肺癌患者血漿組織因子與血小板參數(shù)及其活化標志物的臨床意義

胡文健 陳秉宇 費鮮明

肺癌患者存在局部或者全身的凝血系統(tǒng)異常，體現(xiàn)為血液成高凝狀態(tài)甚至血栓形成，而包括肺癌的惡性腫瘤高凝狀態(tài)主要取決于循環(huán)中組織因子陽性的微粒[1～3]。資料表明，組織因子分泌增多、血小板增多以及血小板活化與惡性腫瘤發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移以及復(fù)發(fā)都有密切關(guān)系，但肺癌患者不同病理類型與血漿組織因子、血小板參數(shù)及其活化標志物之間有何種關(guān)系少見報道，因此，作者通過檢測肺癌患者血漿組織因子與血小板參數(shù)及其活化標志物以探討他們之間的關(guān)系[4～6]。分析報道如下。

資料與方法

1.研究對象:選擇2009年1月～2010年6月間因肺癌接受手術(shù)治療的97例患者(男性71例，女性26例，年齡46～71歲，平均59歲)，均為肺癌切除及淋巴結(jié)清掃術(shù)，并經(jīng)組織病理學(xué)確診，病理類型包括鱗癌53例，腺癌31例，腺鱗癌14例。按1997肺癌國際分期標準進行TNM分期，其中Ⅰ期27例，Ⅱa期10例，Ⅱb期19例，Ⅲa期14例，Ⅲb期9例，Ⅳ期18例，患者入院前均未接受其他相關(guān)的抗腫瘤治療。同期收集良性肺疾病患者22例(年齡44～73歲，平均55歲)，包括肺良性腫瘤10例，肺心病7例，肺氣腫5例，肺結(jié)節(jié)病1例。并按年齡、性別相匹配從健康體檢者中選擇正常對照者25例，其心、肝、肺、腎等臟器檢查均未見異常。所有研究對象在2周內(nèi)未服用過對血小板、凝血因子有影響的藥物。

2.研究方法:所有病例均在入院后首次用藥前使用真空管空腹采集靜脈血:EDTA-K2抗凝全血用于檢測血小板參數(shù)(血小板計數(shù)CPC、平均血小板體積MPV和血小板分布寬度PDW)，枸櫞酸二鈉1∶9抗凝全血2.7ml用于測定血漿組織因子濃度(TF)及活化血小板標志(血小板聚集率PAR%和血小板-單核細胞聚集體PMA%)。其中血小板參數(shù)使用SYSMEX XE-2100型血細胞分析儀及配套試劑檢測，PAR使用北京賽科西德公司SC-2000型血小板聚集分析儀測定，誘導(dǎo)劑為ADP，PMA使用流式細胞儀及配套試劑測定，TF檢測試劑盒購自American Diagnostica Inc.公司。正常對照者均在早晨空腹采血并立即送檢。所有試驗對象均在采血后立即送檢，各指標均在規(guī)定時間內(nèi)檢測完畢。所有檢測均嚴格按操作說明進行。各指標陽性率的計算方法為:陽性率(%)=(超過正常對照均值的患者數(shù)/患者總數(shù))×100%。

3.統(tǒng)計學(xué)方法:統(tǒng)計資料用均值±標準差形式表示，采用SPSS 13.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計分析，不同病理類型患者的各指標兩兩比較采用單因素方差分析和q檢驗，其他組間比較采用成組t檢驗，TF與其他指標的相關(guān)性采用線性相關(guān)分析，陽性率及相關(guān)性比較采用χ2檢驗。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

結(jié) 果

1.肺癌患者、良性肺疾病以及正常對照者的TF、血小板參數(shù)及血小板活化指標:肺癌組 TF濃度、CPC、MPV、PDW、PAR及PMA水平均高于正常對照組和良性肺疾病組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.001)(表1)。

表1 肺癌患者、良性肺疾病以及正常對照者TF、血小板參數(shù)及血小板活化指標比較

2.不同病理類型肺癌患者TF、血小板參數(shù)及血小板活化指標:肺癌患者TF濃度、CPC、MPV、PDW、PAR及PMA水平均隨TNM分期增加而相應(yīng)增加(P＜0.01)，Ⅲ期和Ⅳ期患者各指標水平均高于Ⅰ期和Ⅱ期患者，其中Ⅳ期患者TF、PAR及PMA水平高于Ⅲ期患者，以上差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.001)。不同組織類型和不同分化程度的各指標水平差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)，見表2。

表2 不同病理類型肺癌患者TF、血小板參數(shù)及血小板活化指標比較

3.各指標的陽性率以及TF與其余指標的相關(guān)性:(1)各指標的陽性率:TF:100.0%(97/97)，PMA:92.8%(90/97)，PAR:87.6%(85/97)，CPC:70.1%(68/97)，MPV:76.3%(74/97)，PDW:78.4%(76/97)。TF及PMA陽性率顯著高于CPC、MPV及PDW的陽性率(P均＜0.05)。(2)TF與其余指標的相關(guān)性(R2，P):TF與各指標間均呈顯著的正相關(guān):TF/CPC(0.40，＜0.01)，TF/MPV(0.440，＜0.05)，TF/PDW(0.479，＜0.05)，TF/PAR(0.689，＜0.001)，TF/PMA(0.798，＜0.001)。TF與PAR和PMA的相關(guān)系數(shù)均顯著高于與血小板參數(shù)的相關(guān)系數(shù)(P均＜0.01)。

討 論

組織因子是體內(nèi)凝血系統(tǒng)激活的起始因子，它通過激活凝血因子Ⅶ并與其結(jié)合成復(fù)合物從而啟動凝血反應(yīng)，并通過一系列瀑布式的酶促反應(yīng)使凝血酶原活化成凝血酶[4];凝血酶生成是凝血活化的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，可激活眾多凝血因子以及使血小板活化，從而放大凝血反應(yīng)，使血液呈高凝狀態(tài)或形成血栓。組織因子可直接引起血小板活化，血小板-白細胞聚集物也可促進TF分泌，因此TF增加同時伴隨凝血系統(tǒng)與血小板的活化，使血液呈高凝狀態(tài)甚至血栓形成[3]。

機體在正常情況下，單核細胞和血管內(nèi)皮細胞等不表達TF，肺癌患者除癌細胞可分泌TF脫落釋放入血，而眾多病理因素也可導(dǎo)致血管內(nèi)皮細胞和單核細胞大量表達TF[4]。肺癌細胞產(chǎn)生的骨髓刺激物質(zhì)的增加等多因素導(dǎo)致血小板數(shù)量、形態(tài)以及大小的改變[5];肺癌細胞還可通過多種途徑激活血小板，表現(xiàn)為血小板聚集和釋放反應(yīng)增加，活化血小板可通過釋放P-選擇素等表達于血小板膜表面，并可與白細胞膜P-選擇素配體糖蛋白-1結(jié)合形成血小板-白細胞聚集體，尤其是血小板-單核細胞聚集體(PMA)，是反映血小板活化更特異的標志物[1，7]。因此，肺癌患者體內(nèi)存在高凝狀態(tài)，組織因子和血小板均與惡性腫瘤關(guān)系的密切，而TF和血小板增高以及血小板活化增強是肺癌患者的表現(xiàn)之一[1，2]。

本研究結(jié)果顯示，肺癌患者血漿TF、血小板參數(shù)、聚集率及PMA水平顯著高于正常對照者和良性肺疾病患者，表明肺癌患者體內(nèi)存在血小板生成、成熟異常以及代償性增多，以及因為TF以及其他促凝物質(zhì)的增加導(dǎo)致凝血系統(tǒng)及血小板活化，從而導(dǎo)致體內(nèi)包括血小板在內(nèi)的凝血網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)異常而存在明顯的高凝狀態(tài)，有發(fā)生血栓的危險性。由于血栓形成是惡性腫瘤的嚴重并發(fā)癥之一，因此，肺癌患者檢測血漿組織因子、血小板參數(shù)以及血小板活化標志物對肺癌高凝狀態(tài)以及血栓形成的預(yù)防和判斷都具有重要意義。

組織因子分泌、血小板活化及與白細胞形成的聚集物與腫瘤細胞的惡性轉(zhuǎn)移傾向有關(guān)，它們共同參與肺癌的生長、轉(zhuǎn)移及進展過程[1，4]。腫瘤轉(zhuǎn)移是患者病情惡化的標志，遠處轉(zhuǎn)移是晚期腫瘤的表現(xiàn)，而有轉(zhuǎn)移的惡性腫瘤患者普遍存在全身多系統(tǒng)的功能障礙。MPV和PDW是反應(yīng)骨髓造血功能的敏感指標，兩者水平增大可先于血小板數(shù)量的增高[5]。本研究結(jié)果可見，隨肺癌的TNM分期的增加，患者各指標水平均呈遞增趨勢，而主要代表有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的Ⅲ期和遠處轉(zhuǎn)移的Ⅳ患者各指標水平明顯高于Ⅰ期和Ⅱ期患者，并且Ⅳ期患者TF、PAR以及PMA水平明顯高于Ⅲ期患者，表明腫瘤細胞轉(zhuǎn)移與血小板活化之間以及與血小板生成及成熟異常存在密切的聯(lián)系。因此，TF、血小板活化標志以及血小板計數(shù)及其參數(shù)均可作為肺癌發(fā)生、發(fā)展以及患者病情判定的參考指標。研究結(jié)果還顯示，TF和PMA的陽性率均明顯高于血小板各參數(shù)的陽性率，TF與PMA和PAR高度相關(guān)，其相關(guān)性也明顯高于與血小板各參數(shù)的相關(guān)性，而且TF、PAR以及PMA水平均隨TNM分期增加而顯著遞增，表明肺癌轉(zhuǎn)移、TF以及血小板活化之間有密切的聯(lián)系，肺癌轉(zhuǎn)移對TF分泌及血小板活化聚集和釋放有促進作用，而TF分泌增加及血小板活化聚集和釋放同時也對肺癌轉(zhuǎn)移有促進作用，兩者互相影響。但不同組織類型以及不同分化程度的肺癌患者各指標結(jié)果顯示并無明顯的差異，這進一步表明，肺癌患者血小板生成和成熟狀況以及TF增加及血小板活化導(dǎo)致高凝狀態(tài)的程度與肺癌轉(zhuǎn)移有關(guān)，而與組織類型和分化程度無關(guān)。因此，在肺癌轉(zhuǎn)移及血栓形成的判斷以及病情評價中，TF及活化血小板水平是更有用的參考指標。

總之，肺癌患者檢測血漿組織因子、血小板參數(shù)及血小板活化標志物具有重要的臨床價值，組織因子和活化血小板水平對肺癌轉(zhuǎn)移、血栓形成的判斷和預(yù)防以及患者病情評價中都具有重要意義。

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