健脾補(bǔ)腎方對(duì)卵巢早衰患者內(nèi)分泌及免疫功能的影響

李秀華

(三峽大學(xué)仁和醫(yī)院，湖北 宜昌 443001)

卵巢早衰(POF)是指婦女在40歲以前的絕經(jīng)，伴血清促性腺激素水平升高和雌激素(E2)水平下降，臨床上伴有潮熱多汗、情緒不穩(wěn)、性欲低下等一系列絕經(jīng)期表現(xiàn)，發(fā)生率約有1%～3%，嚴(yán)重影響著婦女的生活質(zhì)量。本研究通過(guò)檢測(cè)性激素及外周血T淋巴細(xì)胞亞群分布，了解POF患者內(nèi)分泌的改變及免疫細(xì)胞亞群分布狀態(tài)，探討健脾補(bǔ)腎方對(duì)POF婦女內(nèi)分泌及免疫系統(tǒng)的作用。

1 材料與方法

1.1 檢測(cè)對(duì)象 選自2009年1月至2010年1月在我院婦科內(nèi)分泌門(mén)診就診的 POF患者 30例，年齡 23～39〔平均(33.33±5.37)〕歲，符合POF診斷標(biāo)準(zhǔn):40歲前卵巢功能衰竭，伴或不伴絕經(jīng)期癥狀，所有病例繼發(fā)閉經(jīng)半年以上;無(wú)高催乳素血癥，卵泡刺激素(FSH)＞40 IU/L或促黃體生成激素(LH)＞30 IU/L，雌激素(E2)＜25 pg/ml，即認(rèn)為無(wú)卵泡發(fā)育，卵巢功能衰竭。另選擇正常生育期婦女30例對(duì)照，兩組婦女?huà)D科檢查子宮附件完整，排除其他器質(zhì)性病變，檢測(cè)前3個(gè)月無(wú)服藥史。

1.2 儀器與試劑 流式細(xì)胞儀(FCM)由美國(guó)Beckman Coulter公司提供，型號(hào)為EPICS;磁性酶儀由瑞士Serono公司提供;熒光標(biāo)記單克隆抗體試劑均來(lái)自于法國(guó)Immunotech公司。

1.3 試驗(yàn)方法 試驗(yàn)前，所有觀察對(duì)象均禁食12 h以上，2 w內(nèi)不吸煙、不飲酒，以上午8～10時(shí)抽取靜脈血6 ml，2 h內(nèi)分離血清，－20℃冰存，集中檢測(cè)。①FCM檢測(cè)并分析CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+等相關(guān)免疫細(xì)胞學(xué)指標(biāo);②雌性勻相酶免法(HEI)檢測(cè)60例婦女的血清中6項(xiàng)性激素:FSH、LH、E2、睪酮(T)、孕酮(P)、催乳激素(PRL)的水平;③試驗(yàn)組30例進(jìn)行健脾補(bǔ)腎方治療，健脾補(bǔ)腎方由:黨參15 g，白術(shù)15 g，枸杞 15 g，白芍 15 g，山藥 15 g，茯苓 10 g，陳皮 10 g，巴戟天10 g，菟絲子 10 g，柴胡 10 g，當(dāng)歸 10 g，熟地 10 g，紫河車(chē) 10 g，甘草10 g，此方以參苓白術(shù)散加減，主要從健脾補(bǔ)腎著手，用水煎服，1劑/d，共6個(gè)月。6個(gè)月后對(duì)患者再次采血進(jìn)行上述指標(biāo)檢測(cè)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS11.5統(tǒng)計(jì)軟件，數(shù)據(jù)用x±s表示，統(tǒng)計(jì)處理用方差分析(ANOVA)和t檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 兩組性激素水平比較 POF患者，F(xiàn)SH、LH增加，E2、P下降(均P＜0.01)，PRL、T仍保持有一定的有效濃度。POF患者經(jīng)過(guò)6個(gè)月的中藥治療，F(xiàn)SH、LH明顯下降，E2、P明顯增加，PRL、T無(wú)明顯改變。見(jiàn)表1。POF患者經(jīng)過(guò)6個(gè)月的中藥治療，F(xiàn)SH、LH 明顯下降，E2、P 明顯增加，PRL、T 無(wú)明顯改變。

2.2 外周血T淋巴細(xì)胞亞群的比較 POF患者存在免疫異常，不僅與淋巴細(xì)胞的相對(duì)數(shù)目有關(guān)，還與其比例失衡有關(guān)。CD4+明顯下降，CD8+明顯增加，CD4+/CD8+下降。POF患者經(jīng)過(guò)6個(gè)月的中藥治療，CD4+、CD4+/CD8+明顯增加，免疫功能增強(qiáng)，以體液免疫增強(qiáng)為主。見(jiàn)表2。POF患者經(jīng)過(guò)6個(gè)月的中藥治療，CD4+、CD4+/CD8+明顯增加，免疫功能增強(qiáng)，以體液免疫增強(qiáng)為主。

表1 治療前兩組性激素水平比較(x ± s，n=30)

表2 治療前兩組外周血T淋巴細(xì)胞亞群的比較(x±s)

3 討論

3.1 POF與免疫 POF，定義為40歲前由于卵巢內(nèi)卵泡耗竭或醫(yī)源性損傷導(dǎo)致卵巢功能衰竭。病因可因遺傳因素、自身免疫性疾病、醫(yī)源性損傷或特發(fā)性原因引起。以低E2及高促性腺激素水平為特征，表現(xiàn)為繼發(fā)性閉經(jīng)，常伴有圍絕經(jīng)期癥狀〔1〕，診斷以至少半年或以上閉經(jīng)多次發(fā)生、排除其他原因?yàn)榛A(chǔ)。

機(jī)體維持正常的免疫功能狀態(tài)，有賴(lài)于各種免疫細(xì)胞，特別是各類(lèi)T細(xì)胞亞群之間的相互協(xié)作或相互制約，以產(chǎn)生適度的免疫應(yīng)答，使之既能清除異物抗原，又不致?lián)p傷機(jī)體自身組織。研究表明〔2〕免疫系統(tǒng)直接或間接地參與卵泡的發(fā)育與閉鎖過(guò)程，影響卵巢的功能。T淋巴細(xì)胞占外周血淋巴細(xì)胞總數(shù)的60%左右，當(dāng)感染、藥物、理化等因素的作用打破抑制性T淋巴細(xì)胞(CD8+)與輔助性T淋巴細(xì)胞(CD4+)的生理平衡，則將導(dǎo)致自身免疫病。Chernyshov等〔3〕測(cè)定早期(閉經(jīng)時(shí)間＜2年，沒(méi)有典型閉經(jīng)癥狀)POF患者外周血淋巴細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)CD3+、CD9+、CD3+/CD8+淋巴細(xì)胞水平都下降，說(shuō)明POF患者T細(xì)胞群可能會(huì)發(fā)生改變。POF患者外周血CD8+T細(xì)胞明顯升高，CD4+/CD8+T細(xì)胞的比值下降，與血清E2水平相關(guān)，用健脾補(bǔ)腎方治療后，外周血CD8+T細(xì)胞下降，CD4+/CD8+T細(xì)胞比值部分恢復(fù)。POF患者與正常婦女CD4+細(xì)胞亞群百分比比較，明顯低下，同時(shí)CD8+細(xì)胞亞群明顯增高。說(shuō)明POF閉經(jīng)的原因，并不單純由年齡增長(zhǎng)引起，可能有細(xì)胞免疫的變化，發(fā)生自身免疫性卵巢炎。而CD8+淋巴細(xì)胞亞群的升高，可能是卵巢功能衰退閉經(jīng)時(shí)自身免疫性卵巢炎在外周血的反映。

3.2 組方分析 POF在中醫(yī)學(xué)上屬于月經(jīng)過(guò)少，閉經(jīng)，不孕等范疇。由于精神緊張，加上先天不足或后天調(diào)理失常，致肝腎不足、沖任為病，提前出現(xiàn)任脈虛，太沖脈衰少，天癸竭的病理現(xiàn)象，故形壞而無(wú)子〔4〕。POF的病機(jī)，主要為脾腎虧虛，故健脾、補(bǔ)腎并用是本癥治療大法，故自擬健脾補(bǔ)腎方。本方由參苓白術(shù)散加減而成，首先通過(guò)調(diào)理脾胃的功能，使脾胃之氣健旺，水谷精微得以運(yùn)化，資生氣血，使正氣得運(yùn)，陰血得復(fù)。輔以巴戟天、菟絲子、紫河車(chē)等溫養(yǎng)肝腎，調(diào)補(bǔ)沖任，收到補(bǔ)陰益精之功;另外女人平素多由情志所傷，七情郁結(jié)，肝失條達(dá)，生化之源不足，肝體失養(yǎng)，皆可使肝氣橫逆，因此加入柴胡疏肝解郁，白芍養(yǎng)血柔肝。中醫(yī)認(rèn)為腎為先天之本，脾為后天之本。全方既溫養(yǎng)先天腎氣以生精，又培補(bǔ)后天脾胃以生血，并佐以調(diào)和血脈之品，使精充血足，沖任得養(yǎng)，疾病得愈。

3.3 療效與實(shí)驗(yàn)研究分析 在臨床應(yīng)用中，健脾補(bǔ)腎方在臨床上有明顯的療效，患者潮熱、煩躁等圍絕經(jīng)癥狀得到緩解或消失，月經(jīng)恢復(fù)來(lái)潮。結(jié)合實(shí)驗(yàn)研究，分析其作用機(jī)制為:①免疫調(diào)節(jié)作用:本研究表明健脾補(bǔ)腎方可增強(qiáng)POF患者的免疫功能，促進(jìn)機(jī)體清除“異物”，修復(fù)損傷的子宮內(nèi)膜，通過(guò)益氣，更好的改善氣虛狀態(tài)，健運(yùn)中焦，生化氣血，使五臟六腑得養(yǎng)，則機(jī)體各種病理狀態(tài)得以調(diào)節(jié)、恢復(fù)，自身調(diào)節(jié)能力提高。②改善血液循環(huán)，調(diào)節(jié)凝血與纖溶系統(tǒng)的平衡:POF患者整體存在血瘀〔5〕，健脾補(bǔ)腎方可通過(guò)養(yǎng)血活血的而修復(fù)卵巢血管內(nèi)皮損傷，加強(qiáng)血液流變性，促進(jìn)凝血消散，增加卵巢血供，使卵巢的功能恢復(fù)。③對(duì)女性?xún)?nèi)分泌功能的整體調(diào)節(jié)作用:在治療過(guò)程中，女性激素都發(fā)生了改變，不僅E2增加，而且FSH、LH也發(fā)生了變化，下丘腦-垂體-卵巢軸的整體調(diào)節(jié)功能發(fā)生了改變，使患者已早衰的卵巢恢復(fù)或部分恢復(fù)其排卵及內(nèi)分泌功能。

1 樂(lè) 杰.婦產(chǎn)科學(xué)〔M〕.第7版.北京:人民衛(wèi)生出版社，2008:310.

2 高 慧，楊 涓，夏 天，等.補(bǔ)腎調(diào)沖方對(duì)卵巢早衰大鼠卵巢相關(guān)細(xì)胞因子TNF-α、IFN-γ蛋白和基因表達(dá)的影響〔J〕.國(guó)醫(yī)論壇，2008;23(3):32-40.

3 Chernyshov VP，Radysh TV，Gura IV，et al.Immune disorders in women with premature ovarian failure in initial period〔J〕.Am J Reprod Immunol，2001;46(3):220-5.

4 杜嫦燕，柴洪佳，鄒志潔.補(bǔ)腎養(yǎng)肝湯治療卵巢早衰40例臨床觀察〔J〕.新中醫(yī)，2009;41(10):49-50.

5 董 莉，姜 琳，林曉倩，等.補(bǔ)腎活血方對(duì)早衰患者血清FSH、LH、E2及PRL的影響〔J〕.上海中醫(yī)藥雜志，2007;41(11):48-9.