舒經(jīng)克痛軟膠囊抗痛經(jīng)的實(shí)驗(yàn)研究

武彩霞，李梅，曹廣樂，沈維良，玄振玉#（.山東醫(yī)學(xué)高等?？茖W(xué)校，臨沂市7600；.上海玉森新藥開發(fā)有限公司，上海市 003）

舒經(jīng)克痛軟膠囊由香附和當(dāng)歸有效部位組成，具有活血化瘀、行氣止痛、養(yǎng)血調(diào)經(jīng)的功效，臨床上用于婦女痛經(jīng)、月經(jīng)不調(diào)等癥的治療。筆者前期研究了該制劑對大鼠離體子宮和在體子宮活動(dòng)的作用[1]，現(xiàn)進(jìn)一步研究其活血化瘀的功效和對縮宮素誘發(fā)小鼠痛經(jīng)模型的影響，以期尋找其治療痛經(jīng)的主要作用機(jī)制，也為該制劑進(jìn)入臨床研究提供理論依據(jù)。

1 儀器與材料

1.1 儀器

BI-2000A型微循環(huán)觀測系統(tǒng)、HW-1000型超級恒溫水?。ǔ啥继┟穗娮佑邢薰荆?；FASCO-3010型全自動(dòng)血流變化測儀（重慶大學(xué)維多生物工程研究所）。

1.2 試藥

舒經(jīng)克痛軟膠囊（上海玉森新藥開發(fā)有限公司，批號：081023）；濃縮當(dāng)歸丸，月月舒牌痛經(jīng)寶顆粒（河南宛西制藥股份有限公司，批號分別為080202、080507）；己烯雌酚片（合肥久聯(lián)制藥有限公司，批號：20080104）；縮宮素注射液（上海禾豐制藥有限公司，批號：071115）。

1.3 動(dòng)物

清潔級昆明種小鼠，♀70只，♂10只，體重（20±2）g；清潔級Wistar大鼠，♀100只，體重（150±10）g，均由山東魯抗醫(yī)藥有限公司實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供（動(dòng)物生產(chǎn)合格證號：SCXK（魯）20080002）。

2 方法

2.1 舒經(jīng)克痛軟膠囊對縮宮素誘發(fā)小鼠痛經(jīng)模型的影響[2～4]

選取健康♀成熟小鼠70只和♂小鼠10只，♂小鼠全部為陰性對照，♀小鼠隨機(jī)均分為7組，即模型、舒經(jīng)克痛軟膠囊高、中、低劑量（38.4、19.2、9.6mg·kg-1）和濃縮當(dāng)歸丸高、中、低劑量（1.6、0.8、0.4 g·kg-1）組，每天每只ig己烯雌酚2mg·kg-1，連續(xù)12 d。于第13天ig給予相應(yīng)藥物1次，模型組和陰性對照組ig生理鹽水1m L·kg-1。ig給藥后1 h對小鼠ip縮宮素0.2 U/只（包括♂小鼠），觀察小鼠ip縮宮素后30m in內(nèi)扭體次數(shù)。

2.2 舒經(jīng)克痛軟膠囊的活血化瘀作用

2.2.1 舒經(jīng)克痛軟膠囊對大鼠血液流變學(xué)的影響[5]取健康♀大鼠50只，隨機(jī)分為5組，即陰性對照（等容生理鹽水）、月月舒和舒經(jīng)克痛軟膠囊高、中、低劑量（39.4、19.2、9.6mg·kg-1）組。ig給藥，每天1次，連續(xù)14 d。末次給藥后30m in，分別將大鼠用20%烏拉坦麻醉，腹主動(dòng)脈取血4～5m L，迅速注入加有肝素的抗凝管內(nèi)，搖勻后用于測定血液流變學(xué)指標(biāo)：全血黏度高切、全血黏度低切、全血還原黏度、紅細(xì)胞聚集指數(shù)。

2.2.2 舒經(jīng)克痛軟膠囊對大鼠腸系膜微循環(huán)的影響[6～9]分組和給藥同“2.2.1”項(xiàng)下方法。末次給藥后禁食不禁水24 h，用20%的烏拉坦（5m L·kg-1）ip麻醉，背部固定于手術(shù)臺上，將下腹部毛剪凈，于腹正中線作3～4 cm長切口，輕輕拉出一段腸袢（回盲端）的腸系膜固定在與恒溫恒壓浴槽相連接的特制的有機(jī)玻璃微循環(huán)觀察盒內(nèi)（充滿37℃生理鹽水），保持腸系膜濕潤，平衡10 m in后，于腸系膜表面滴加0.001%腎上腺素0.02m L/只，3m in后，通過微循環(huán)顯微鏡（40×）和顯微圖像處理系統(tǒng)測各組動(dòng)物腸系膜微血管直徑，在同一位置取3次平均值作為微血管的直徑，并觀察血管痙攣恢復(fù)時(shí)間。

2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

應(yīng)用SPSS11.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。計(jì)量資料以±s表示，采用單因素方差分析（one-way ANOVA）；計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 結(jié)果

3.1 對縮宮素誘發(fā)小鼠痛經(jīng)模型的影響

♂小鼠無扭體反應(yīng)（表中略去）。與模型組比較，舒經(jīng)克痛軟膠囊高、中、低劑量和濃縮當(dāng)歸丸高、中、低劑量組小鼠扭體次數(shù)顯著減少（P＜0.01或P＜0.05）。舒經(jīng)克痛軟膠囊對縮宮素誘發(fā)小鼠痛經(jīng)模型的影響見表1。

表1 舒經(jīng)克痛軟膠囊對縮宮素誘發(fā)小鼠痛經(jīng)模型的影響（±s，n＝10）Tab 1 Effectsof Shujing ketong soft capsuleson oxytocin-induced dysm enorrheamodelm ic（e±s，n＝10）

表1 舒經(jīng)克痛軟膠囊對縮宮素誘發(fā)小鼠痛經(jīng)模型的影響（±s，n＝10）Tab 1 Effectsof Shujing ketong soft capsuleson oxytocin-induced dysm enorrheamodelm ic（e±s，n＝10）

與模型組比較：＊P＜0.05，＊＊P＜0.01vs.modelgroup：＊P＜0.05，＊＊P＜0.01

組別模型組舒經(jīng)克痛軟膠囊低劑量組舒經(jīng)克痛軟膠囊中劑量組舒經(jīng)克痛軟膠囊高劑量組濃縮當(dāng)歸丸低劑量組濃縮當(dāng)歸丸中劑量組濃縮當(dāng)歸丸高劑量組扭體次數(shù)17.8±5.9 10.4±2.4＊＊9.1±1.9＊＊5.8±1.1＊＊11.4±3.8＊9.6±4.5＊＊8.6±2.8＊＊?jiǎng)┝?9.6mg·kg-1 19.2mg·kg-1 38.4mg·kg-1 0.4g·kg-1 0.8g·kg-1 1.6g·kg-1

3.2 對大鼠血液流變學(xué)的影響

與陰性對照組比較，月月舒和舒經(jīng)克痛軟膠囊高、中劑量組大鼠全血黏度高切、全血黏度低切、全血還原黏度、紅細(xì)胞聚集指數(shù)均顯著降低（P＜0.01或P＜0.05）；舒經(jīng)克痛軟膠囊低劑量組全血還原黏度、紅細(xì)胞聚集指數(shù)顯著降低（P＜0.01或P＜0.05）。舒經(jīng)克痛軟膠囊對大鼠血液流變學(xué)的影響見表2。

表2 舒經(jīng)克痛軟膠囊對大鼠血液流變學(xué)的影響（±s，n＝10）Tab 2 Effects of Shujing ketong soft capsules on hemorheologicmeasures in rat（s±s，n＝10）

表2 舒經(jīng)克痛軟膠囊對大鼠血液流變學(xué)的影響（±s，n＝10）Tab 2 Effects of Shujing ketong soft capsules on hemorheologicmeasures in rat（s±s，n＝10）

與陰性對照組比較：＊P＜0.05，＊＊P＜0.01vs.negative controlgroup：＊P＜0.05，＊＊P＜0.01

組別陰性對照組月月舒組舒經(jīng)克痛軟膠囊低劑量組舒經(jīng)克痛軟膠囊中劑量組舒經(jīng)克痛軟膠囊高劑量組紅細(xì)胞聚集指數(shù)12.85±2.23 10.43±1.35＊10.36±1.17＊10.22±1.10＊＊9.74±1.19＊＊?jiǎng)┝?4g·kg-1 9.6mg·kg-1 19.2mg·kg-1 38.4mg·kg-1全血黏度/mPa·s高切（200/S）7.08±1.01 6.14±0.63＊6.39±0.61 6.15±0.51＊6.17±0.59＊低切（3/S）18.46±2.59 15.93±1.70＊17.00±1.85 15.39±1.96＊16.12±1.68＊全血還原黏度14.52±0.98 11.97±1.82＊＊12.74±1.05＊＊13.07±1.27＊12.59±0.57＊＊

3.3 對大鼠腸系膜微循環(huán)的影響

與陰性對照組比較，月月舒和舒經(jīng)克痛軟膠囊高、中劑量組腎上腺素滴注前后大鼠腸系膜毛細(xì)血管管徑差值顯著減小，血管痙攣恢復(fù)時(shí)間顯著縮短（P＜0.01或P＜0.05）。舒經(jīng)克痛軟膠囊對大鼠腸系膜微循環(huán)的影響見表3。

表3 舒經(jīng)克痛軟膠囊對大鼠腸系膜微循環(huán)的影響（±s，n＝10）Tab 3 Effects of Shujing ketong soft capsules on mesenteric m icrocirculation disturbancemodel rat（s±s，n＝10）

表3 舒經(jīng)克痛軟膠囊對大鼠腸系膜微循環(huán)的影響（±s，n＝10）Tab 3 Effects of Shujing ketong soft capsules on mesenteric m icrocirculation disturbancemodel rat（s±s，n＝10）

與陰性對照組比較：＊P＜0.05，＊＊P＜0.01vs.negative controlgroup：＊P＜0.05，＊＊P＜0.01

組別陰性對照組月月舒組舒經(jīng)克痛軟膠囊低劑量組舒經(jīng)克痛軟膠囊中劑量組舒經(jīng)克痛軟膠囊高劑量組劑量4g·kg-1 9.6mg·kg-1 19.2mg·kg-1 38.4mg·kg-1毛細(xì)血管管徑/μm復(fù)制模型前17.17±6.06 20.65±7.25 16.05±3.92 16.04±4.12 16.03±4.87復(fù)制模型后14.98±5.90 19.30±7.24 13.81±3.56 14.64±4.13 14.71±4.86前減后差值2.19±0.84 1.35±0.38＊2.24±0.57 1.40±0.55＊1.32±0.44＊＊血管痙攣恢復(fù)時(shí)間/min 8.15±1.11 6.60±1.71＊7.20±1.87 6.90±1.29＊6.80±1.32＊

4 討論

筆者前期的研究表明[1]，舒經(jīng)克痛軟膠囊對子宮平滑肌收縮具有明顯抑制作用，提示其可以減緩子宮平滑肌的劇烈收縮從而緩解子宮缺血，故可用于治療痛經(jīng)。在本研究中，舒經(jīng)克痛軟膠囊能明顯降低縮宮素致小鼠痛經(jīng)模型的扭體次數(shù)，驗(yàn)證了其對痛經(jīng)的治療作用。另外，活血化瘀實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，舒經(jīng)克痛軟膠囊能明顯降低大鼠血液中全血黏度、全血還原黏度、紅細(xì)胞聚集指數(shù)等血液流變學(xué)指標(biāo)，并能改善腎上腺素致大鼠腸系膜微循環(huán)障礙，擴(kuò)張毛細(xì)血管，具有活血化瘀作用。

中醫(yī)學(xué)認(rèn)為，痛經(jīng)的發(fā)病機(jī)制主要是氣血運(yùn)行不暢，“不通則痛”?！端貑枴づe痛論》中“寒氣入經(jīng)而稽遲，泣而不行，客于脈外則血少，客于脈中則氣不通，故卒然而痛”，說明了“不通則痛”的機(jī)制。不論是屬營血不足所致或是由沖任受阻所致，治療上皆以“通”為主。結(jié)合臨床辨證，分別擬以補(bǔ)通、攻通、溫通、清通等方法。據(jù)報(bào)道，痛經(jīng)按傳統(tǒng)辨證施治，有效率可達(dá)56.7%，而以活血化瘀為主進(jìn)行治療，有效率則高達(dá)95.5%[10]。

現(xiàn)代醫(yī)學(xué)認(rèn)為，痛經(jīng)病理較為復(fù)雜。目前認(rèn)為與子宮內(nèi)膜合成和釋放前列腺素紊亂有關(guān)，痛經(jīng)越嚴(yán)重的婦女，其經(jīng)血中前列腺素水平就越高。據(jù)中藥藥理研究，許多活血祛瘀藥有明顯的抑制前列腺素的活性和解痙作用。

舒經(jīng)克痛軟膠囊由當(dāng)歸和香附的有效部位組成。有資料表明[11]，當(dāng)歸中有效成分能抑制縮宮素誘發(fā)的子宮平滑肌的興奮；香附中的有效成分能抑制大鼠離體子宮的自發(fā)性收縮，對縮宮素引起的離體子宮肌的收縮也具有顯著的抑制作用。此外，當(dāng)歸和香附的有效成分，還都具有一定的抗炎作用。這些因素可能是該藥治療痛經(jīng)的主要機(jī)制。

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