不同發(fā)育期黃牛血漿 心肌中心鈉素的測(cè)定

沈明華，李 莉，俞紅賢

（青海大學(xué)農(nóng)牧學(xué)院，青海 西寧 810016）

心鈉素是通過自分泌、旁分泌、胞內(nèi)分泌及周身分泌而產(chǎn)生的心源性的肽類激素，也稱心房利鈉多肽（atrial natriuretic peptide，ANP）。ANP主要存在于哺乳動(dòng)物的心房肌細(xì)胞的胞漿中，具有強(qiáng)大的利鈉、利尿、擴(kuò)張血管、減少血容量、降低血壓、參與水鹽代謝的作用，此外ANP在肺循環(huán)中也有重要的作用，可抑制去甲腎上腺素、血管緊張素、組胺、5-HT等引起的肺動(dòng)脈和支氣管收縮，同時(shí)還具有促進(jìn)肺泡表面活性物質(zhì)的分泌而改善肺通氣防止肺水腫發(fā)生的功能；在腦組織視上核，ANP提高滲透壓閾值，抑制渴閾從而使機(jī)體適應(yīng)提高了滲透壓的內(nèi)環(huán)境；在胰臟，調(diào)整胰腺內(nèi)分泌，促進(jìn)胰腺外分泌，從而促進(jìn)消化功能；在胃腸道促進(jìn)對(duì)鹽的吸收，從而促進(jìn)吸收功能；還具有增強(qiáng)巨噬細(xì)胞吞噬，增強(qiáng)免疫功能等等。研究表明，ANP對(duì)心臟功能的調(diào)節(jié)具有重要作用，血漿ANP含量和心肌組織中ANP的變化反映了心臟內(nèi)分泌功能改變的情況。當(dāng)前對(duì)ANP的生理、生化、藥理及臨床應(yīng)用的研究正逐步完善，為了探討ANP分泌調(diào)節(jié)與生長(zhǎng)發(fā)育期的關(guān)系，筆者等對(duì)1日齡、1月齡、6月齡、成年等不同發(fā)育期的黃牛血漿、心肌中ANP含量進(jìn)行了測(cè)定，報(bào)告結(jié)果如下。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物 山東省萊蕪市某牛場(chǎng)（海拔400m左右）黃牛，按出生年齡分為1日齡、1月齡、6月齡、成年組（13周歲左右）4組，每組5頭份，不分性別，均臨床健康，營(yíng)養(yǎng)狀況良好。血樣在屠宰前頸靜脈采血，用10%EDTA-Na2及抑肽酶抗凝分離血漿，-20℃冷凍保存，心肌組織在屠宰后液氮保存送實(shí)驗(yàn)室備用。

1.2 儀器和試劑 自動(dòng)放免儀（中國(guó)科大中佳公司提供），ANP放射免疫分析藥盒，購(gòu)自中國(guó)原子能科學(xué)研究院同位素研究所，批號(hào)：S10950119。

1.3 測(cè)定方法 血漿ANP測(cè)定按試劑盒說明書操作；心肌組織解凍后濾紙吸去表面殘血，分別精確稱取50mg，加入1mL 0.05mol／L Tris-HCl緩沖液（pH值=7.2）碾磨，沸水浴中10min，制成勻漿，4℃～3000r／min離心15min，取上清液按試劑盒說明書操作測(cè)定ANP含量。

1.4 數(shù)據(jù)處理 所有數(shù)據(jù)采用SPSS（11.0版）軟件進(jìn)行方差分析及Duncan′s多重比較，組間差異用t檢驗(yàn)，數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（）表示。

2 結(jié)果

不同發(fā)育期黃牛血漿和心肌組織中的ANP含量見表1。

表1 不同發(fā)育期黃牛血漿、心肌中ANP的含量 （pmol／L）

1日齡組血漿中ANP含量低于其他3個(gè)年齡組，差異顯著（P＜0.05），1月齡組已達(dá)到與成年組相同水平（P＞0.05）。隨著年齡的增加左右心房肌中ANP含量逐漸增加，到6月齡時(shí)差異顯著（P＜0.05），而左右心室肌中ANP含量無明顯變化（P＞0.05）。

心房肌中ANP的含量明顯高于血漿和心室?。≒＜0.01），6月齡組左、右心房肌中ANP的含量均顯著高于1日齡組和1月齡組（P＜0.05）。每個(gè)年齡組心肌不同部位ANP的測(cè)定結(jié)果顯示，ANP含量有多至少依次為：左心房、右心房、右心室、左心室。

3 討論

3.1 ANP是近年發(fā)現(xiàn)的動(dòng)物活性多肽，廣泛分布于心、肺、腎及神經(jīng)系統(tǒng)中。能調(diào)節(jié)心臟功能、改善心律失常、增加微循環(huán)，具有舒張冠狀動(dòng)脈及肺動(dòng)脈，增加心肌供血和提高微循環(huán)血流量的作用，ANP可通過利鈉、利尿作用減少容量負(fù)荷，改善心功能，還可作為神經(jīng)遞質(zhì)影響神經(jīng)細(xì)胞的興奮性 ，調(diào)節(jié)某些激素的釋放。因此，內(nèi)源性ANP增加是機(jī)體重要的保護(hù)性代償反應(yīng)，對(duì)維持心血管系統(tǒng)功能穩(wěn)定起重要作用［1］。本試驗(yàn)中隨著年齡的增長(zhǎng)黃牛血液中ANP的含量顯著增加（P＜0.05），心房肌中ANP含量逐漸增加，到6月齡時(shí)差異顯著（P＜0.05）。可以看出隨著黃牛機(jī)體的不斷發(fā)育，其循環(huán)系統(tǒng)功能逐漸提高，心房肌處于分泌活躍的釋放狀態(tài)，對(duì)心肌和肺臟都起到一種很好的代償性保護(hù)作用，揭示了黃牛心臟具有很好的適應(yīng)能力和良好的內(nèi)分泌調(diào)節(jié)機(jī)制。

3.2 多數(shù)研究認(rèn)為，ANP主要由心房合成分泌 ，也有研究發(fā)現(xiàn)肺及心室也參與ANP的分泌和合成［2］。本試驗(yàn)中，不同年齡段黃牛心房肌中ANP的含量均明顯高于血漿和心室?。≒＜0.01）。各年齡段黃牛心肌不同部位分泌結(jié)果顯示，ANP分泌有多至少依次為：左心房、右心房、右心室、左心室，表明心房是分泌ANP的主要部位，且以左側(cè)心房肌分泌居多。

3.3 本研究中，1日齡黃牛血漿中ANP含量顯著低于其他3個(gè)年齡組；其他3個(gè)年齡組之間差異不顯著（P＞0.05）。據(jù)羅世生等［3］報(bào)道，胎兒及新生兒早期ANP較成人高，這是新生兒為適應(yīng)生后循環(huán)變化的一種生理調(diào)節(jié)過程，也是導(dǎo)致新生兒早期生理性體重下降和早產(chǎn)兒低鈉血癥的直接原因，隨著年齡的增長(zhǎng)，心肌ANP含量降低，提示這種代償能力隨年齡增長(zhǎng)進(jìn)行性減弱。李莉等［4］報(bào)道，牦牛隨著年齡的增長(zhǎng)血液中的ANP含量逐漸降低，而本試驗(yàn)中黃牛隨著年齡的增長(zhǎng)血液中ANP含量呈逐漸增高趨勢(shì)（P＜0.01），且1日齡和1月齡時(shí)黃牛血漿中ANP含量均低于相同年齡段牦牛，到了6月齡和成年時(shí)均顯著高于相同年齡段牦牛（P＜0.05），這與李莉報(bào)道的牦牛隨年齡的增長(zhǎng)血漿中ANP含量呈現(xiàn)遞減趨勢(shì)有所不同，這是否與動(dòng)物品種或動(dòng)物所生活的環(huán)境有關(guān)，有待進(jìn)一步研究。

［1］Grlnstead W C，Young J B.The myocardial renin-angiotensin system：existence，importance and clinical implications［J］.Am Heart，1992，123：1039-1045.

［2］喬珊，孫艷蓀，王小花.睡眠呼吸暫停／低通氣綜合征患者心鈉素變化及意義［J］.中國(guó)呼吸與危重監(jiān)護(hù)雜志，2004，3：43-46.

［3］羅世生，徐昭文.心房利鈉多肽的某些研究進(jìn)展［J］.臨床薈萃，1994，9（10）：442-445.

［4］李莉，俞紅賢.不同發(fā)育期牦牛血漿和心肌中心鈉素的測(cè)定意義［J］.中國(guó)獸醫(yī)雜志，2007，43（3）：13-14.