楊達(dá)山 張善第
全血細(xì)胞分析是臨床檢驗(yàn)中使用最為普遍的常規(guī)檢驗(yàn)項(xiàng)目之一。隨著檢測技術(shù)的不斷提高,五分類血液細(xì)胞分析儀在臨床檢驗(yàn)中的運(yùn)用日趨普及。當(dāng)前血液細(xì)胞分析儀計(jì)數(shù)結(jié)果的可信度已得到實(shí)驗(yàn)室和臨床的認(rèn)可[1],對檢測質(zhì)量的管理重點(diǎn)集中到了根據(jù)實(shí)際情況制定和落實(shí)復(fù)檢標(biāo)準(zhǔn)上。但對于一個(gè)臨床實(shí)驗(yàn)室,對其使用的檢測系統(tǒng)的正確評估,同時(shí)應(yīng)包括對不同檢測系統(tǒng)之間相關(guān)檢測結(jié)果的一致性評價(jià),這是保證檢驗(yàn)質(zhì)量,提高檢驗(yàn)水平必不可少的手段。本文對51例臨床標(biāo)本、兩種檢測方法的全血細(xì)胞檢查結(jié)果進(jìn)行回顧性分析,現(xiàn)報(bào)道如下。
1.1.1 儀器和試劑:SysmexSE-9000五分類血細(xì)胞分析儀(SYSMEX CORPORATION,KOBE,JAPAN):采用流式細(xì)胞術(shù)原理及化學(xué)染色方法分析白細(xì)胞,通過分類(DIFF)和白細(xì)胞/嗜堿性粒細(xì)胞(WBC/BASO)通道、半導(dǎo)體激光技術(shù)進(jìn)行細(xì)胞分類,采用電阻抗方法(DC)檢測紅細(xì)胞及血小板,采用SLS血紅蛋白測定法檢測Hb。儀器對異常細(xì)胞有提示功能,檢測所用試劑為上海希森美康公司提供的配套試劑。按現(xiàn)行的臨床實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理規(guī)定,采用該公司提供的校準(zhǔn)品和質(zhì)控品定期對儀器進(jìn)行校準(zhǔn),每日進(jìn)行室內(nèi)質(zhì)控,參加省衛(wèi)生廳室間質(zhì)量評價(jià)活動(dòng),保證檢測系統(tǒng)的穩(wěn)定性和準(zhǔn)確性。
1.1.2 OLIYMPUS雙筒顯微鏡:用于外周血細(xì)胞顯微鏡檢查。使用的瑞氏染液自配;自配染液的質(zhì)量通過新鮮血涂片及骨髓涂片的實(shí)際染色效果進(jìn)行評價(jià)控制。
2011年3月11日~4月10日間到我院就診,進(jìn)行過外周血細(xì)胞顯微鏡檢查的門診患者樣本。
1.3.1 外周血細(xì)胞顯微鏡檢查:嚴(yán)格按照操作規(guī)程進(jìn)行分析[2]。由我科血液細(xì)胞學(xué)檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室完成,結(jié)果經(jīng)具備資質(zhì)及充足實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)的人員審核。
1.3.2 全血細(xì)胞自動(dòng)化分析:嚴(yán)格按照檢測系統(tǒng)技術(shù)要求,使用EDTA-K2真空抗凝管采集靜脈血2ml,室溫下30分鐘內(nèi)完成檢測分析過程。檢測由我科門診化驗(yàn)室完成。
1.3.3 回顧性分析:根據(jù)樣本的患者信息標(biāo)識,選擇在同一天相近時(shí)間內(nèi)進(jìn)行全血細(xì)胞自動(dòng)化分析和外周血細(xì)胞顯微鏡檢查,棄除不合理及記錄不完整的配對資料后進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。分析的主要內(nèi)容為兩種方法的檢測結(jié)果比較,數(shù)據(jù)處理采用SPSS 10.0統(tǒng)計(jì)軟件包。
2.1 在設(shè)定的時(shí)段內(nèi),共有92例患者進(jìn)行了外周血細(xì)胞顯微鏡檢查。其中,符合樣本要求的有58例。棄除不合理配對2例,資料不全5例后,剩余的51例樣本組成分析樣本。
2.2 51例患者中,男性占30例,性別比例為1.43?;颊叩哪挲g分布見表1;其中位數(shù)為5,平均數(shù)為9.3,嬰幼兒占64.7%。
表1 51例分析樣本的年齡分布
2.3 本組樣本中,外周血細(xì)胞顯微鏡檢查(血片觀察)與全血細(xì)胞自動(dòng)化分析(血細(xì)胞分析)兩者檢測結(jié)果(包括報(bào)警提示)無明顯差異的有22例,存在明顯差異的為29例;具體見表2、表3。其中,三系無異常和貧血改變(小細(xì)胞低色素貧血或紅細(xì)胞大小不均)各占約32%、27%,發(fā)生白細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變(左移或異型淋巴細(xì)胞)的共計(jì)5例(23%)。
表2 兩種方法檢測結(jié)果無差異的分布模式
表3 兩種方法檢測結(jié)果之間主要差異的三系分布
占檢測結(jié)果不相符合情況82.8%的、發(fā)生在白細(xì)胞檢測結(jié)果上的差異主要集中為三種模式:儀器分析表現(xiàn)為單核細(xì)胞增加而鏡檢為中性粒細(xì)胞核左移或/和異型淋巴細(xì)胞(9例),儀器分析無異常提示而鏡檢檢出異型淋巴細(xì)胞、中性粒細(xì)胞核左移或單核細(xì)胞增加(9例)儀器分析提示異型淋巴細(xì)胞或原始細(xì)胞而鏡檢無異常(5例)。而對于血小板和紅細(xì)胞,其檢測結(jié)果的比較因例數(shù)少,不能得出有代表性的分析信息
2.4 進(jìn)一步比較兩種方法在白細(xì)胞分類上的差異,以51例樣本中性粒細(xì)胞和淋巴細(xì)胞的儀器分類結(jié)果與鏡檢分類結(jié)果的差值作圖,結(jié)果見圖1、圖2。(以下各圖中,橫坐標(biāo)為分類結(jié)果差值×100,縱坐標(biāo)為分布例數(shù)。)
圖1 兩種方法中性粒細(xì)胞分類結(jié)果差值分布圖
圖2 兩種方法淋巴細(xì)胞分類結(jié)果差值分布圖
全自動(dòng)血液細(xì)胞分析儀的細(xì)胞數(shù)量檢測已普遍應(yīng)用,其量值傳遞體系和質(zhì)量保證措施日益完善,檢測結(jié)果也已得到臨床的廣泛接受。與此同時(shí),臨床實(shí)驗(yàn)室逐漸產(chǎn)生了過度依賴儀器檢測結(jié)果而對其不加以必要的分析和復(fù)檢,忽略顯微鏡檢查的現(xiàn)象。
針對上述情況,近年來,儀器分析結(jié)果顯微鏡復(fù)檢制度的完善和落實(shí)受到了應(yīng)有的重視。復(fù)檢制度強(qiáng)調(diào)對儀器分析結(jié)果的全面評估,要求在有效提高工作效率的同時(shí),保證血液細(xì)胞分析檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性[3-5]。而對于與我院檢驗(yàn)科及類似同時(shí)開展血液細(xì)胞分析檢測和外周血顯微鏡檢查(血片觀察)的實(shí)驗(yàn)室,在保證結(jié)果準(zhǔn)確性的同時(shí),還應(yīng)進(jìn)一步考慮兩種檢測方法之間的一致性問題,盡可能地避免兩種方法對同一患者在相關(guān)項(xiàng)目上產(chǎn)生矛盾檢驗(yàn)結(jié)果的現(xiàn)象。
方法學(xué)的評價(jià)有較多的報(bào)道[6],本組數(shù)據(jù)中對20例同一樣本檢測結(jié)果的回顧性分析也支持在一定條件下,兩種方法之間的結(jié)果差異是可以接受的。因此,檢測樣本的因素是造成本組資料檢測結(jié)果差異的主要原因。
標(biāo)本的采集包括兩種模式,一是血液細(xì)胞分析和外周血顯微鏡檢查為同一樣本,二是血液細(xì)胞分析和外周血顯微鏡檢查分開采樣,以后者為主。在后一種情況下,外周血顯微鏡檢查標(biāo)本采集的大多為末梢血,且兩次采樣的間隔時(shí)間不等(1~6小時(shí))。采樣時(shí)間的差異、部位的不同使檢測結(jié)果的差異中混入了生理性、病理性變化的影響。
回顧性分析是實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量改進(jìn)的重要手段之一。對檢驗(yàn)結(jié)果資料的回顧性分析,較好地反映出了實(shí)驗(yàn)室常規(guī)工作狀態(tài),反映出了在檢驗(yàn)全過程中所存在的影響因素的綜合作用。對這些因素的不斷地深入、準(zhǔn)確的識別和控制,有利于實(shí)驗(yàn)室檢測質(zhì)量和服務(wù)水平的持續(xù)提高。
[1]叢玉隆,孫芾,陳寶梁.當(dāng)代血液分析技術(shù)與臨床[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,1997:40-58.
[2]葉應(yīng)嫵,王毓三,申子瑜.全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程[M].3版.南京:東南大學(xué)出版社,2006:121-137.
[3]孫芾,王厚芳,于俊峰,等.血細(xì)胞顯微鏡復(fù)檢標(biāo)準(zhǔn)的制定及臨床應(yīng)用[J].中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2005,28(2):155-157.
[4]陳宏礎(chǔ).重視血細(xì)胞分析儀檢查后的復(fù)檢工作[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床,2006,3(2):49-50.
[5]江虹,曾婷婷,曾素根,等.自動(dòng)全血細(xì)胞分析和白細(xì)胞分類復(fù)檢規(guī)則的制定及評價(jià)[J].中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2007,30(9):996-1000.
[6]楊瑾,陳雙喜重視血常規(guī)的復(fù)檢工作[J].當(dāng)代醫(yī)學(xué),2011,17(5):35-36.