復方環(huán)丙沙星乳劑的研制及體外抑菌試驗

李孝文，董 偉，陳小軍，，許朝愛，孫志良，2

（1.湖南農業(yè)大學動物醫(yī)學院，湖南 長沙410128；2.湖南省獸藥工程技術研究中心，湖南 長沙410311；3.湖南五指峰生化有限公司，湖南 瀏陽411216）

近年來，國內外獸藥工作者開展多方向的新制劑的研究與實踐，其中長效制劑可明顯減少用藥次數和劑量，有效降低藥物毒副作用的優(yōu)勢是當前研究一個熱點［1－2］。環(huán)丙沙星具有脂溶性高、抗菌后效應長等多種優(yōu)點被廣泛應用于獸醫(yī)臨床［3］。鑒于環(huán)丙沙星半衰期較短的不足［4］，課題組研制了復方環(huán)丙沙星長效乳劑，為充分發(fā)揮環(huán)丙沙星的藥理作用及獸用長效制劑方面提供試驗依據。

1 材料與方法

1.1 試驗材料 乳酸環(huán)丙沙星（98.3%）、乳酸甲氧芐啶（99.1%），7#白油，Span－80，Tween－80，硬脂酸鋁，營養(yǎng)瓊脂，5%復方環(huán)丙沙星注射液（實驗室自制）；膠體磨，超凈工作臺，冷凍離心機，光學顯微鏡；大腸埃希菌（C83901）、巴氏桿菌（Kober－6）、沙門菌（C77－31）、金黃色葡萄球菌（C56023）、鏈球菌（C55138），均購自中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所。

1.2 復方環(huán)丙沙星乳劑的制備［5－6］采用單因素法篩選水相和油相中表面活性劑及其他輔料的配比，同時確定二者的比例。使油相∶水相（O∶W）容量按1∶1、2∶1、3∶1、3∶2四種方式進行乳化：先緩速混合，在慢速攪拌油相的同進，緩慢傾入水相混合，然后再通過高速運轉的膠體磨充分乳化。

1.3 乳劑性狀的檢測 觀察每個批次復方環(huán)丙沙星乳劑的顏色和性狀，測定pH值，顯微鏡觀察乳劑顆粒并拍照，用Nikon編輯軟件測定乳劑顆粒直徑大小。37℃貯存10d加速老化法和3 000r／min離心15min加速分層法，考察是否破乳；以內口直徑為1.2mm的吸管，25℃條件下吸滿1mL垂直放出0.4mL計時考察黏度，t≤5s為合格。

1.4 體外抑菌試驗［7－8］采用試管二倍稀釋法和平皿菌落計數法測定乳劑和注射液的MIC和MBC，重復3次，求平均值。所得試驗數據通過SAS 8.1進行平均數、標準差和組間方差分析，以P＜0.01為差異極顯著，P＜0.05為差異顯著。

2 結果與分析

2.1 乳劑的性狀

2.1.1 物理性狀 復方環(huán)丙沙星乳劑為淡黃色油乳狀，其pH值為6.3～6.6。乳劑顆粒直徑平均大小7.6μm，符合獸用注射乳劑質量標準［9］。

2.1.2 穩(wěn)定性及黏度結果 O∶W 按1∶1、2∶1、3∶1、3∶2四種容量比的復方環(huán)丙沙星乳劑穩(wěn)定性及黏度結果見表1，結果表明，O∶W按2∶1容量比的乳劑為最佳配比。

表1 4種復方環(huán)丙沙星乳劑的穩(wěn)定性及黏度結果

2.2 體外抑菌試驗結果 復方環(huán)丙沙星乳劑和注射液對5種不同細菌的MIC和MBC試驗結果。見表2和表3。

表2 復方環(huán)丙沙星乳劑和注射液對5種不同細菌的平均MIC值 （μg／mL）

表3 復方環(huán)丙沙星乳劑和注射液對5種不同細菌的平均MBC值 （μg／mL）

上述試驗數據經統(tǒng)計處理表明，復方環(huán)丙沙星乳劑對5種細菌的MIC和MBC均極顯著優(yōu)于復方環(huán)丙沙星注射液（P＜0.01）。

3 討論

3.1 本乳劑制作工藝是借鑒油乳劑滅活疫苗抗原緩釋技術與抗菌藥物乳劑制備技術相結合的制備方法，通過反復的試驗與摸索，篩選出了針對復方環(huán)丙沙星乳劑以O∶W為2∶1的配比方式。篩選O∶W為2∶1的配比方式可以將藥溶液的水相充分包裹達到油包水結構，不僅能有效的保持乳劑的穩(wěn)定性和通針性，并且相對于O∶W為3∶1的方式還減少了白油的用量，降低了對機體的刺激。

3.2 復方環(huán)丙沙星乳劑和復方環(huán)丙沙星注射液對5種菌都表現(xiàn)了較強的體外抑菌效果。統(tǒng)計顯示：復方環(huán)丙沙星乳劑對5種細菌的MIC和MBC極顯著強于復方環(huán)丙沙星注射液（P＜0.01），說明復方環(huán)丙沙星通過劑型的改變其體外抑菌效果發(fā)生了顯著的提升?？咕幬镌谟桶膭┬蜖顟B(tài)下形成“藥物團”，其表層脂溶性與細菌具有親和力易與細菌結合，隨而增強了對細菌的作用，顯著提升了抑菌能力，故此乳劑的抑菌效果強于注射液。抗菌藥物被捕獲在油相形成的微結構中，使藥物形成一個儲存而緩慢釋放的“抗菌藥物庫”，只要1次注射，就可達到連續(xù)釋放藥物的目的［6］，從而延長了藥物的半衰期，起到了長效作用。

［1］侯惠民.新型藥物制劑的研究開發(fā)［J］.中國醫(yī)藥工業(yè)雜志，1997，28（2）：86－89.

［2］徐學劍.設計藥物新劑型的新思路與新方法［J］.中國實用醫(yī)藥，2009（4）：211－212.

［3］Denis A，Mitchison M D.Fluoroquinolones in the treatment of tuberculosis：A study in mice［J］.American Journal of Respir2 atory and Critical Care Medicine，2004 ，169：334－335.

［4］方炳虎，馮淇輝，陳杖榴，等.環(huán)丙沙星在豬體內的生物利用度及藥物動力學［J］.畜牧獸醫(yī)學報，1999，19（6）：588－590.

［5］姜平.獸醫(yī)生物制品學［M］.北京：中國農業(yè)出版社，2003：44－50.

［6］胡功政.獸醫(yī)藥劑學［M］.北京：中國農業(yè)出版社，2008：54－62.

［7］Joyce Van Donkersgoed， Marike Dussault，Pete Knight，etal.Clinical Efficacy of a Single Injection of Ceftiofur Crystalline Free Acid Sterile Injectable Suspension versus Three Daily Injections of Ceftiofur Sodium Sterile Powder for the Treatment of Footrot in Feedlot Cattle［J］.Vet Ther，2008，9（2）：157－162.

［8］倪語星，王金良，俆英春.抗微生物藥物敏感性實驗規(guī)范［M］.上海：上海科學技術出版社，2002：16.

［9］張志榮.藥劑學［M］.北京：高等教育出版社，2007：120－135.