早期肝硬化患者口服四聯(lián)活菌片對(duì)血漿細(xì)胞因子和腸道菌群的影響

陳世川

(海口市秀英區(qū)永興中心衛(wèi)院消化內(nèi)科，海南 ?？?571152)

肝炎后肝硬化患者均有不同程度的腸道菌群失調(diào)，特別是厭氧雙歧桿菌、真桿菌以及需氧腸桿菌、酵母樣真菌的數(shù)量發(fā)生改變。研究發(fā)現(xiàn)微生態(tài)制劑具有營(yíng)養(yǎng)和改善肝臟、腸道功能、增強(qiáng)免疫作用，對(duì)肝硬化有輔助治療作用〔1〕。本文對(duì)早期肝硬化患者在保肝常規(guī)治療的基礎(chǔ)上加用四聯(lián)活菌片(思連康)進(jìn)行治療，觀察治療前后患者血漿細(xì)胞因子和腸道菌群的變化。

1 資料與方法

1.1 研究對(duì)象 選擇2008年1月至2009年12月在我院消化內(nèi)科住院治療，經(jīng)B超或CT證實(shí)的早期肝硬化患者90例，排除肝癌、感染及其他重要器官衰竭的患者;排除在治療中應(yīng)用廣譜抗菌藥物而影響腸道菌群者。男64例，女36例;年齡38～75〔平均(49.5±8.5)〕歲。隨機(jī)將患者分為治療組和對(duì)照組，每組45例。兩組患者在年齡、性別及肝功能等方面無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)，具有可比性。

1.2 治療方法 對(duì)照組給予肝硬化常規(guī)治療，治療組在此基礎(chǔ)上加服四聯(lián)活菌片(思連康，主要成分:嗜酸乳桿菌、嬰兒雙歧桿菌、蠟樣芽胞桿菌、腸球菌，杭州龍達(dá)新科生物制藥有限公司，規(guī)格1.0 g)，1.0 g/次，3次/d口服，療程均為21 d。兩組分別在治療前后進(jìn)行血漿細(xì)胞因子和腸道菌群的檢測(cè)。

1.3 檢測(cè)方法

1.3.1 血漿細(xì)胞因子檢測(cè) 采用酶聯(lián)免疫法定量測(cè)定血漿白細(xì)胞介素1β(IL-1β)、IL-8的水平。試劑盒購(gòu)自解放軍總醫(yī)院科技開(kāi)發(fā)中心放免所。嚴(yán)格按試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行操作。

1.3.2 腸道菌群的檢測(cè) 取新鮮糞便0.5 g加入4.5 ml 0.9%無(wú)菌氯化鈉溶液中，按10倍連續(xù)稀釋法稀釋至10－9。分別取 10－9、10－7、10－5、10－3、10－1稀釋液 50 μl，依次接種在選擇性培養(yǎng)基上。選擇腸道菌群中具有代表性的厭氧菌3種(擬桿菌、雙歧桿菌、乳酸桿菌)和需氧菌2種(腸桿菌、腸球菌)及酵母樣真菌。厭氧菌采用抽氣換氣培養(yǎng)法培養(yǎng)48 h，需氧菌置35℃孵箱培養(yǎng)24 h，酵母樣真菌置35℃孵箱培養(yǎng)48～72 h。使用ATB半自動(dòng)微生物鑒定系統(tǒng)(法國(guó)生物梅里埃公司)進(jìn)行細(xì)菌鑒定。結(jié)果以糞便每克濕重中菌落形成單位的對(duì)數(shù)值表示(lg cfu/g)〔2〕。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS14.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析，計(jì)量數(shù)據(jù)用x±s表示，采用t檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者治療前后血漿細(xì)胞因子的變化 兩組患者治療前血漿IL-1β和IL-8水平比較無(wú)顯著差異(P＞0.05)。對(duì)照組患者治療前后血漿IL-1β和IL-8水平無(wú)明顯變化(P＞0.05)，治療組患者治療后血漿IL-1β和IL-8水平均較治療前明顯下降(P＜0.05)。見(jiàn)表1。

2.2 兩組患者治療前后腸道菌群的變化 兩組患者治療前腸道菌群比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。治療組治療后雙歧桿菌和乳酸桿菌的菌落數(shù)量較治療前明顯增加，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);酵母樣真菌菌落數(shù)較治療前顯著降低，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。腸球菌和擬桿菌、腸桿菌的菌落數(shù)均有不同程度的增加，但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。見(jiàn)表2。

表1 兩組患者治療前后血漿細(xì)胞因子的變化(x±s)

表2 兩組患者治療前后腸道菌群變化(x ± s，lg cfu/g)

3 討論

肝硬化患者通常存在不同程度的腸道菌群失衡，表現(xiàn)為厭氧的雙歧桿菌減少，而需氧的腸球菌、腸桿菌顯著增多。文獻(xiàn)表明肝硬化患者腸道菌群的變化可能與腸蠕動(dòng)減慢、延遲，微絨毛損害，腸道清除能力降低，提供過(guò)路菌接觸、黏附黏膜的機(jī)會(huì)，消化道運(yùn)動(dòng)減弱，消化道對(duì)細(xì)菌的機(jī)械排空作用減弱有關(guān)?？贵w、溶菌酶、酸堿分泌減少有利于細(xì)菌生長(zhǎng)，腸腔內(nèi)pH上升，腸壁局部抵抗力下降，使細(xì)菌生長(zhǎng)受到變化?？诜嫔?，對(duì)于恢復(fù)正常的腸道菌群具有重要意義。

四聯(lián)活菌片是一種四聯(lián)活菌，主要成分為嗜酸乳桿菌、嬰兒雙歧桿菌、蠟樣芽孢桿菌、腸球菌，其中各菌種數(shù)量均不低于0.5×106cfu。雙歧桿菌、乳酸桿菌及腸球菌是人類腸道內(nèi)主要益生菌，這些細(xì)菌可為機(jī)體提供維生素及多種微量元素，通過(guò)影響蛋白質(zhì)、糖和脂肪代謝，促進(jìn)機(jī)體對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收利用〔3〕。雙歧桿菌及乳酸桿菌能增強(qiáng)機(jī)體的非特異與特異免疫功能，在腸道中對(duì)病原微生物產(chǎn)生營(yíng)養(yǎng)競(jìng)爭(zhēng)及生物化學(xué)抑制作用，阻止致病菌的定植和入侵，抑制致病菌的生長(zhǎng)繁殖，促進(jìn)腸道正常菌群恢復(fù)，從而恢復(fù)正常胃腸運(yùn)動(dòng)及減少胃腸癥狀。肝硬化患者由于腸蠕動(dòng)減慢，分泌減少，腸道清除能力降低，使腸道成為潛在致病菌的良好生存場(chǎng)所〔4〕。本研究結(jié)果顯示兩組患者治療前腸道菌群比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。治療組雙歧桿菌和乳酸桿菌的菌落數(shù)量較治療前明顯增加;酵母樣真菌菌落數(shù)較治療前顯著降低;腸球菌和擬桿菌、腸桿菌的菌落數(shù)雖有不同程度的增加，但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，表明口服四聯(lián)活菌片能調(diào)節(jié)腸道菌群，抑制腸道有害菌的過(guò)度繁殖，使腸道有益菌迅速增加，維持腸道微生態(tài)平衡。

肝硬化患者釋放細(xì)胞因子構(gòu)成一個(gè)獨(dú)特的網(wǎng)絡(luò)系統(tǒng)，能夠參與肝組織的損傷。炎癥因子的產(chǎn)生和增加，導(dǎo)致肝硬化患者凝血系統(tǒng)功能紊亂，誘發(fā)或加重肝性腦病。肝硬化失代償可激活巨噬細(xì)胞釋放各種生物活性因子〔5〕。IL-1β和IL-8是具有炎癥介導(dǎo)活性的細(xì)胞因子，IL-1β的過(guò)度表達(dá)是引起肝損傷的重要因素之一，在許多方面與腫瘤壞死因子(TNF)具有相似的生物功能，通過(guò)與TNF產(chǎn)生協(xié)同作用，提高機(jī)體對(duì)TNF的敏感性;同時(shí)高濃度的IL-1β也能誘導(dǎo)肝臟合成急性期蛋白，引發(fā)代謝性消耗;IL-1β也可使T輔助細(xì)胞分泌IL-2，進(jìn)一步促進(jìn)B細(xì)胞與T細(xì)胞增殖分化，加重?fù)p傷過(guò)程。T細(xì)胞活化因子及肝細(xì)胞刺激因子，可產(chǎn)生大量免疫球蛋白，誘導(dǎo)分泌型IL-2受體(sIL-2R)表達(dá)，促進(jìn)急性期蛋白合成，加重肝細(xì)胞壞死。IL-8是一種小分子量活性多肽，有較強(qiáng)的趨化和激活中性粒細(xì)胞的作用。本研究?jī)山M患者治療前血漿IL-1β和IL-8水平比較差異不顯著，對(duì)照組患者治療前后血漿IL-1β和IL-8水平無(wú)明顯變化，治療組患者治療后血漿IL-1β和IL-8水平均較治療前明顯下降。四聯(lián)活菌片能顯著降低血漿IL-1β和IL-8含量，減弱對(duì)肝組織中吞噬細(xì)胞的刺激從而對(duì)損傷肝臟起到保護(hù)作用。

綜上所述，口服四聯(lián)活菌片能降低血漿IL-1β、IL-8水平，調(diào)節(jié)腸道菌群失調(diào)，從而減少對(duì)肝組織的損傷，對(duì)早期肝硬化有一定的輔助治療作用。

1 陳曉文，朱德新，張洪欽.思連康對(duì)肝硬化患者腸道菌群及血漿內(nèi)毒素的影響〔J〕.實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志，2008;24(4):642-3.

2 景麗榮，張洪濤，李 琳.雙歧桿菌四聯(lián)活菌片治療肝硬化并自發(fā)性腹膜炎51例療效觀察〔J〕.中國(guó)煤炭工業(yè)醫(yī)學(xué)雜志，2009;12(10):1545.

3 李瑞軍，楊昭徐.微生態(tài)制劑在消化系統(tǒng)疾病中的應(yīng)用進(jìn)展〔J〕.中國(guó)新藥雜志，2003;12(6):416-9.

4 張東紳，黃志華，陳 如.肝硬化患者口服培菲康和媽咪愛(ài)對(duì)腸道菌群影響的研究〔J〕.中國(guó)微生態(tài)學(xué)雜志，2004;16(2):109-10.

5 吳靜黎，溫帆淵，朱瑞芳，等.肝硬化患者血清內(nèi)毒素、TNF-α、IL-6檢測(cè)的臨床意義〔J〕.現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生，2004;20(8):602-3.