云芝的薄層色譜鑒別

吳長輝，李 曄，宋玉娥

(福建仙芝樓生物科技有限公司，福建 福州 350002)

云芝，為多孔菌科真菌彩絨革蓋菌 Coriolus versicolor(L.exFr.)Quel的干燥子實體[1]56，很早就在我國和日本民間作為草藥用，含有的生物活性物質(zhì)對慢性乙型肝炎、慢性氣管炎、惡性腫瘤均有一定的療效[2]。關(guān)于云芝的鑒別，2010年版《中國藥典(一部)》對其性狀、顯微和理化鑒別作了規(guī)定，但其薄層色譜鑒別尚未見有報道，而薄層色譜鑒別具有專屬性強的特點。為此，筆者對云芝的薄層色譜鑒別進(jìn)行了初步研究，現(xiàn)報道如下。

1 儀器與試藥

WFH－203型三用紫外分析儀(上海精科實業(yè)有限公司);薄層色譜展開缸(上海信宜儀器廠，規(guī)格200 mm×200 mm);硅膠G預(yù)制薄層板(青島海洋化工廠分廠);SK1200A型超聲波清洗器(上?？茖?dǎo)超聲儀器有限公司);RE－5285A型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器(上海亞榮生化儀器廠)。云芝對照藥材和云芝供試品(批號分別為20080412，20080623，20090620，20090622，20090625)均由仙芝樓生物科技有限公司提供;石油醚(60～90℃)、三氯甲烷、甲酸乙酯、甲酸、環(huán)已烷、乙醇、濃硫酸、甲醇均為分析純，水為蒸餾水。

2 方法與結(jié)果

取云芝樣品粉末1.5 g，加甲醇30 mL，置超聲波清洗上超聲30 min，過濾、蒸干，用1 mL甲醇溶解，作為供試品溶液。取云芝對照藥材粉末1.5 g，加甲醇30 mL，置超聲波清洗上超聲30 min，過濾、蒸干，用1 mL甲醇溶解，作為對照品溶液。取甲醇1 mL，作為陰性對照品溶液。照薄層色譜法[1]附錄34試驗，用毛細(xì)管吸取陰性對照品溶液、對照品溶液、供試品溶液，分別點于硅膠G板上，以環(huán)己烷－三氯甲烷－甲酸乙酯－水(8∶7∶5∶1)的上層液為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外燈(365 nm)下檢視，并記錄色譜圖;再噴以10%硫酸乙醇液，并置烘箱中105℃烘至顯色清晰，置紫外燈(365 nm)下檢視并記錄色譜圖。供試品溶液色譜中，在與對照藥材溶液色譜相應(yīng)位置上顯相同顏色的熒光斑點，陰性對照品溶液無干擾(圖1)。

3 討論

對超聲提取法、回流提取法進(jìn)行了比較，發(fā)現(xiàn)兩種提取方式所得樣品液層析效果沒有明顯差別，但超聲提取法簡單快速，故樣品處理選用超聲提取法[3]。選用甲醇、乙酸乙酯、75%的乙醇，分別提取同一樣品，經(jīng)層析后顯色觀察。甲醇提取的樣品溶液在薄層上熒光斑點均較乙酸乙酯的和75%乙醇的清晰，且較75%乙醇的熒光斑點多1個，故選用甲醇為提取溶劑。分別取超聲提取20，30，40 min的樣品，得薄層色譜圖，發(fā)現(xiàn)超聲提取30 min的樣品溶液熒光斑點均較清晰。

圖1 云芝的薄層色譜圖

分別以石油醚(60～90℃)－甲酸乙酯－甲酸(15∶5∶1)[1]175、石油醚(60～90℃)－三氯甲烷－甲酸乙酯－甲酸(10∶5∶5∶1)、環(huán)己烷－三氯甲烷－甲酸乙酯－甲酸(10∶5∶5∶1)、環(huán)己烷－三氯甲烷－甲酸乙酯－水(10∶5∶5∶1)、環(huán)己烷－三氯甲烷－甲酸乙酯－水(8∶7∶5∶1)的上層液為展開劑，照薄層色譜法試驗，用毛細(xì)管吸取對照品和供試品溶液，分別點于硅膠G板上，展開，取出，涼干，置紫外燈(365 nm)下檢視，并記錄色譜圖;再噴以10%硫酸乙醇液，并置于烘箱中用105℃烘至顯色清晰后，置紫外燈(365 nm)下檢視并記錄色譜圖。結(jié)果5種展開劑的供試品溶液色譜中，在與對照藥材溶液色譜相應(yīng)位置上，均顯相同顏色的熒光斑點，但未顯色前，4種展開劑均勻只有1個明顯的熒光斑點;顯色后，展開劑環(huán)己烷－三氯甲烷－甲酸乙酯－水(8∶7∶5∶1)的熒光斑點最多且清晰，相互之間分離較好，比移值 R f為0.32～0.92。故選此作為展開劑。

根據(jù)試驗，所建立的方法快速、簡便、靈敏、重現(xiàn)性好、專屬性強，可作為云芝的質(zhì)量控制方法之一。薄層色譜鑒別的關(guān)鍵主要在于供試品的制備(樣品的處理)和展開劑的選擇，對于云芝的薄層色譜鑒別，今后還可以作進(jìn)一步的研究。

[1]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(一部)[M].北京:中國醫(yī)藥科技出版社，2010.

[2]孫向紅，李占偉，潘 琛，等.云芝的生藥學(xué)研究[J].中醫(yī)藥信息，1996，13(70):16.

[3]平欲暉，熊 魏，謝一輝.覆盆子的薄層色譜鑒別研究[J].實用藥物與臨床，2009，12(2):106－107.