楊秋霞王洪芳陳 輝黃仁錄*王翠菊高 楊
(1.河北農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院,保定 071001;2.滄州職業(yè)技術(shù)學(xué)院,滄州 061001)
多糖是構(gòu)成生命的四大基本物質(zhì)之一,廣泛存在于高等植物、動(dòng)物、微生物、地衣和海藻中。具有生物活性的多糖是一種免疫調(diào)節(jié)劑,具有明顯的抗病毒、抗感染、降血糖、降膽固醇、降血脂的作用。黃芪多糖(Astragalus polysaccharides,APS)是中藥黃芪干燥根中提取的大分子多糖成分,主要成分是葡聚糖和雜多糖。研究表明:黃芪多糖具有免疫調(diào)節(jié)[1-3]、抗氧化[4-6]、抗病毒[7-8]等多種功效。其在畜禽生產(chǎn)的應(yīng)用已非鮮見(jiàn)。到目前為止,羊棲菜多糖[9-10]、玉竹多糖[11]、薯藤多糖[12]、靈芝多糖[13]、枸杞多糖[14]等多糖均被發(fā)現(xiàn)具有降血脂的功效,但黃芪多糖在脂類(lèi)代謝上的研究較少。有研究認(rèn)為黃芪多糖具有血脂調(diào)節(jié)作用,能有效地降低正常人群血液中總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)和低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)含量[15]。但是黃芪多糖對(duì)蛋雞脂肪性狀的影響未見(jiàn)報(bào)道,由此,本試驗(yàn)旨在通過(guò)在飼糧中添加不同水平的黃芪多糖,探討其對(duì)蛋雞脂肪性狀的影響,同時(shí)找出適宜添加水平,為其在蛋雞生產(chǎn)中合理應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。
黃芪多糖:山東省濟(jì)寧市生物工程有限公司生產(chǎn),批號(hào)20090416,純度74.55%,主要成分為葡聚糖和雜多糖。
試驗(yàn)選用380日齡生產(chǎn)性能相近的健康的海蘭灰蛋雞1 440只,隨機(jī)分成6組,每組4個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)60只雞。Ⅰ組為對(duì)照組,飼喂玉米-豆粕型基礎(chǔ)飼糧,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ組為試驗(yàn)組,分別飼喂在基礎(chǔ)飼糧中添加 50、100、150、200 和250 mg/kg黃芪多糖的試驗(yàn)飼糧。預(yù)試期1周,試驗(yàn)期8周?;A(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。
表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))Table 1 Composition and nutrient levels of the basal diet(air-dry basis) %
4層階梯式籠養(yǎng),自由采食和飲水,每天光照16 h。保持舍內(nèi)衛(wèi)生,定期消毒。
試驗(yàn)結(jié)束前4天,每個(gè)重復(fù)隨機(jī)抽取4枚雞蛋,標(biāo)明組號(hào),置于4℃冰箱中保存,備測(cè)。試驗(yàn)結(jié)束后,于次日早晨,每組隨機(jī)抽取4只雞空腹翅下靜脈采血,每只雞5 mL,于4℃下傾斜靜置30 min后,4℃、3 000 r/min離心10 min得血清,分裝到小離心管中,-20℃冰箱保存,待測(cè)。
1.5.1 血清指標(biāo)的測(cè)定
血清脂質(zhì)指標(biāo)采用北京北化康泰臨康試劑有限公司提供的試劑盒進(jìn)行測(cè)定。血清TC和TG的含量采用酶比色法測(cè)定;高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)的含量采用磷鎢酸 -鎂沉淀法測(cè)定;LDL-C的含量采用聚乙烯硫酸沉淀法測(cè)定。
1.5.2 蛋黃中TC含量的測(cè)定
將雞蛋煮熟,冷卻后分離蛋黃與蛋清,將蛋黃放入燒杯中搗碎、攪拌均勻。準(zhǔn)確稱(chēng)取混勻樣品1.000 0 g作為待測(cè)樣品。用甲醇-氯仿混合溶液充分研磨提取至無(wú)明顯顆粒為止,過(guò)濾至10 mL具塞刻度試管中,并補(bǔ)充稀釋至10 mL刻度處,混勻,密封,放入4℃冰箱中靜置,冷藏過(guò)夜。取試管中上清液待測(cè)TC。測(cè)定方法和試劑盒同血清中TC。
1.5.3 蛋黃中TG、LDL-C和HDL-C含量的測(cè)定
取一定的鮮蛋黃,用乙醇1∶1稀釋?zhuān)? 000 r/min離心10 min,取上清液,4℃冰箱中冷藏備用。測(cè)定方法和試劑盒同血清中TG、LDL-C和HDL-C。
試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用EXCEL進(jìn)行數(shù)據(jù)處理,SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行處理分析,數(shù)據(jù)以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示,并經(jīng)多重比較(LSD法),P<0.05為差異顯著,P<0.01為差異極顯著,P>0.05為差異不顯著。
由表2可以看出,飼糧中添加黃芪多糖可以在一定程度上提高總蛋重,但各組間差異不顯著(P>0.05),各組蛋雞產(chǎn)蛋率也均差異不顯著(P>0.05),但試驗(yàn)組蛋雞平均日采食量卻顯著降低(P<0.05);試驗(yàn)Ⅱ組和試驗(yàn)Ⅳ組蛋雞料蛋比較低,顯著低于對(duì)照組和試驗(yàn)Ⅴ組(P<0.05),但與其他組差異不顯著(P>0.05)。
表2 飼糧中添加黃芪多糖對(duì)蛋雞生產(chǎn)性能的影響Table 2 Effects of dietary APS on performance of laying hens[16]
由表3可以看出,在飼糧中添加不同水平黃芪多糖,蛋雞血清TC含量均有不同程度的降低,其中試驗(yàn)Ⅳ組變化幅度最大,下降41.45%,與對(duì)照組差異顯著(P<0.05)。各試驗(yàn)組蛋雞血清TG含量也均有不同程度的降低,其中試驗(yàn)Ⅱ組最低,顯著低于對(duì)照組和試驗(yàn)Ⅴ組(P<0.05),但與其他組差異不顯著(P>0.05)。各試驗(yàn)組蛋雞血清LDL-C和HDL-C含量均有所下降,其中試驗(yàn)Ⅳ組最低,但各組間均差異不顯著(P>0.05)。
表3 飼糧中添加黃芪多糖對(duì)蛋雞血清TC、TG、LDL-C和HDL-C含量的影響Table 3 Effects of dietary APS on the contents of TC,TG,LDL-C and HDL-C in serum of laying hens mmol/L
由表4可以看出,試驗(yàn)Ⅱ、Ⅴ、Ⅵ組蛋黃中TG含量較低,顯著低于對(duì)照組(P<0.05),但與其他組差異不顯著(P>0.05)。各試驗(yàn)組蛋黃中TC和LDL-C含量均有所降低,HDL-C含量有所提高,但均差異不顯著(P>0.05)。
多糖的降脂作用已有較多的文獻(xiàn)報(bào)道,如羊棲菜多糖[9-10]、玉竹多糖[11]、薯藤多糖[12]、靈芝多糖[13]、枸杞多糖[14]等。此外,王彥榮[15]、昭日格圖等[17]的研究表明黃芪多糖具有調(diào)節(jié)血脂的作用,能有效地降低正常人群血液中TC、TG、LDL-C含量。本研究結(jié)果表明在飼糧中添加不同水平的黃芪多糖可以不同程度地降低蛋雞血清中TC、TG和LDL-C含量,提示黃芪多糖具有調(diào)節(jié)血脂的作用,與以上報(bào)道結(jié)果基本一致。其作用機(jī)制可能是:1)由于黃芪多糖本身相對(duì)分子質(zhì)量較大,一般不能被吸收,同時(shí)具有較高的黏度,可在腸道保持一定的體積,促進(jìn)腸蠕動(dòng),引起排便,因而能減少食物中膽固醇的吸收;2)其在小腸表面形成一種高黏性液體,將食物包被起來(lái),對(duì)腸道的消化酶形成一道屏障;3)水溶性纖維被腸道細(xì)菌水解后,在腸道中形成乙酸鹽、丙酸鹽,可經(jīng)門(mén)靜脈吸收,并刺激肝臟的糖酵解、抑制糖異生;4)減少胃腸肽的分泌,減輕胰島β細(xì)胞的負(fù)擔(dān),增強(qiáng)胰島素與其受體結(jié)合的能力,增加組織對(duì)胰島素的敏感性,減輕胰島素抵抗[18]。
表4 飼糧中添加黃芪多糖對(duì)蛋黃中TC、TG、LDL-C和HDL-C含量的影響Table 4 Effects of dietary APS on the contents of TC,TG,LDL-C and HDL-C in yolk mmol/L
另外,細(xì)胞膽固醇與三磷酸結(jié)合核腺苷轉(zhuǎn)運(yùn)體 A1(ATP binding cassette transporterA1,ABCA1)密切相關(guān)。ABCA1是一種整合膜蛋白,它以ATP為能源,促進(jìn)細(xì)胞內(nèi)游離膽固醇和磷脂的流出,在膽固醇逆轉(zhuǎn)運(yùn)和高密度脂蛋白(HDL)生成的起始步驟中起重要作用。ABCA1功能障礙將導(dǎo)致巨噬細(xì)胞內(nèi)大量的膽固醇沉積而成為泡沫細(xì)胞,繼而浸潤(rùn)血管壁,導(dǎo)致動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生和發(fā)展[19-21]。楊志紅等[22]的黃芪多糖對(duì) THP-1巨噬細(xì)胞源性泡沫細(xì)胞膽固醇流出的試驗(yàn)研究表明,黃芪多糖能夠通過(guò)增加ABCA1基因的表達(dá),促進(jìn)膽固醇流出,從而降低膽固醇在體內(nèi)的沉積。
膽固醇合成過(guò)程主要在肝臟中發(fā)生,然后通過(guò)低密度脂蛋白攜帶轉(zhuǎn)運(yùn)至發(fā)育中的濾泡,由受體接受再通過(guò)細(xì)胞內(nèi)吞作用而沉積。肝外脂肪組織中的膽固醇經(jīng)HDL的攜帶返回肝臟,這些膽固醇再以非酯化形式作為膽汁成分之一,或轉(zhuǎn)化為膽汁酸,或?yàn)樾枰懝檀嫉慕M織器官再利用[23]。經(jīng)轉(zhuǎn)運(yùn)后,極低密度脂蛋白(VLDL)膽固醇可較完好地到達(dá)卵巢的卵母細(xì)胞,經(jīng)過(guò)受體介質(zhì)的胞吞作用,被生長(zhǎng)中的卵母細(xì)胞吸收,形成蛋黃95%的膽固醇。蛋黃中膽固醇的含量主要決定于肝臟中脂蛋白的組成成分,而脂蛋白的組成成分與血液中TG含量有關(guān),所以血清中膽固醇含量會(huì)影響蛋黃中膽固醇的含量。
另外,本人對(duì)黃芪多糖對(duì)蛋雞生產(chǎn)性能影響的研究表明,黃芪多糖可在一定程度上提高蛋雞的生產(chǎn)性能[15],可能是由于在飼糧中添加黃芪多糖可以通過(guò)調(diào)節(jié)腸道的pH調(diào)節(jié)腸道內(nèi)消化酶活性,同時(shí)調(diào)節(jié)腸道主要菌群,以提高蛋雞對(duì)粗蛋白質(zhì)、粗脂肪的表觀消化率[24],促進(jìn)雞蛋中蛋白和蛋黃的生成,從而有利于蛋重的增加。雞為能而食,能量正常才能保證生長(zhǎng)和產(chǎn)蛋正常,如果前期能量積累不足,產(chǎn)蛋時(shí)就會(huì)動(dòng)用前期積累的能量,從而導(dǎo)致產(chǎn)蛋時(shí)間延遲,產(chǎn)蛋率低。在飼糧中添加黃芪多糖可以提高能量利用率[25],能量供應(yīng)充足才有利于產(chǎn)蛋率的增加。
本試驗(yàn)條件下,適量黃芪多糖可顯著降低蛋雞血清TC和TG含量及蛋黃中TG的含量。綜合經(jīng)濟(jì)效益分析,黃芪多糖以添加50~150 mg/kg為宜。
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