MCM7及MMP-7蛋白在胃癌組織中的表達(dá)

陽誠柏，趙景志，龐 超，和志強(qiáng)，尹 磊，馮天平

(河南省軍區(qū)直屬醫(yī)院，河南鄭州450003)

胃癌是臨床常見惡性腫瘤之一，其發(fā)病率和死亡率近年來逐漸升高，且患者有年輕化趨勢(shì)。胃癌發(fā)病機(jī)制的研究是目前關(guān)注的熱點(diǎn)，但其具體機(jī)制尚未完全闡明。有關(guān)研究表明，微小染色體維持蛋白7(minichromosome maintenance protein 7，MCM7)及基質(zhì)金屬蛋白酶 －7(matrix metalloproteinases-7，MMP-7)與多種消化系統(tǒng)惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展關(guān)系密切［1－2］。作者應(yīng)用免疫組化S-P法檢測(cè)MCM7及MMP-7蛋白在胃癌組織中的表達(dá)，并探討兩者與胃癌臨床病理學(xué)特征的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇鄭州大學(xué)第二附屬醫(yī)院2008年1月至2010年12月收治的具有完整臨床資料的85例胃癌、30例癌旁不典型增生及30例正常胃黏膜組織石蠟標(biāo)本。85例胃癌患者的年齡35～65歲，中位年齡52歲;男性58例，女性27例;根據(jù)TNM分期標(biāo)準(zhǔn)，Ⅰ期18例，Ⅱ期20例，Ⅲ期30例，Ⅳ期17例;無漿膜浸潤45例，有漿膜浸潤40例;無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移42例，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移43例;高分化30例，中分化19例，低分化25例，未分化11例;取材前均未接受過抗腫瘤治療。30例癌旁不典型增生患者的年齡28～63歲，中位年齡49歲;男性18例，女性12例。30例正常胃黏膜患者的年齡20～59歲，中位年齡44歲;男性17例，女性13例。3組患者的年齡、性別構(gòu)成具有可比性(P＞0.05)。

1.2 主要試劑 兔抗人MCM7抗體、兔抗人MMP-7抗體、S-P免疫組化試劑盒及DAB顯色劑均購至福州邁新生物技術(shù)有限公司。

1.3 檢測(cè)方法 所有石蠟標(biāo)本切成4～5 μm切片。采用免疫組化S-P法檢測(cè)MCM7及MMP-7蛋白在85例宮頸鱗癌、30例癌旁不典型增生、30例正常胃黏膜組織中的表達(dá)。用已知MCM7或MMP-7蛋白陽性表達(dá)的切片作為陽性對(duì)照，以磷酸鹽緩沖液代替一抗作為陰性對(duì)照。

1.4 結(jié)果判定 MCM7蛋白陽性信號(hào)位于細(xì)胞核，MMP-7蛋白陽性信號(hào)位于細(xì)胞膜或細(xì)胞質(zhì)，兩者無染色為陰性(－)，淡黃色為(+)，黃色為(++)，棕黃色為(+++)，(+)～(+++)記為陽性。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 17.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)數(shù)資料比較采用χ2檢驗(yàn)，相關(guān)性檢驗(yàn)采用Spearman相關(guān)分析，檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。

2 結(jié)果

2.1 MCM7及MMP-7蛋白在不同胃黏膜組織中的表達(dá) MCM7蛋白在胃癌組織(82.4%)中的表達(dá)高于癌旁不典型增生組織(50.0%)和正常胃黏膜組織(43.3%)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.001，P ＜0.001)。MMP-7蛋白在胃癌組織(74.1%)中的表達(dá)高于癌旁不典型增生組織(50.0%)和正常胃黏膜組織(36.7%)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.015，P ＜0.001)。

2.2 MCM7及MMP-7蛋白的表達(dá)與各臨床病理學(xué)特征的關(guān)系 MCM7及MMP-7蛋白的表達(dá)與胃癌患者各臨床病理學(xué)特征的關(guān)系見表1。

2.3 MCM7蛋白與MMP-7蛋白的關(guān)系 胃癌組織中MCM7蛋白表達(dá)與MMP-7蛋白表達(dá)呈正相關(guān)關(guān)系(r=0.642，P ＜0.001)，見表2。

表1 MCM7及MMP-7蛋白的表達(dá)與各臨床病理學(xué)特征的關(guān)系

表2 MCM7蛋白與MMP-7蛋白的關(guān)系

3 討論

胃癌的侵襲和轉(zhuǎn)移是其預(yù)后較差的主要原因，也是胃癌患者的主要死因，而對(duì)于胃癌而言，主要表現(xiàn)為侵及漿膜層和周圍淋巴結(jié)發(fā)生轉(zhuǎn)移，因此，這兩個(gè)方面的研究對(duì)胃癌進(jìn)展機(jī)制的探討和治療方案的選擇具有重要意義［3］。

MCMs是由cdc基因編碼的一組能夠啟動(dòng)DNA復(fù)制的關(guān)鍵因子，包括MCM2～7等6個(gè)亞單位，不但參與DNA的復(fù)制和合成延伸，而且還與腫瘤細(xì)胞的增殖關(guān)系密切，其中MCM7蛋白作為家族成員之一，其表達(dá)水平能夠代表家族蛋白的水平，可用于腫瘤癌變及進(jìn)展的評(píng)估，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)其在前列腺癌、甲狀腺癌等多種腫瘤組織中存在高表達(dá)［4－5］。本文研究結(jié)果顯示:MCM7蛋白在胃癌組織中的表達(dá)高于癌旁不典型增生組織和正常胃黏膜組織，提示其在腫瘤的發(fā)生中可能起一定的作用;MCM7蛋白的表達(dá)還與TNM分期、漿膜浸潤、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)，提示其參與了胃癌的進(jìn)展，這與有關(guān)的研究一致［5－6］。

MMPs是一組鋅依賴性的內(nèi)源性蛋白水解酶，是降解細(xì)胞外基質(zhì)的主要酶類，至今已發(fā)現(xiàn)28種，該家族中MMP-7蛋白相對(duì)分子質(zhì)量最小，但其具有較廣泛的底物特異性和強(qiáng)大的基質(zhì)降解功能，且能激活MMPs的其他成員以及表皮生長因子等，進(jìn)而促進(jìn)腫瘤的生長和進(jìn)展。本研究發(fā)現(xiàn)，在胃癌組織中MMP-7蛋白呈高表達(dá)，且其在TNM分期的晚期高于早期，有漿膜浸潤組織高于無漿膜浸潤者，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者，分化程度低者高于分化程度高者，提示MMP-7參與了胃癌的發(fā)生、發(fā)展，這與有關(guān)研究一致［2，7］。

通過相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)，胃癌組織中MCM7蛋白表達(dá)與MMP-7蛋白表達(dá)呈正相關(guān)關(guān)系，提示兩者可能具有協(xié)同作用，在胃癌的癌變和進(jìn)展過程中相互影響或受同一因素的影響而表達(dá)升高，從而參與胃癌的進(jìn)展過程。

綜上所述，MCM7及MMP-7蛋白在胃癌組織中均高表達(dá)，且呈正相關(guān)關(guān)系，兩者的表達(dá)與胃癌的癌變及進(jìn)展關(guān)系密切。

［1］劉娟，殷飛，姚樹坤.細(xì)胞周期素D1、視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤樣蛋白2及微小染色體維持蛋白7在干細(xì)胞癌中的表達(dá)及對(duì)預(yù)后的意義［J］.中國病理生理雜志，2011，27(2):304 －309.

［2］譚學(xué)軍，李曉東.COX-2、MMP-7的表達(dá)與胃癌組織生物學(xué)行為的關(guān)系［J］.中國現(xiàn)代普通外科進(jìn)展，2010，13(11):858 －860.

［3］周官保，張樂鳴.基質(zhì)金屬蛋白酶及抑制劑與胃癌侵襲、轉(zhuǎn)移的關(guān)系［J］.現(xiàn)代實(shí)用醫(yī)學(xué)，2011，23(2):234 －236.

［4］史琳，張安文，羅宇，等.甲狀腺癌中MCM7和p27的表達(dá)及臨床意義［J］.實(shí)用腫瘤雜志，2011，26(4):390 －393.

［5］陳軍，曹驥，覃思繁.胃癌組織MCM7和p27蛋白表達(dá)及其臨床意義的探討［J］.中華腫瘤防治雜志，2010，17(21):1755 －1757.

［6］陳軍，曹驥，覃思繁.MCM7和Rb蛋白在胃癌中的表達(dá)及臨床意義［J］.實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志，2010，26(20):3707 －3709.

［7］李德艷，劉愛東，高峰.MMP-7和E-cad在胃癌組織中表達(dá)的臨床價(jià)值［J］.中國老年學(xué)雜志，2011，31(2):185 －186.