老年2型糖尿病患者細(xì)胞免疫狀態(tài)及T細(xì)胞亞群的觀察

符琳琳 張消克

(首都醫(yī)科大學(xué)附屬復(fù)興醫(yī)院干部病房，北京 100038)

臨床研究發(fā)現(xiàn)2型糖尿病病人T細(xì)胞亞群明顯異常，表明患者細(xì)胞免疫功能的異常，這可能是2型糖尿病患者易發(fā)生感染而又不易治愈的原因之一〔1〕。

1 對(duì)象與方法

1.1 對(duì)象 2型糖尿病組為我院住院患者40例，其入選標(biāo)準(zhǔn)為:①符合1997年WHO建議的糖尿病診斷及分型標(biāo)準(zhǔn)的2型糖尿病患者;②年齡＞60歲;③排除自身免疫系統(tǒng)疾病，惡性腫瘤、嚴(yán)重的肝腎功能不全、各種形式的感染及血液病、近期應(yīng)用免疫制劑等。糖耐量異常組為我院住院患者35例，其入選標(biāo)準(zhǔn)為:①符合1997年WHO建議的糖尿病診斷及分型標(biāo)準(zhǔn)的2型糖尿病患者;②年齡＞60歲;③排除自身免疫系統(tǒng)疾病，惡性腫瘤、嚴(yán)重的肝腎功能不全、各種形式的感染及血液病、近期應(yīng)用免疫制劑等。非糖耐量異常組:為我院住院患者32例，①空腹和餐后2 h血糖(FPG，2 h PG)正常。②年齡＞60歲;③排除自身免疫系統(tǒng)疾病，惡性腫瘤、嚴(yán)重的肝腎功能不全、各種形式的感染及血液病、近期應(yīng)用免疫制劑等。各組研究對(duì)象的一般資料見表1。

1.2 方法 受試者均隔夜空腹10 h，于次晨來院采集肘正中靜脈血，立即分送檢測(cè) T細(xì)胞亞群、FPG及糖化血紅蛋白(HbA1c)。計(jì)算體質(zhì)量指數(shù)(BMI)。T細(xì)胞亞群用流式細(xì)胞儀單克隆免疫熒光法測(cè)定，采用FACSVantage型流式細(xì)胞儀，試劑用美國(guó)BD公司，鼠抗人 CD4-FITC、CD8-PE、CD3-PE-CY5單克隆抗體。其他檢測(cè)指標(biāo):空腹血糖采用全自動(dòng)生化分析儀進(jìn)行分析，HbA1c用氧化酶法，試劑盒采用北京原子高科技股份有限公司的產(chǎn)品，批內(nèi)變異系數(shù)＜10%，批間變異系數(shù)＜15%。1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用SPSS16.0軟件，正態(tài)分布數(shù)據(jù)兩組以上的均數(shù)比較用方差分析。非正態(tài)分布數(shù)據(jù)采用非參數(shù)檢驗(yàn)。分類變量組間率的比較用χ2檢驗(yàn)，多個(gè)樣本率兩兩比較用χ2分割法。

2 結(jié)果

糖尿病組CD3+、CD4+較糖耐量異常組及非糖耐量異常組顯著降低，有顯著差異(P＜0.01)，糖耐量異常組較非糖耐量異常組CD3+、CD4+降低，有顯著差異(P＜0.01)。糖尿病組及糖耐量異常組CD8+較非糖耐量異常組降低，有顯著差異(P＜0.05)。非糖耐量異常組 CD4+/CD8+較其他兩組明顯增高(P＜0.01)。見表2。

表1 各組研究對(duì)象的一般資料(x±s)

表2 各組之間T細(xì)胞亞群的關(guān)系

3 討論

淋巴細(xì)胞包括參與細(xì)胞免疫的T淋巴細(xì)胞(CD3+)和主要參與體液免疫的B淋巴細(xì)胞(CD19+)。T淋巴細(xì)胞是人體重要的免疫細(xì)胞群〔2〕，而T淋巴細(xì)胞又分為輔助性T淋巴細(xì)胞(CD3+CD4+)和抑制性/細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞(CD3+CD8+)。CD4+T細(xì)胞可分為Th1和Th2細(xì)胞，Th1細(xì)胞在正常情況下主要介導(dǎo)與細(xì)胞毒和局部反應(yīng)有關(guān)的免疫應(yīng)答;Th2可刺激B細(xì)胞的增生并產(chǎn)生抗體，與體液免疫有關(guān)。且CD4+T細(xì)胞可產(chǎn)生多種細(xì)胞因子。調(diào)節(jié)機(jī)體免疫應(yīng)答。CD8+T細(xì)胞包括殺傷性T細(xì)胞(CTL)和抑制性T細(xì)胞(Ts)，CTL可分泌穿孔素、釋放多種絲氨酸酯酶(可活化穿孔素)、分泌淋巴毒素等，和抗原結(jié)合誘導(dǎo)靶細(xì)胞的凋亡。各群淋巴細(xì)胞的數(shù)目和相對(duì)比例都在一定的范圍內(nèi)。

T淋巴細(xì)胞亞群變化的臨床意義:CD4+和CD8+細(xì)胞的比值(常用的正常參考值為1.4～2.5)＞2.5表明細(xì)胞免疫功能處于“過度活躍”狀態(tài)，容易出現(xiàn)自體免疫反應(yīng);比值＜1.4一般被稱為“免疫抑制”狀態(tài)，常見于①免疫缺陷病，如獲得性免疫缺陷病，②惡性腫瘤，③再生障礙性貧血、白血病，④某些病毒細(xì)菌感染，⑤自體免疫性疾病的活動(dòng)期。

高血糖及酮癥酸中毒的狀態(tài)可使體內(nèi)前炎癥因子及CD4+及CD8+活化，高血糖及自由脂肪酸水平升高提供了機(jī)體氧化的環(huán)境及激活炎癥反應(yīng)的途徑〔3〕，使感染易發(fā)生且不易治愈。高血糖狀態(tài)及細(xì)胞膜糖基化終末產(chǎn)物導(dǎo)致糖尿病病人粒細(xì)胞功能受損和T細(xì)胞對(duì)絲裂素反應(yīng)減低。有研究發(fā)現(xiàn):2型糖尿病病人外周血單個(gè)核細(xì)胞對(duì)植物血凝集和其他絲裂原的反應(yīng)增殖能力比正常對(duì)照組明顯減低，說明存在細(xì)胞介導(dǎo)的免疫功能損傷。糖基化終末產(chǎn)物及T細(xì)胞表面糖化終末產(chǎn)物可影響機(jī)體的免疫功能及炎癥反應(yīng)過程，使機(jī)體抵抗力下降，易導(dǎo)致感染的發(fā)生及感染發(fā)生后不易治愈。

CD4/CD8比值降低也是某些疾病(如乙肝)嚴(yán)重程度和預(yù)后不良的重要標(biāo)志〔4〕。本研究發(fā)現(xiàn)T細(xì)胞亞群數(shù)量和各亞群之間的比例和病人的血糖水平明顯相關(guān)。非糖耐量異常組、糖耐量異常組、糖尿病組的CD4/CD8比值順序降低。CD4+T細(xì)胞減少，細(xì)胞因子如IL-2等減少，協(xié)助B細(xì)胞產(chǎn)生抗體減少，同時(shí)，CD8+T相對(duì)增多，對(duì)CD4+T細(xì)胞的抑制作用增強(qiáng)，抑制機(jī)體的免疫功能，導(dǎo)致機(jī)體容易并發(fā)感染，且由于免疫功能的異常使得感染不易治愈。

1 樊建開，徐兆東，蔡惠群，等.糖尿病肢端壞疽患者T細(xì)胞亞群的變化與臨床意義〔J〕.中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合外科雜志，2003;9(1):12-4.

2 Tanaka S，Isoda F，Ishihara Y，et al.T lymphopenia in relation to body mass idex and TNF-αin human obesity adequate weight reduction can be corrective〔J〕.Clin Endocrinol(Oxf)，2001;54(3):347-54.

3 Stentz FB，Kitabchi AE.Activated T lymphocytes in type 2 diabetes implications from in vitro studies〔J〕.Curr Drug Targets，2003;4(6):493-503.

4 王秀敏，付春彬，董洪林.外周血T淋巴細(xì)胞亞群及血清Sil-2R檢測(cè)在慢性乙型肝炎病人中的意義〔J〕.中國(guó)老年學(xué)雜志，1997;2(1);22.