c-erbB-2基因在食管癌組織中的表達及其臨床意義

熊良庚 劉繼明

c-erbB-2基因表達的蛋白具有表皮生長因子受體(epidermal growth factor receptor,EGFR ) 的活性與功能。近年來的研究表明,原癌基因c-erbB-2 的激活與一系列人類惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展之間有著極為密切的關(guān)系。目前，國內(nèi)較少見到c-erbB-2基因在食管癌組織中的表達情況，鑒于此,我們應用免疫組化檢測食管癌組織中c-erbB-2基因擴增情況,并分析其與食管癌的發(fā)生、發(fā)展、分類、分級和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的關(guān)系。

1 材料與方法

1.1 臨床資料

收集我院病理科2005～2009年75例食管癌石蠟標本，男性49例,女性26例,平均年齡59歲,病變位于食管上、中、下段分別為7、48、20例。腫瘤中高分化54例，低分化21例；根據(jù)國際抗癌協(xié)會(UICC) 的TNM分期標準,T1期11例,T2期16例,T3期34例，T4期14例；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移25例，所有組織切片均經(jīng)病理檢查證實。75例標本按腫瘤中心區(qū)(A組),移行區(qū)(癌旁組織距腫瘤邊緣0.5～1 cm,B組)和正常黏膜區(qū)(C組)取材。石蠟樣本4 μm 厚連續(xù)切片,免疫組織化學染色。

1.2 染色方法

免疫組化染色采用S-P 法，即用羊抗人c-erbB-2單克隆抗體,S-P 免疫組化染色超敏試劑盒,EDTA 抗原修復緩沖液,DAB 顯色劑等均購自福州邁新生物技術(shù)開發(fā)有限公司,免疫組化S-P 法染色步驟按說明書嚴格操作。用2×標準枸櫞酸鹽緩沖液( SSC)代替探針雜交液作為陰性對照。

1.3 結(jié)果判定

c-erbB-2定位于胞質(zhì)、胞膜。﹥10%的病變細胞的胞質(zhì)、胞膜出現(xiàn)明顯棕黃色顆粒者判為陽性。

1.4 統(tǒng)計學處理

采用SPSS統(tǒng)計軟件包的χ2檢驗、Fisher精確概率法進行檢驗。

2 結(jié)果

c-erbB-2基因在食管癌組織中陽性表達率高達82.7%(62 /75),而在癌旁食管組織中的陽性表達率為56.0% (42 /75),在正常食管組織中為陰性表達(0 /64),兩兩比較差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。在食管癌組織中,c-erbB-2的表達與腫瘤的惡性程度及淋巴結(jié)和遠程轉(zhuǎn)移正性相關(guān)(P<0.05 )；c-erbB-2的表達在腫瘤浸潤深度T1、T2、T3、T4間比較,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；c-erbB-2的表達在腫瘤部位、性別、年齡等臨床病理指標間的差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，見表1。

表1 c-erbB-2表達(A組)與食管癌臨床病理指標的關(guān)系(例，%)

3 討論

原癌基因c-erbB-2又稱為neu基因或HER-2基因,是人類腫瘤中發(fā)生改變頻率最高的癌基因之一,定位在17q21染色體上,編碼1種跨膜糖蛋白,稱P185[1]。該基因是受體類基因,與表皮生長因子受體(EGFR)有高度同源性,功能與EGFR相似,具有酪氨酸激酶的活性,起調(diào)節(jié)上皮細胞生長分化的信號轉(zhuǎn)換通道作用。c-erbB-2擴增后P185過表達,產(chǎn)生大量的生長因子受體,可以激活信使系統(tǒng)將外界信號傳遞到細胞內(nèi)部,促進細胞的有絲分裂,導致細胞增殖失控；其過表達與多種腫瘤的預后相關(guān)。c-erbB-2蛋白產(chǎn)物構(gòu)成“掐頭”的EG2FR,在沒有EGFR存在下,它也可以產(chǎn)生細胞增殖信號而促進細胞增殖。c-erbB-2主要通過基因擴增而被激活。

c-erbB-2基因表達的蛋白具有表皮生長因子受體(EGFR)的活性與功能。原癌基因c-erbB-2的激活與一系列人類惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展之間有著極為密切的關(guān)系。人類腫瘤細胞中c-erbB-2基因擴增與過表達,導致c-erbB-2蛋白表達水平的顯著升高,由c-erbB-2蛋白介導的信號轉(zhuǎn)導加強,從而導致細胞的生長、死亡以及分化,最終導致正常細胞的惡性轉(zhuǎn)化以及惡性腫瘤的形成。在人類腫瘤細胞中,c-erbB-2蛋白的表達水平可達正常細胞的100倍之多,特別是在乳腺癌中[2]。c-erbB-2不僅表達于乳腺癌,也廣泛存在于其他惡性腫瘤如卵巢癌、子宮內(nèi)膜癌、胃癌、食管癌、結(jié)腸癌、肺癌中[3]，文獻報道胃癌中c-erbB-2表達率為8.2%～45%[4,5],在食管癌組織中的表達尚未查到相關(guān)資料。

本研究結(jié)果顯示食管癌中心組織中c-erbB-2表達上調(diào),陽性表達率達83%,而移行區(qū)組織中表達率低(56%)，正常黏膜組織無表達,表明c-erbB-2的高表達在食管癌的發(fā)生中起了重要作用。我們的研究同時表明c-erbB-2在有淋巴結(jié)或遠處轉(zhuǎn)移的病例中表達上調(diào),與無淋巴結(jié)或遠處轉(zhuǎn)移的病例比較有顯著意義,說明c-erbB-2的高表達與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān),高分化腫瘤與中低分化腫瘤比較,差異有顯著性意義,提示c-erbB-2可能與食管癌的發(fā)展、浸潤、轉(zhuǎn)移有關(guān)。c-erbB-2高表達者,提示癌細胞分化程度低,惡性程度高,病程晚,預示著更早、更多的術(shù)后復發(fā)及較短的存活期。

本研究結(jié)果顯示，c-erbB-2在腫瘤組織中表達陽性率極高，腫瘤組織邊緣表達陽性率次之;而正常黏膜區(qū)均為陰性。提示c-erbB-2在食管癌細胞中高表達,與食管癌的發(fā)生、發(fā)展有關(guān),為食管癌的防治提供了新的靶位。

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