去甲腎上腺素致狗髖關(guān)節(jié)一過性滑膜炎的機(jī)理研究

彭朝林

彭朝林:女，本科，主管護(hù)師，護(hù)士長

近期有文獻(xiàn)［1，2］表明，可以采用低濃度去甲腎上腺素誘導(dǎo)狗髖關(guān)節(jié)一過性滑膜炎的產(chǎn)生并推測(cè)去甲腎上腺素可能在一過性滑膜炎發(fā)病機(jī)理中起著重要作用，但其具體機(jī)理還不明確。已有研究表明［3］，去甲腎上腺素可以通過調(diào)節(jié)胞漿內(nèi)鈣離子濃度而影響血壓。因此，本研究擬探討去甲腎上腺素對(duì)股骨頭局部血循環(huán)和關(guān)節(jié)滑液鈣離子濃度的影響?，F(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 動(dòng)物與試劑

選擇年齡在2～3個(gè)月的幼狗80只(中山醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心雜種狗)，體重5～7 kg，♂♀各半。尼群地平納米片(河北賽克藥業(yè)有限公司，批號(hào)20031201，規(guī)格:10 mg/粒)。去甲腎上腺素(NA)(國藥準(zhǔn)字H12020621)。

1.2 動(dòng)物模型建立

將80只狗隨機(jī)分為兩組，各40只。第1組(A組)，每周在一側(cè)髖關(guān)節(jié)腔內(nèi)注入2‰ 低濃度NA 1 ml(2 μg)和1 ml生理鹽水，對(duì)側(cè)注入生理鹽水2 ml作對(duì)照;第2組(B組)，每周在一側(cè)髖關(guān)節(jié)腔內(nèi)注入2‰低濃度NA 1 ml(2 μg)和1 ml 10 mg/L尼群地平溶液，對(duì)側(cè)注入生理鹽水2 ml作對(duì)照。

1.3 關(guān)節(jié)內(nèi)壓及股骨頭血流檢測(cè)方法

應(yīng)用99mTc－MDP三相骨顯像方法［4］。在注入前和注入后行關(guān)節(jié)內(nèi)壓測(cè)定和99mTc－MDP三相骨顯像，隨后將狗處死進(jìn)行病理組織學(xué)檢查。每組于11個(gè)時(shí)間點(diǎn)即為注入前、注入后即時(shí)、注入后 3、6、12、24、48、72 h 及 1、2、4 周。每只狗強(qiáng)制式注入99mTC Tc－MDP 1ml，隨機(jī)在股骨頭連續(xù)顯像10 min，獲得雙側(cè)股骨頭的顯像時(shí)間－放射線曲線，第1 min為血流相，第2～10 min為血相，又于180 min后再次顯像，即可獲得靜態(tài)相線代謝相，計(jì)算其核素活性計(jì)數(shù)，顯示股骨頭血流狀態(tài)。機(jī)器為法Sophy Camera D57型ECT同位顯像儀。髖關(guān)節(jié)內(nèi)壓測(cè)定，置幼狗于屈曲位，經(jīng)髖關(guān)節(jié)內(nèi)側(cè)相當(dāng)于股骨溝中點(diǎn)處，刺入帶側(cè)孔的6號(hào)硬膜外穿刺針頭，直達(dá)股骨頸，然后退后少許進(jìn)入關(guān)節(jié)腔，連接IMC骨內(nèi)壓測(cè)定儀，記錄關(guān)節(jié)內(nèi)壓。

1.4 血清鈣離子測(cè)定

在注入前和注入后11個(gè)時(shí)間點(diǎn)抽取關(guān)節(jié)滑液100 μl，采用血清鈣甲基麝香草酚藍(lán)顯色EDTA褪色測(cè)定法［5］對(duì)關(guān)節(jié)滑液鈣離子進(jìn)行測(cè)定。于抽取關(guān)節(jié)液后將狗麻醉處死行病理組織學(xué)檢查，組織石蠟包塊切片，伊紅－蘇木素染色。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

數(shù)據(jù)處理采用SPSS 13.0軟件，重復(fù)測(cè)量資料采用方差分析。α =0.05。

2 結(jié)果

2.1 兩組股骨頭平均血流量之間的變化見表1。兩組間關(guān)節(jié)內(nèi)壓的變化見表2。兩組關(guān)節(jié)滑液鈣離子濃度的變化見表3。

2.2 病理組織學(xué)檢查

A組實(shí)驗(yàn)側(cè)與B組實(shí)驗(yàn)側(cè)相比，注入后3 h無明顯變化，6～72 h滑膜有灶性充血，表面粗糙，關(guān)節(jié)內(nèi)有積液。A組滑膜絨毛增生普遍存在，布滿關(guān)節(jié)腔，無壞死病灶;鏡下見:局部有滑膜水腫，少量血管輕度擴(kuò)張;滑膜絨毛樣增生顯著，膠原大量沉積，可見透明性變，這種表現(xiàn)以局灶性為主而非彌漫性。B組關(guān)節(jié)大部分正常。A、B兩組無1例出現(xiàn)股骨頭壞死。

表1 去甲腎上腺素及尼群地平對(duì)兩組兩側(cè)股骨頭平均血流量的影響( ± s，ml·g － 1·min － 1 )

表1 去甲腎上腺素及尼群地平對(duì)兩組兩側(cè)股骨頭平均血流量的影響( ± s，ml·g － 1·min － 1 )

注:﹡與對(duì)照側(cè)相比，P ＜0.05，﹡﹡ P ＜0.01，與對(duì)照側(cè)相比，＊P＜0.05，＊＊P ＜0.01

時(shí)間 實(shí)驗(yàn)側(cè)A組(n=40) B組(n=40)對(duì)照側(cè)(n=80)注藥前1758±20 1745±18 1723±26注藥后即時(shí) 2937±20﹡﹡＊ 3287±110 3559±29注藥后3 h 7492±56﹡﹡＊＊ 8634±162 8892±31注藥后6 h 1624±117﹡﹡＊ 1868±93 2027±125注藥后12 h 948±29﹡﹡ 1053±103﹡ 1197±86注藥后24 h 966±11﹡﹡ 1024±16﹡﹡ 1118±19注藥后48 h 1110±9﹡﹡＊＊ 1210±5﹡ 1278±45注藥后72 h 1131±41﹡﹡ 1234±13﹡ 1320±25注藥后1周 1173±22﹡ 1210±20 1270±13注藥后2周 3307±30 3489±34 3902±31注藥后4周1633±13 1644±45 1674±11

表2 去甲腎上腺素及尼群地平對(duì)兩組兩側(cè)關(guān)節(jié)內(nèi)壓的影響 (± s，mmHg)

表2 去甲腎上腺素及尼群地平對(duì)兩組兩側(cè)關(guān)節(jié)內(nèi)壓的影響 (± s，mmHg)

注:與對(duì)照側(cè)相比，﹡ P ＜0.05，﹡﹡ P ＜0.01，與對(duì)照側(cè)相比，＊＊P ＜0.01

時(shí)間 注藥側(cè)A組(n=40) B組(n=40)對(duì)照側(cè)(n=80)注藥前0.200 ±0.018 0.232 ±0.020 0.230 ±0.026注藥后即時(shí) 14.100 ±0.231 14.018 ±0.221 14.000 ±0.183注藥后3 h 2.069±0.040 ﹡﹡＊＊1.174 ±0.070 1.010 ±0.006注藥后6 h 0.800 ±0.029 ﹡ 0.500 ±0.056 0.400 ±0.014注藥后12 h 3.000 ±0.019 ﹡﹡ 0.800 ±0.070 0.500 ±0.022注藥后24 h 4.000 ±0.092 ﹡﹡ 1.400 ±0.067 ﹡1.000 ±0.039注藥后48 h 4.500 ±0.048 ﹡﹡ 1.600 ±0.078 ﹡1.300 ±0.018注藥后72 h 4.200 ±0.018 ﹡﹡ 1.200 ±0.060 1.000 ±0.013注藥后1 周 4.000 ±0.015 ﹡﹡ 1.300 ±0.056 1.200 ±0.012注藥后2 周 2.000 ±0.022﹡ 1.50 ±0.067﹡ 1.000±0.016注藥后4周0.290 ±0.019 0.26 ±0.062 0.250 ±0.008

表3 去甲腎上腺素及尼群地平對(duì)兩組兩側(cè)關(guān)節(jié)滑液鈣離子濃度測(cè)定( ± s，ml·g － 1·min － 1 )

表3 去甲腎上腺素及尼群地平對(duì)兩組兩側(cè)關(guān)節(jié)滑液鈣離子濃度測(cè)定( ± s，ml·g － 1·min － 1 )

注:與對(duì)照側(cè)相比，﹡ P ＜0.05，﹡﹡ P ＜0.01

時(shí)間 實(shí)驗(yàn)側(cè)(n=4)A組(n=40) B組(n=40)對(duì)照側(cè)(n=80)注藥前2.98 ±0.54 2.97 ±0.85 2.99 ±0.95注藥后即時(shí) 2.04 ±0.81 2.06 ±0.55 2.05 ±0.84注藥后3 h 1.88 ±0.49 ﹡ 2.16 ±0.67 2.24 ±0.17注藥后6 h 1.77 ±0.55 ﹡﹡ 2.35 ±0.45 2.45 ±0.64注藥后12 h 1.89 ±0.34 ﹡ 2.45 ±0.78 2.55 ±0.76注藥后24 h 1.92 ±0.44 ﹡ 2.55 ±0.34 2.60 ±0.45注藥后48 h 1.95 ±0.46 ﹡ 2.65 ±0.65 2.68 ±0.74注藥后72 h 1.99 ±0.34 ﹡ 2.67 ±0.54 2.77 ±0.43注藥后1 周 2.10 ±0.44 2.77 ±0.89 2.87 ±0.34注藥后2 周 2.21 ±0.54 2.78 ±0.34 2.89 ±0.78注藥后4周2.13 ±0.56 2.82 ±0.78 2.79 ±0.78

3 討論

急性髖關(guān)節(jié)一過性滑膜炎又稱毒性滑膜炎、過敏性髖、急性髖關(guān)節(jié)暫時(shí)性滑膜炎，是小兒常見的髖關(guān)節(jié)疾患，其發(fā)病機(jī)理還不明確。有研究［1，6］采用低濃度去甲腎上腺素誘導(dǎo)一過性髖關(guān)節(jié)滑膜炎可以取得較好的效果，并推測(cè)去甲腎上腺素可能在急性髖關(guān)節(jié)一過性滑膜炎發(fā)病機(jī)理中起著重要作用。研究［3］證實(shí)去甲腎上腺素能誘導(dǎo)人主動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞增殖、細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度升高和三磷酸肌醇受體－1(IP3R－1)蛋白表達(dá)增強(qiáng)，這一效應(yīng)能被鈣拮抗劑維拉帕米抑制。

在本研究中，從注藥后即時(shí)起，A組與對(duì)照側(cè)相比，血流量明顯增加，隨著時(shí)間延長，血流量逐漸減少但與對(duì)照側(cè)相比仍具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，并持續(xù)到給藥后1周時(shí)。B組與對(duì)照側(cè)相比，實(shí)驗(yàn)側(cè)血流量給藥后即時(shí)增加，只在給藥后12～72 h之間有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，隨著時(shí)間延長，逐漸降低，但降低幅度遠(yuǎn)低于A組實(shí)驗(yàn)側(cè)。這說明去甲腎上腺素對(duì)髖關(guān)節(jié)血流量的影響能被鈣離子拮抗劑尼群地平部分阻斷。另從關(guān)節(jié)內(nèi)壓實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，NA注射后3 h，A組關(guān)節(jié)內(nèi)壓隨之增高，與對(duì)照側(cè)相比具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，隨著炎癥消退而逐漸恢復(fù)正常;B組關(guān)節(jié)內(nèi)壓較對(duì)照側(cè)相比有所升高，但只在給藥后24、48 h和給藥后2周時(shí)才具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，推測(cè)與其藥物代謝有關(guān)［7］，隨著尼群地平血藥濃度逐漸降低，其對(duì)去甲腎上腺素拮抗效應(yīng)也逐漸降低。這一推測(cè)在關(guān)節(jié)滑液鈣離子濃度測(cè)定中進(jìn)一步被證實(shí)，給藥后，A組實(shí)驗(yàn)側(cè)與對(duì)照側(cè)相比，鈣離子濃度明顯降低，而B組實(shí)驗(yàn)側(cè)與對(duì)照側(cè)相比，鈣離子濃度下降不明顯。從而表明去甲腎上腺素對(duì)髖關(guān)節(jié)血流及壓力的影響可能是通過調(diào)節(jié)鈣通道，使Ca2+內(nèi)流增加和細(xì)胞內(nèi)鈣池釋放引起〔Ca2+〕i增加有關(guān)。

總之，本實(shí)驗(yàn)研究表明去甲腎上腺素可能在一過性髖關(guān)節(jié)滑膜炎中通過調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度而影響關(guān)節(jié)內(nèi)壓。

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