(zhì)的運(yùn)輸以及維持核酸的正常代謝等生命活動(dòng)中起著重要的作用[4]。筆者采用火焰原子吸收光譜法測(cè)定附子中的微量元素，為進(jìn)一步深入研究探討附子的藥效機(jī)制和臨床用途提供依據(jù)。

1 儀器與試藥

TAS-990 Super型原子吸收分光光度計(jì)、TAS-990 Super數(shù)據(jù)工作站（北京普析通用儀器有限責(zé)任公司）；DB-3型不銹鋼電熱板（江蘇金壇市金城國勝實(shí)驗(yàn)儀器廠）；實(shí)驗(yàn)所用的玻璃儀器均經(jīng)過HNO3-H2O（2∶5）浸泡12 h以上，晾干，備用。

鋅（Zn）、錳（Mn）標(biāo)準(zhǔn)溶液（國家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研究中心，批號(hào)分別為 GSB-04-1721-2004、GSB-04-1728-2004）；銅（Cu）、鐵（Fe）標(biāo)準(zhǔn)溶液（國家地質(zhì)實(shí)驗(yàn)測(cè)試中心，批號(hào)分別為GSB-04-1731-2004、GSB-04-1736-2004）；鎘（Cd）、鉻（Cr）、鉛（Pb）、鎳（Ni）、鈣（Ca）、鎂（Mg）標(biāo)準(zhǔn)溶液（國家環(huán)境保護(hù)總局標(biāo)準(zhǔn)樣品研究所，批號(hào)分別為GSB-04-1741-2004、GSB-04-1743-2004、GSB-04-1744-2004、GSB-04-1745-2004、GSB-04-1747-2004、GSB-04-1448-2004）；硝酸、高氯酸（優(yōu)級(jí)純，沈陽市化學(xué)試劑廠）；水為蒸餾水。

附子購自于沈陽市太原街天士力大藥房（批號(hào)：20100828），經(jīng)中國醫(yī)科大學(xué)中心實(shí)驗(yàn)室陳再興講師鑒定為附子真品。將樣品洗凈，于105℃恒溫干燥，冷卻至室溫，粉碎，備用。

2 方法與結(jié)果

2.1 供試品溶液的制備

準(zhǔn)確稱取附子藥材粉末1.0 g，置于50m L廣口錐形瓶中，加入10m L硝酸-高氯酸（4∶1），搖勻，置于電熱板上140℃消解2 h，升高溫度至消化完全，分2次加入10m L水繼續(xù)加熱驅(qū)酸，緩緩濃縮至近干，冷卻，定量轉(zhuǎn)移至量瓶中，以2%的硝酸定容。

2.2 原子吸收測(cè)定條件

各元素的最佳儀器工作條件見表1。

表1 各元素的火焰原子吸收儀器工作條件Tab 1 Working conditionsof flam e AAS in trace elements

2.3 線性關(guān)系考察

參照文獻(xiàn)報(bào)道和預(yù)試驗(yàn)對(duì)附子的初測(cè)值，擬定了各元素的標(biāo)準(zhǔn)曲線。將各元素的標(biāo)準(zhǔn)貯備液用2%的硝酸逐級(jí)稀釋配制成一系列的標(biāo)準(zhǔn)溶液。按表1的工作條件對(duì)標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行測(cè)定，以峰面積積分值（Y）為縱坐標(biāo)，進(jìn)樣量（X）為橫坐標(biāo)，制備標(biāo)準(zhǔn)曲線，得10種元素的回歸方程和相關(guān)系數(shù)，詳見表2。

表2 10種元素的回歸方程和相關(guān)系數(shù)Tab 2 The regression equations and correlation coefficients of 10 traceelements

2.4 精密度試驗(yàn)

取Cu、Fe、Mn、Pb、Cd、Cr、Zn、Ni、Ca、Mg元素標(biāo)準(zhǔn)溶液適量，連續(xù)測(cè)定6次，計(jì)算吸光度相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)差（RSD）。結(jié)果，各元素RSD分別為0.52%、1.94%、0.50%、2.2%、1.52%、2.2%、0.20%、0.98%、0.16%、1.72%（n均為6）。表明儀器的精密度良好。

2.5 回收率試驗(yàn)

取供試品溶液，采用加樣回收率法，精密加入Cu、Fe、Mn、Pb、Cd、Cr、Zn、Ni、Ca、Mg元素的標(biāo)準(zhǔn)溶液適量，混勻，按表1工作條件測(cè)定，計(jì)算各元素的加樣回收率。結(jié)果，各元素的回收率分別為101.39%、101.11%、100.92%、101.39%、101.73%、102.62%、100.68%、101.32%、100.47%、100.64%。

2.6 各元素含量測(cè)定

按表1工作條件對(duì)待測(cè)樣品進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果見表3。

表3 附子中微量元素的含量測(cè)定結(jié)果Tab 3 Determ ination results of trace elem ents in A.carm ichaelii

3 討論

本試驗(yàn)采用硝酸-高氯酸混合酸作為消解系統(tǒng)，可以有效去除樣品中的有機(jī)成分對(duì)儀器和測(cè)定結(jié)果的影響，試驗(yàn)過程中采用的優(yōu)級(jí)純的硝酸和高氯酸，溶液中的金屬離子雜質(zhì)少，減少了試驗(yàn)過程中干擾離子的影響，也使得在樣品預(yù)處理及分析測(cè)定的過程中減少誤差值，這樣能夠確保得到正確的測(cè)定值。結(jié)果表明，消解完全徹底，樣品的處理方法準(zhǔn)確、簡(jiǎn)便，重現(xiàn)性良好。

采用空氣-乙炔火焰測(cè)定Ca、Mg、Cr時(shí)，為了防止溶液中其他元素及酸根離子的干擾，測(cè)定時(shí)需加入保護(hù)劑。

人體有益的金屬元素是中藥歸經(jīng)與物質(zhì)基礎(chǔ)的主要組成部分。因此，中藥的療效不僅與其有機(jī)成分有關(guān)，還與其所含的無機(jī)元素的種類及含量密切相關(guān)。許多研究表明，微量元素不僅影響藥效，甚至直接參與或協(xié)同作用。

本試驗(yàn)采用火焰原子吸收光譜法測(cè)定附子中的重金屬鉛的含量為8.125μg·g-1，符合《中國藥典》重金屬檢查法的限量要求，有利于對(duì)附子的質(zhì)量進(jìn)行控制。

[1]李 寧，廖映華.從附子的運(yùn)用談經(jīng)方的藥物用量[J].中醫(yī)雜志，2010，51（2）：18.

[2]趙鳳澤，沈剛哲，南極星，等.微量元素與疾病診斷治療的研究現(xiàn)狀及展望[J].廣東微量元素科學(xué)，2002，9（7）：1.

[3]倪鳳偉，李世臣，袁 瑛.微量元素在體內(nèi)的分布與作用[J].中國地方病防治雜志，2006，21（5）：277.

[4]張秀峰.8種治療心血管疾病中草藥中微量元素的系統(tǒng)聚類分析[J].中華現(xiàn)代中醫(yī)學(xué)雜志，2009，5（4）：212.