飼糧蛋白質(zhì)水平對冬毛期藍狐生長性能、營養(yǎng)物質(zhì)消化代謝及血清生化指標的影響

崔 虎張鐵濤張志強耿業(yè)業(yè)高秀華*楊福合邢秀梅

(1.中國農(nóng)業(yè)科學院飼料研究所，北京 100081;2.中國農(nóng)業(yè)科學院特產(chǎn)研究所，吉林 132109;3.吉林省特種經(jīng)濟動物分子生物學省部共建實驗室，吉林 132109)

藍狐又名北極狐，是一種珍貴的毛皮動物，其皮毛細絨厚、色澤明亮，是制作高級輕裘皮的上等原料。藍狐育成期分為育成前期和冬毛期，而冬毛期飼糧營養(yǎng)水平直接影響其皮毛質(zhì)量。目前，人工養(yǎng)殖藍狐作為一種致富手段正在我國的東北、山東和河南等地區(qū)蓬勃發(fā)展［1］。長期以來，藍狐的飼養(yǎng)模式都是以鮮料為主，且對其適宜蛋白質(zhì)水平和理想氨基酸模式的建立沒有系統(tǒng)深入的研究。由于國內(nèi)外的環(huán)境、飼養(yǎng)條件等都不相同，在這種情況下得出的NRC(1982)［2］營養(yǎng)需求標準以及國外的一些研究成果［3-8］都不一定適合我國的養(yǎng)殖模式。國內(nèi)目前的研究主要側(cè)重在蛋白質(zhì)水平對藍狐生長性能的影響方面，并沒有對氮代謝及氮污染做進一步的研究，且報道的結(jié)果［9-12］并不一致。本研究以16周齡健康雄性藍狐為研究對象，以干粉料配制的混合飼糧為試驗飼糧，研究飼糧蛋白質(zhì)水平對冬毛期藍狐生長性能、營養(yǎng)物質(zhì)消化代謝和血清生化指標的影響，以期確定既能保證不降低藍狐生長性能又能降低氮排出量的適宜飼糧蛋白質(zhì)水平，并為藍狐干粉料的合理配制提供科學的依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗設(shè)計與飼養(yǎng)管理

試驗采用單因子隨機試驗設(shè)計，試驗動物選用16周齡、平均體重為(5.71±0.60)kg的健康雄性藍狐90只，隨機分為6組，每組15個重復，每個重復1只。藍狐單籠飼養(yǎng)，各組間初始體重差異不顯著(P＞0.05)。各組藍狐分別飼喂蛋白質(zhì)水平為 24%(Ⅰ組)、26%(Ⅱ組)、28%(Ⅲ組)、30%(Ⅳ組)、32%(Ⅴ組)、34%(Ⅵ組)的試驗飼糧。預試期7 d，正試期80 d。整個試驗期內(nèi)，由固定人員進行專門飼養(yǎng)并對試驗動物進行常規(guī)免疫接種。每天07:30和15:00各飼喂1次，每天大約飼喂400 g干粉料，自由飲水。

1.2 試驗飼糧

以膨化玉米、魚粉、豆粕等為主要原料，參照國內(nèi)外的文獻報道［2，12］，設(shè)計不同蛋白質(zhì)水平的6種試驗飼糧，其組成及營養(yǎng)水平見表1。

表1 試驗飼糧組成及營養(yǎng)水平(風干基礎(chǔ))Table 1 Composition and nutrient levels of experimental diets(air-dry basis) %

1.3 消化代謝試驗

在正試期開始30 d后，每組挑選8只體重相近的健康藍狐進行消化代謝試驗。消化代謝試驗時間為2010-11-01—2010-11-03，共計4 d。采用全收糞法，消化代謝試驗期間飼養(yǎng)管理與日常飼養(yǎng)管理一致。每天收集的糞便稱重后按鮮重的5%加入10%硫酸溶液，并加少量甲苯用于防腐，保存于-20℃?zhèn)溆?。每天收集的尿液?00 mL中加入2 mL的10%硫酸溶液，并加4滴甲苯用于防腐，保存于-20℃?zhèn)溆谩?/p>

1.4 測定指標及方法

1.4.1 生長性能

分別在試驗正式開始和結(jié)束時空腹稱量每只藍狐的體重，計算凈增重和平均日增重;記錄每只藍狐每天的給料量和剩料量，計算采食量，并根據(jù)采食量和凈增重計算飼料轉(zhuǎn)化率。

1.4.2 營養(yǎng)物質(zhì)消化代謝

飼糧和糞便中的干物質(zhì)、粗蛋白質(zhì)、粗脂肪以及尿液中的粗蛋白質(zhì)含量測定參照張麗英［13］的方法。營養(yǎng)物質(zhì)消化代謝指標計算公式如下:

1.4.3 血清生化指標

在試驗結(jié)束時每組選出10只健康藍狐，心臟采血10 mL，放置于經(jīng)抗凝處理的采血管中，4℃3 000 r/min離心7 min后提取上清液，-80℃冷凍保存?zhèn)溆?。待血清樣品室溫解凍后，采用奧普森AMS-18全自動生化分析儀測定血清生化指標。血清尿素氮(UN)含量采用酶兩點動力法測定，總蛋白(TP)含量采用雙縮脲法測定，白蛋白(ALB)含量采用溴甲酚綠法測定，谷草轉(zhuǎn)氨酶(GOT)和谷丙轉(zhuǎn)氨酶(GPT)活性均采用連續(xù)監(jiān)測法測定。上述指標測定所用試劑盒均購自中生北控生物科技股份有限公司。

1.5 數(shù)據(jù)處理

用統(tǒng)計軟件SAS 9.1對數(shù)據(jù)進行分析，表中數(shù)據(jù)以平均值±標準差表示，采用單因素方差分析(One-way ANOVA)進行差異顯著性檢驗，其中P＜0.05為差異顯著，P＜0.01為差異極顯著，P＞0.05為差異不顯著。

2 結(jié)果

2.1 飼糧蛋白質(zhì)水平對冬毛期藍狐生長性能的影響

由表2可以看出，各組藍狐的初重基本一致，隨著藍狐日齡的增長，Ⅲ組的末重極顯著高于Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ和Ⅵ組(P＜0.01)，而Ⅱ、Ⅳ和Ⅴ組的末重極顯著高于Ⅰ和Ⅵ組(P＜0.01)。Ⅲ組的平均日增重極顯著高于Ⅰ、Ⅴ和Ⅵ組(P＜0.01)，但與Ⅱ和Ⅳ組差異不顯著(P＞0.05)。此外，Ⅲ組的飼料轉(zhuǎn)化率顯著高于Ⅰ、Ⅴ和Ⅵ組(P＜0.05)，但與Ⅱ和Ⅳ組差異不顯著(P＞0.05)

表2 飼糧蛋白質(zhì)水平對藍狐生長性能的影響Table 2 Effects of dietary protein level on growth performance of blue foxes

2.2 飼糧蛋白質(zhì)水平對冬毛期藍狐營養(yǎng)物質(zhì)消化率的影響

由表3可以看出，Ⅰ和Ⅱ組的干物質(zhì)采食量和排出量均極顯著高于其他各組(P＜0.01)，Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ和Ⅵ組間這2項指標無顯著差異(P＞0.05)。Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ組的干物質(zhì)消化率極顯著高于Ⅰ、Ⅴ和Ⅵ組(P＜0.01)。各組間蛋白質(zhì)消化率差異不顯著(P＞0.05)，但隨著飼糧中的蛋白質(zhì)水平的升高呈先升高后降低的趨勢。此外，脂肪消化率以Ⅲ組最高，且顯著高于其他各組(P＜0.05)。

表3 飼糧蛋白質(zhì)水平對藍狐營養(yǎng)物質(zhì)消化率的影響Table 3 Effects of dietary protein level on nutrient digestibility of blue foxes

2.3 飼糧蛋白質(zhì)水平對冬毛期藍狐氮代謝的影響

由表4可以看出，食入氮隨飼糧蛋白質(zhì)水平的升高呈先升高后降低的趨勢，在Ⅴ組取得最大值，但Ⅳ、Ⅴ和Ⅵ組間差異不顯著(P＞0.05)。糞氮排出量在各組間差異不顯著(P＞0.05)，Ⅴ和Ⅵ組的尿氮排出量差異也不顯著(P＞0.05)，但均極顯著高于Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ組(P＜0.01)。Ⅳ、Ⅴ和Ⅵ組的總氮排出量顯著高于Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ組(P＜0.05)，其他各組間差異不顯著(P＞0.05)。Ⅲ和Ⅳ組的氮沉積極顯著高于其他各組(P＜0.01)。此外，Ⅰ和Ⅱ組的凈蛋白質(zhì)利用率差異不顯著(P＞0.05)，但均極顯著高于其他各組(P＜0.01)。Ⅲ組的蛋白質(zhì)生物學價值極顯著高于Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ和Ⅵ組(P＜0.01)，Ⅱ、Ⅳ、Ⅴ和Ⅵ組間差異不顯著(P ＞0.05)。

2.4 飼糧蛋白質(zhì)水平對冬毛期藍狐血清生化指標的影響

由表5可以看出，冬毛期藍狐血清中總蛋白和白蛋白含量均以Ⅲ組最高，其中總蛋白含量顯著高于除Ⅱ組外的其他各組(P＜0.05)，而白蛋白含量僅與Ⅵ組差異顯著(P＜0.05)。血清尿素氮含量隨著飼糧蛋白質(zhì)水平的升高呈升高的趨勢，但Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ和Ⅵ組間差異不顯著(P＞0.05)。各組間血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性沒有顯著差異(P＞0.05)，而血清谷草轉(zhuǎn)氨酶活性Ⅰ組顯著低于其他各組(P ＜0.05)。

3 討論

3.1 飼糧蛋白質(zhì)水平對冬毛期藍狐生長性能的影響

關(guān)于飼糧中蛋白質(zhì)水平對冬毛期藍狐生長性能的影響前人已有過報道，國外的 Skrede［14］、Rimesl?tten 等［15］和 Dahlman 等［16］認為提高飼糧中蛋白質(zhì)水平可以提高體重的增長，國內(nèi)的靳世厚等［10］、尹清強等［11］和楊嘉實等［12］也得出相似的結(jié)論，但對達到最佳生長性能的蛋白質(zhì)水平上述研究卻并不一致。本研究中，飼糧蛋白質(zhì)水平在28%時藍狐的末重和平均日增重最好，且末重和平均日增重隨飼糧蛋白質(zhì)水平的升高呈先升高后降低趨勢，這可能是由于低蛋白質(zhì)水平飼糧的蛋白質(zhì)不能滿足藍狐的正常需要，而藍狐又難以有效利用高蛋白質(zhì)水平飼糧中的過量蛋白質(zhì)所致［17-18］。

表4 飼糧蛋白質(zhì)水平對藍狐氮代謝的影響Table 4 Effects of dietary protein level on nitrogen metabolism of blue foxes

表5 飼糧蛋白質(zhì)水平對藍狐血清生化指標的影響Table 5 Effects of dietary protein level on serum biochemical indices of blue foxes

3.2 飼糧蛋白質(zhì)水平對冬毛期藍狐營養(yǎng)物質(zhì)消化率的影響

本試驗結(jié)果表明，蛋白質(zhì)消化率隨著飼糧蛋白質(zhì)水平的升高先升高后降低，其可能主要是因為消化道對蛋白質(zhì)的消化吸收能力有限，超過某一限度后蛋白質(zhì)將不被吸收［19-20］。Skrede等［21］指出冬毛期藍狐為防寒在體內(nèi)積聚脂肪使得脂肪的消化率偏高，同時Dahlman等［22-23］也指出冬毛期藍狐體重的增加主要是因為皮下脂肪的堆積。本試驗中，飼糧蛋白質(zhì)水平為28%時藍狐的脂肪消化率較高也可能是為御寒而在皮下積聚脂肪，而高蛋白質(zhì)飼糧組的脂肪消化率稍有下降可能是由于過高的蛋白質(zhì)水平使得代謝機能紊亂，從而影響脂肪的消化吸收［24］。營養(yǎng)物質(zhì)的消化利用率是評定飼糧中營養(yǎng)物質(zhì)是否均衡的一個指標，本研究中飼糧蛋白質(zhì)水平在28%～30%時較適宜各種營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收。

3.3 飼糧蛋白質(zhì)水平對冬毛期藍狐氮代謝的影響

氮是畜禽糞便對環(huán)境造成污染的重要因素，動物即使在最佳的消化狀態(tài)下，也不能實現(xiàn)對氮的完全吸收［25］。Newell［26］在對水貂的研究中發(fā)現(xiàn)食入氮的80%通過尿氮形式排出體外。Rorz［27］指出適宜的飼糧蛋白質(zhì)水平和合理的飼糧組成可以有效地降低氮的排放量。此外，Kerr等［28］也報道在組成合理的飼糧中蛋白質(zhì)水平降低1%可以減少糞氮中8%的氮排放量。本研究結(jié)果表明，降低飼糧蛋白質(zhì)水平可以明顯減少氮的排出量，其中飼糧蛋白質(zhì)水平在24%時總氮排出量最低，但其氮沉積比較低，不能滿足藍狐自身生長的需求。由本研究結(jié)果可知，尿氮排出量隨著飼糧蛋白質(zhì)水平的升高而增加，這與Pfeiffer等［29］報道的攝入的蛋白質(zhì)和尿氮排出量呈正相關(guān)的結(jié)果一致;而飼糧蛋白質(zhì)水平對糞氮排出量沒有顯著影響，這與Mustonen等［30］得出的結(jié)論相似。在本研究中，飼糧蛋白質(zhì)水平在28%時凈蛋白質(zhì)利用率和蛋白質(zhì)生物學價值均較高，這符合營養(yǎng)物質(zhì)的消化代謝規(guī)律，即蛋白質(zhì)水平過高或過低均會影響消化系統(tǒng)的正常運行［18］。

3.4 飼糧蛋白質(zhì)水平對冬毛期藍狐血清生化指標的影響

血清總蛋白和白蛋白含量可以反映動物對蛋白質(zhì)的消化吸收程度，血清白蛋白的主要生理功能是結(jié)合和運輸內(nèi)源性與外源性物質(zhì)，維持血液膠體滲透壓，具有運輸、免疫、修補和緩沖等作用。有研究表明，從血清白蛋白含量可以看出動物攝入蛋白質(zhì)的情況，蛋白質(zhì)攝入量不足可引起白蛋白含量下降［31］。本研究中，飼糧蛋白質(zhì)水平在26%和28%時血清白蛋白和總蛋白含量較理想，低蛋白質(zhì)飼糧組藍狐可能由于長期蛋白質(zhì)攝入量不足，使得肝臟合成白蛋白量減少，而過高的蛋白質(zhì)水平可能會造成肝臟的損傷。血清尿素氮含量與動物體氮的代謝有關(guān)，李輝等［32］在試驗中得出血清尿素氮含量隨著飼糧蛋白質(zhì)水平的升高而增加，F(xiàn)igueroa等［7］也得出相似的結(jié)論。血清尿素氮含量隨著飼糧蛋白質(zhì)水平的升高呈增加的趨勢，這可能是因為高蛋白質(zhì)水平飼糧使肝、腎超負荷而導致血清尿素氮含量升高。谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶是動物體內(nèi)與蛋白質(zhì)代謝相關(guān)的重要指標，在氨合成菌體蛋白的過程中谷丙轉(zhuǎn)氨酶催化氨基與碳架結(jié)合生成氨基酸，α-谷草轉(zhuǎn)氨酶是體內(nèi)聯(lián)合脫氨基作用的關(guān)鍵酶，使天門冬氨酸及酮戊二酸轉(zhuǎn)換氨基生成谷氨酸和草酰乙酸［31］。由本研究結(jié)果可知，飼糧蛋白質(zhì)水平對谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性沒有太大的影響，但高蛋白質(zhì)飼糧組血清中谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性要比其他組高，可能是高水平蛋白質(zhì)使肝臟受損，肝細胞通透性增加，使得谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶從肝細胞中釋放到血液中。

4 結(jié)論

①冬毛期藍狐飼糧蛋白質(zhì)水平為28%時能夠獲得較好的生長性能，結(jié)合試驗期內(nèi)藍狐的采食量與飼糧中蛋白質(zhì)水平2項指標，得出冬毛期藍狐的蛋白質(zhì)需要量是120 g/d。

②當飼糧中蛋白質(zhì)水平達到28%時，冬毛期藍狐對蛋白質(zhì)的利用率較高，糞氮、尿氮的排出量較低，可以有效減少氮排放，保護環(huán)境。

③冬毛期藍狐血清中尿素氮含量隨飼糧蛋白質(zhì)水平的升高呈升高趨勢，但飼糧中過高的蛋白質(zhì)水平會傷害肝組織，使谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性升高。

［1］胡濤，王加啟，卜登攀.畜禽糞尿氮污染情況及降低污染的措施［J］.中國畜牧獸醫(yī)，2010，37(2):207-210.

［2］NRC.Nutrient requirements of mink and foxes［S］.2nd ed.Washington，D.C.:National Academy Press，1982.

［3］BOUWMAN A F.A global high-resolution emission inventory for ammonia［J］.Global Biogeochemical Cycles，1997(11):561-587.

［4］OENEMA O，TAMMING S.Nitrogen in global animal production and management options for improving nitrogen use efficiency［J］.Science in China Series C:Life Sciences，2005，48:871-887.

［5］TAMMINGA S.Pollution due to nutrient losses and its control in European animal production［J］.Livestock Production Science，2003，84:101-111.

［6］ROTZ C A.Management to reduce nitrogen losses in animal production［J］.Journal of Animal Science，2004，82:E119-E137.

［7］FIGUEROA J L，LEWI A J，MILLER P S，et al.Nitrogen metabolism and growth performance of gilts fed standard corn-soybean meal diets or low-crude protein，amino acid-supplemented diets［J］.Journal of Animal Science，2002，80:2911-2919.

［8］RUUSUNEN M，PARTANEN K，P?S? R，et al.The effect of dietary protein supply on carcass composition，size of organs，muscle properties and meat quality of pigs［J］.Livestock Science，2007，107:170-181.

［9］張海華，李光玉，劉佰陽.狐營養(yǎng)研究進展［J］.飼料工業(yè)，2009，29(13):55-58.

［10］靳世厚，楊嘉實.狐的能量、蛋白質(zhì)需要量及其飼料配制技術(shù)的綜合研究報告［J］.經(jīng)濟動物學報，1998(2):10-13.

［11］尹清強，馬振凱.育成期雄性藍狐適宜蛋白水平研究［C］//佚名.全國首屆特產(chǎn)動物營養(yǎng)學術(shù)討論會文集.［出版地不詳］:［出版者不詳］，1990.

［12］楊嘉實，張洪如，靳世厚.狐各生物學時期典型飼糧配方及營養(yǎng)水平推薦值［C］//全國首屆特產(chǎn)動物營養(yǎng)學術(shù)討論會文集.［出版地不詳］:［出版者不詳］，1990.

［13］張麗英.飼料分析及飼料質(zhì)量檢測技術(shù)［M］.2版.北京:中國農(nóng)業(yè)大學出版社，2003.

［14］SKREDE A.Utilization of fish and animal by products in mink nutrition:effect of source and level of protein on nitrogen balance，post weaning growth and characteristics of winter fur quality［J］.Acta Agriculture Scand，1978，28:105-129.

［15］RIMESL?TTEN H，TEN H.Experiments in feeding different levels of protein，fat and carbohydrates to blue foxes［C］//Proceedings of the first international scientific congress in fur animal production.［S.l.］:［s.n.］，1976.

［16］DAHLMAN T，BLOMSTEDT L.Effect of feed protein level on fur and skin of the blue fox［J］.Scientifur，2000，24:13-16.

［17］周順伍.動物生物化學［M］.北京:中國農(nóng)業(yè)出版社，1995.

［18］VERNON R，MARCHINI J S，CORTIELLA J，et al.Assessment of protein nutritional status［J］.The Journal of Nutrition，1990，120(11):1496-1502.

［19］CHEN H Y，LEWIS A J，MILLER P S，et al.The effect of excess protein on growth performance and protein metabolism of finishing barrows and gilts［J］.Journal of Animal Science，1999，77:3238-3244.

［20］JUST A.The net energy value of crude(catabolized)protein for growth in pigs［J］.Livestock Production Science，1982，9(3):349-360.

［21］SKREDE A，?YSTEIN A.Comparative nutrient digestibility in dogs，blue foxes，mink and rats［J］.The Journal of Nutrition，1998，128:2676S-2677S.

［22］DAHLMAN T，VALAJA J，NIEMEA P，et al.Influence of protein level and supplementary L-methionine and lysine on growth performance and fur quality of blue fox(Alopex lagopus)［J］.Acta Agriculture Scand，2002，52:174-182.

［23］DAHLMAN T，KIISKINEN T，MAKELA J，et al.Digestibility and nitrogen utilization of diets containing protein at different levels and supplemented with DL-methionine，L-methionine and L-lysine in blue fox(Alopex lagopus)［J］.Animal Feed Science and Technology，2002，98:221-237.

［24］DAHLMAN T，VALAJA J，JALAVA T，et al.Growth and fur characteristics of blue foxes(Alopex lagopus)fed diets with different protein levels and with or without DL-methionine supplementation in the growing-furring period［J］.Canadian Journal of Animal Science，2003，83:239-245.

［25］鄭春田，李德發(fā).豬低污染日糧技術(shù)研究進展［J］.飼料工業(yè)，2000，12:1-5.

［26］NEWELL C W.Nutrient floe and manure management in the mink industry［D］.Ph.D.thesis.Halifax，N.S.:Truro and Dalhousie University，1999.

［27］RORZ C A.Management to reduce nitrogen losses in animal production［J］.Journal of Animal Science，2004，82:119-137.

［28］KERR B J，EASTER E A.Effect of feeding reduced protein，amino acid-supplemented diets on nitrogen and energy balance in grower pigs［J］.Journal of Animal Science，1995，73:3000-3008.

［29］PFEIFFER A，HENKEL H，VERSTEGEN M A.The influence of protein intake on water balance，flow rate and apparent digestibility of nutrition at the distal ileum in growing pigs［J］.Livestock Product Science，1995，44:179-187.

［30］MUSTONEN A M，MATTIP P，TEIJA P N，et al.Adaptations to fasting in the American mink(Mustela vison):nitrogen metabolism［J］.Journal of Comparative Physiology，2005，175:357-363.

［31］楊宇衡，王之盛，蔡義民.氨化銀合歡對南江黃羊生長性能和血液指標的影響［J］.畜牧獸醫(yī)學報，2010，41(7):835-841.

［32］李輝，刁其玉，張乃鋒.不同蛋白水平對犢牛消化代謝及血清生化指標的影響［J］.中國農(nóng)業(yè)科學，2008，41(4):1219-1226.