高效液相色譜法測定呋喃西林溶液中呋喃西林含量

鄧 芳 ，萬 莉 ，崔小平

(1.重慶市涪陵區(qū)中心醫(yī)院，重慶 408000;2.重慶市萬州藥品檢驗所，重慶 404000;3.重慶三峽中心醫(yī)院，重慶 404000)

呋喃西林溶液由呋喃西林、氯化鈉等組成，為局部抗菌藥物，對多種革蘭陽性和陰性細菌有抗菌作用(低濃度呈抑制作用，高濃度呈殺菌作用)，對厭氧菌也有抑制作用，細菌對其不易產生耐藥性，多用于沖洗腔道、膀胱，沖洗和濕敷患處，以及滴耳、滴鼻、洗眼等。在原藥品標準中，其呋喃西林含量測定方法紫外-可見分光光度法，不能完全排除方中其他成分的干擾。為進一步提高制劑質量，筆者采用高效液相色譜法測定了呋喃西林溶液中呋喃西林含量，現(xiàn)報道如下。

1 儀器與試藥

LC-10ATVP型高效液相色譜儀(日本島津)，包括LC-10ATVP泵、SPD-M10AVP檢測器、CTO-10ASVP柱溫箱、SIL-HTA自動進樣器和Class-VP色譜工作站;ME 215 S型電子天平(Sartorius，Max 210 g，d=0.01 mg)。呋喃西林對照品(武漢久安藥業(yè)有限公司提供的精制原料，含量為99.82%);呋喃西林溶液(本院制劑室，批號為091109，091121，091129，規(guī)格為 0.02%);甲醇為色譜純，水為重蒸餾水，其余試劑為分析純。

2 方法與結果

2.1 色譜條件

色譜柱:Diamonsil C18柱(250 mm ×4.6 mm，5 μm);流動相:甲醇-水-三乙胺(40∶60∶0.1);流速:1.0 mL/min;檢測波長:254 nm;進樣量:20 μL。

2.2 溶液制備

精密稱取呋喃西林對照品20 mg，置100 mL量瓶中，加流動相至刻度，搖勻，作為對照品貯備液，精密吸取此液10 mL，置50 mL量瓶中，加流動相至刻度，搖勻，得對照品溶液。精密吸取本品10 mL(約相當于呋喃西林2 mg)，置50 mL量瓶中，加流動相至刻度，搖勻，即得供試品溶液。按處方比例取除呋喃西林外的其他組分，制成陰性樣品，再按供試品溶液制備法制成陰性對照品溶液。

2.3 方法學考察

系統(tǒng)適用性試驗:分別取2.2項下3種溶液各20 μL，注入液相色譜儀，記錄色譜圖(圖1)?？梢?，其他成分對呋喃西林的測定無干擾，呋喃西林的保留時間約為4.2 min，理論板數(shù)大于4 000。

圖1 高效液相色譜圖

線性關系考察:精密吸取對照品溶液 5，10，15，20，25，30，35 μL，進樣測定峰面積。以峰面積積分值(Y)對呋喃西林進樣量(X)進行線性回歸，得回歸方程 Y=3.67×106X+1.96×104，r=0.999 9(n=7)。結果表明，呋喃西林進樣量在0.2～1.4 μg范圍內與峰面積積分值線性關系良好。

精密度試驗:精密吸取對照品溶液20 μL，重復進樣6次。結果峰面積平均值為2 936 567，RSD為0.21%(n=6)，表明儀器精密度良好。

穩(wěn)定性試驗:取同一供試品溶液 20 μL，分別于 0，2，4，6，8，10，12 h時進樣，記錄色譜峰面積。結果的 RSD為0.42%(n=7)，表明供試品溶液在12 h內穩(wěn)定。

重復性試驗:取同一批號樣品，依法制備6份供試品溶液，分別測定峰面積，計算呋喃西林含量。結果平均含量(標示百分含量)為98.5%，RSD為0.45%(n=6)，表明方法重復性良好。

加樣回收試驗:精密量取已知含量的樣品6份，每份5 mL，分別精密加入對照品貯備液4.0，5.0，6.0 mL，按供試品溶液制備方法制備溶液，測定含量，計算回收率。結果見表1。

表1 加樣回收試驗結果(n=6)

2.4 樣品含量測定

取3批樣品，依法制備供試品溶液，精密量取20 μL，測定峰面積，按外標法計算含量。結果高效液相色譜法所測得含量分別為標示量的98.12%，98.53%，97.66%，紫外分光光度法所測得含量分別為標示量的98.79%，99.21%，98.29%(n=3)。

3 討論

采用甲醇-水(35∶65)系統(tǒng)[1]，呋喃西林峰雖能有效分離，但峰形較差、拖尾嚴重，加入少量三乙胺即可改善拖尾現(xiàn)象。選用本法的流動相保留時間短，峰形對稱。取樣品溶液，用二極管陣列檢測器在200～400 nm掃描，254 nm波長處呋喃西林吸光強度雖不是最大，但在此波長處雜質干擾較小，故選254 nm作為檢測波長。試驗表明，紫外光譜法測定的呋喃西林含量偏高，有可能是處方原料所含雜質有一定干擾所致，而本試驗方法靈敏度高、重現(xiàn)性好，不失為呋喃西林溶液中呋喃西林含量測定的一種好方法。

[1]毛貴福.反相高效液相色譜法測定呋喃西林溶液中2組分的含量[J].中國藥房，2005，16(8):622-623.