強(qiáng)力型油煙機(jī)清潔劑對大鱗副泥鰍的毒性研究

摘要：以大鱗副泥鰍為對象，研究了強(qiáng)力型油煙機(jī)清潔劑對其急性和生理毒性。急性毒性試驗結(jié)果表明，強(qiáng)力型油煙機(jī)清潔劑對大鱗副泥鰍的２４、４８、９６ ｈ的半致死濃度（ＬＣ５０）分別為６．６９２、６．１９０、５．９０８ ｍＬ／Ｌ；生理毒性試驗結(jié)果表明，強(qiáng)力型油煙機(jī)清潔劑在一定程度上可抑制大鱗副泥鰍肝臟谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ＧＰＴ）和谷草轉(zhuǎn)氨酶（ＧＯＴ）的活性，隨著處理時間的延長和濃度的增加活性逐漸降低。

關(guān)鍵詞：強(qiáng)力型油煙機(jī)清潔劑；大鱗副泥鰍；急性毒性；生理毒性

中圖分類號：Ｓ９６６．４；Q958.116文獻(xiàn)標(biāo)識碼：Ａ文章編號：0439－８114（２０11）03－0557-03

Ｔｈｅ Sｔｕｄｉｅｓ ｏｎ ｔｈｅ Ａｃｕｔｅ Ｔｏｘｉｃｉｔｙ ａｎｄ Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ Ｔｏｘｉｃｉｔｙ ｏｆ Ｐｏｗｅｒｆｕｌ Ｋｉｔｃｈｅｎ Ｃｌｅａｎｅｒ ｏｎ Ｐａｒａｍｉｓｇｕｒｎｕｓ ｄａｂｒｙａｎｕｓ

ＣＨＡＮＧ Ｚｈｏｎｇ－jｉｅ，ＤＵ Ｑｉ－yａｎ，ＹＡＮＧ Ｙａｎｇ，ＷＵ Ｘｉａｏ－h(huán)ｕａ

（Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ ｌｉｆｅ ｓｃｉｅｎｃｅｓ， Ｈｅｎａｎ Ｎｏｒｍａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ， Ｘｉｎｘｉａｎｇ ４５３００７，Ｈｅｎａｎ，Ｃｈｉｎａ）

Ａｂｓｔｒａｃｔ： Tｈｅ aｃｕｔｅ ｔｏｘｉｃｉｔｙ ａｎｄ ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ ｔｏｘｉｃｉｔｙ ｏｆ pｏｗｅｒｆｕｌ kｉｔｃｈｅｎ cｌｅａｎｅｒ ｏｎ Ｐ． ｄａｂｒｙａｎｕｓ were studied． Ａｃｕｔｅ ｔｏｘｉｃｉｔｙ ｔｅｓｔ ｒｅｓｕｌｔｓ indicated ｔｈａｔ ｔｈｅ ｍｅｄｉａｎ ｌｅｔｈａｌ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ（ＬＣ５０）ｗａｓ ６．６９２， ６．１９０ ａｎｄ ５．９０８ｍＬ／Ｌ，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ． Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ ｔｏｘｉｃｉｔｙ ｔｅｓｔ ｒｅｓｕｌｔｓ indicated ｔｈａｔ ｔｈｅ pｏｗｅｒｆｕｌ kｉｔｃｈｅｎ cｌｅａｎｅｒ ｃould ｉｎｈｉｂｉｔｅｄ ｔｈｅ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ＧＰＴ ａｎｄ ＧＯＴ， ｗｈｉｃｈ ｄｅｃｒｅａｓｅｄ ｗｉｔｈ ｔｉｍｅ ａｎｄ ｔｈｅ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｉｎｃｒｅａｓｉｎｇ．

Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： ｐｏｗｅｒｆｕｌ ｋｉｔｃｈｅｎ ｃｌｅａｎｅｒ； Ｐａｒａｍｉｓｇｕｒｎｕｓ ｄａｂｒｙａｎｕｓ； ａｃｕｔｅ ｔｏｘｉｃｉｔｙ； ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ ｔｏｘｉｃｉｔｙ

近年來，隨著科技的發(fā)展及人們生活水平的提高，人們對環(huán)境的保護(hù)意識也不斷地加強(qiáng)。人們越來越關(guān)注各種日化用品、農(nóng)藥、重金屬等對人類及環(huán)境的影響。已有研究人員對洗發(fā)水、洗衣粉和洗滌劑等日化用品的安全性進(jìn)行了研究［１，２］，所選的試驗動物一般是水生動物［３］，主要是以黃鱔、泥鰍、鯽魚、蝌蚪、雙殼類等為試驗動物，結(jié)果發(fā)現(xiàn)這些化學(xué)物質(zhì)均對水生動物有著不同程度的毒害。但以大鱗副泥鰍為材料，研究強(qiáng)力型油煙機(jī)清潔劑對水生生物安全性的影響，則尚未見報道。

強(qiáng)力型油煙機(jī)清潔劑作為現(xiàn)代家庭廚房清潔劑的重要一員，由于使用方便、去污能力強(qiáng)等特點(diǎn)，被廣泛使用；同時，它也隨之進(jìn)入水體，進(jìn)而可能影響或破壞水生生物的生活環(huán)境。因此，評估強(qiáng)力型油煙機(jī)清潔劑對周圍水環(huán)境安全性的影響，具有特別重要的現(xiàn)實意義。

大鱗副泥鰍（Ｐａｒａｍｉｓｇｕｒｕｓ ｄａｂｒｙａｎｕｓ）屬鯉形目、鯉形亞目、鰍科中副泥鰍屬，分布較廣，且易于在實驗室中飼養(yǎng)，具有抗污能力強(qiáng)等特點(diǎn)，在毒性試驗研究中，是理想的水生生物試驗材料［４］。本研究主要包括急性毒性試驗及生理毒性試驗。由急性毒性試驗計算出強(qiáng)力型油煙機(jī)清潔劑對大鱗副泥鰍的半致死濃度，分析其對水生生物的急性毒性；測定染毒后肝臟內(nèi)谷丙轉(zhuǎn)氨酶（GPT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（GOT）的活力，進(jìn)而分析強(qiáng)力型油煙機(jī)清潔劑對水生生物生理方面的影響。

１材料與方法

１．１材料

大鱗副泥鰍體重１５～２０ ｇ，體長８～１３ ｃｍ， 購于新鄉(xiāng)市鴻達(dá)市場，在實驗室先馴養(yǎng)１周，每天更換一次暴曬２４ ｈ的水。選取大小相近、健康活潑的個體，備用?！八{(lán)月亮”牌油污克星（廣州藍(lán)月亮實業(yè)有限公司生產(chǎn)）為試驗試劑。ＧＰＴ、ＧＯＴ試劑盒均由南京建成生物工程研究所提供。

１．２方法

１．２．１急性毒性試驗首先進(jìn)行預(yù)試驗，確定正式試驗中油煙機(jī)清潔劑的濃度范圍，設(shè)計各處理組濃度；接著進(jìn)行正式試驗。在正式試驗中，將清潔劑配制成４．０、４．９、６．０、７．７、９．０ ｍＬ／Ｌ ５個試驗組，另設(shè)１個不加清潔劑的對照組（CK）。每組均投放１０尾大鱗副泥鰍（挑取健康活潑、大小相近的個體），每２４ ｈ換１次等濃度的油煙機(jī)清潔劑。試驗時間持續(xù)９６ ｈ，試驗開始后每６ ｈ觀察中毒癥狀，記錄死亡時間、數(shù)量，并及時撈出死魚。

采用改進(jìn)寇氏法（Ｋａｒｂｅｒ）［５，６］計算油煙機(jī)清潔劑對大鱗副泥鰍的半致死濃度（ＬＣ５０）及９５％置信限范圍。計算公式如下：

ｌｇＬＣ５０＝Ｘｍ－ｉ（Σｐ－０．５）Ｓ（ｌｇＬＣ５０）＝ｉ

式中，Ｘｍ為最大濃度的對數(shù)值；ｉ為相鄰兩濃度組的對數(shù)濃度差值；ｐ為死亡率；Ｓ（ｌｇＬＣ５０）為標(biāo)準(zhǔn)誤差；Σｐ為各濃度組死亡率總和；ｑ為存活率；ｎ為每組動物數(shù)。

ＬＣ５０的９５%置信限＝ｌｇ－１［ｌｇＬＣ５０±１．９６Ｓ（ｌｇＬＣ５０）］

按Ｔｕｒａｂｅｌｌ公式［７，８］求出安全濃度（Ｓｃ）＝４８ ｈ ＬＣ５０×０．３／（２４ ｈＬＣ５０／４８ ｈＬＣ５０）２

１．２．２生理毒性試驗參考急性毒性試驗結(jié)果，進(jìn)行預(yù)試驗，進(jìn)而設(shè)計正式試驗。在正式試驗中，將油煙機(jī)清潔劑配制成０．５、１．５、２．５、３．５ ｍＬ／Ｌ的４個試驗組，另設(shè)1個不加油煙機(jī)清潔劑的對照組（ＣＫ），每組均設(shè)置３個重復(fù)。挑選健康活潑的個體，每組投放５尾大鱗副泥鰍。每２４ ｈ換１次等濃度的油煙機(jī)清潔劑溶液。分別于48、96、144 h取材，迅速將其肝臟制成肝臟勻漿液，按１∶９的比例加入生理鹽水稀釋，嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行ＧＰＴ、ＧＯＴ活性的測定。ＧＰＴ和ＧＯＴ活力定義為：每毫克蛋白質(zhì)，每分鐘扣除非酶反應(yīng)的作用，使反應(yīng)體系中ＧＰＴ或ＧＯＴ降低 １ μｍｏｌ／Ｌ為1個酶活力單位。

１．２．３數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析所有數(shù)據(jù)均采用ＳＰＳＳ １６．０軟件進(jìn)行單因素方差分析（Ｏｎｅ－Ｗａｙ ＡＮＯＶＡ），用最小顯著差數(shù)法（ＬＳＤ）進(jìn)行多重比較，同時還利用了Ｅｘｃｅｌ ２００３進(jìn)行分析作圖，數(shù)據(jù)結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。顯著性差異以Ｐ值表示，Ｐ＜０．０５表示差異顯著，Ｐ＜０．０１表示差異極顯著。

２結(jié)果與分析

２．１急性毒性試驗

油煙機(jī)清潔劑對大鱗副泥鰍的急性毒性試驗結(jié)果如表１、圖１所示。由表１可知，油煙機(jī)清潔劑對大鱗副泥鰍２４、４８、９６ｈ的半致死濃度（ＬＣ５０）分別為６．６９２、６．１９０、５．９０８ ｍＬ／Ｌ，安全濃度（Ｓｃ）為１．５８９ ｍＬ／Ｌ。在處理２４ｈ時，７．７、９．０ ｍＬ／Ｌ濃度組的死亡率已分別達(dá)到９０％、１００％；處理４８ ｈ時，６．０ ｍＬ／Ｌ濃度組的死亡率達(dá)到８０％。結(jié)合圖１，可以看出，在同一處理濃度時，隨著處理時間的延長，大鱗副泥鰍的死亡率隨之增加，具有時間效應(yīng)；在同一處理時間段內(nèi)，隨著處理濃度的增加，大鱗副泥鰍的死亡率也隨之增加，具有濃度效應(yīng)。

觀察大鱗副泥鰍的行為特征，發(fā)現(xiàn)其在處理過程中，行為異常（尤其是高濃度組），如開始表現(xiàn)為興奮不安地游動，但數(shù)分鐘至數(shù)小時后游動逐漸緩慢，反應(yīng)遲鈍，身體逐漸失去平衡，出現(xiàn)翻肚，甚至死亡現(xiàn)象。這些均反映出油煙機(jī)清潔劑具有明顯的毒性作用。

２．２生理毒性試驗

經(jīng)處理48、96、144 h，大鱗副泥鰍肝臟內(nèi)ＧＰＴ、ＧＯＴ活性變化的結(jié)果如表２所示。由表２可知，各試驗組與各自對照組比較，ＧＰＴ活性除處理48 h的０．５、１．５、２．５ ｍＬ／Ｌ濃度組，處理96 h的０．５、１．５ ｍＬ／Ｌ濃度組，處理144 h的０．５ ｍＬ／Ｌ濃度組均呈顯著差異（Ｐ＜０．０５）外，其余均有極顯著差異（Ｐ＜０．０１）；ＧＯＴ活性處理48 h的０．５ ｍＬ／Ｌ濃度組，處理144 h的０．５、１．５ ｍＬ／Ｌ濃度組均無顯著差異（Ｐ﹥０．０５），處理48 h的１．５、２．５ ｍＬ／Ｌ濃度組，處理96 h的０．５ ｍＬ／Ｌ濃度組，處理144 h的２．５ ｍＬ／Ｌ濃度組均有顯著差異（Ｐ＜０．０５），其余均有極顯著差異（Ｐ＜０．０１）。這可能與各組個體的個體差異有關(guān)。總體上分析，在同一處理時間內(nèi)，隨處理濃度的增加，大鱗副泥鰍肝臟內(nèi)ＧＰＴ、ＧＯＴ活性均呈減少趨勢，表現(xiàn)出濃度效應(yīng)；在同一處理濃度時，隨著處理時間的延長，大鱗副泥鰍肝臟ＧＰＴ、ＧＯＴ活性也均呈減少趨勢，表現(xiàn)出時間效應(yīng)。可見，油煙機(jī)清潔劑對大鱗副泥鰍肝臟ＧＰＴ、ＧＯＴ活性具有抑制作用，表現(xiàn)出對其的生理毒性。

３討論

研究以大鱗副泥鰍為試驗材料，探究強(qiáng)力型油煙機(jī)清潔劑對其急性毒性及生理毒性的影響。結(jié)果表明，強(qiáng)力型油煙機(jī)清潔劑對大鱗副泥鰍的２４、４８、９６ ｈ的半致死濃度（ＬＣ５０）分別為６．６９２、６．１９０、５．９０８ ｍＬ／Ｌ；強(qiáng)力型油煙機(jī)清潔劑能影響大鱗副泥鰍肝臟的生理作用，對肝臟中的ＧＰＴ、ＧＯＴ活性均有一定的抑制作用，且均有時間、濃度效應(yīng)。由此可見，強(qiáng)力型油煙機(jī)清潔劑對大鱗副泥鰍具有一定的毒性影響，且與處理時間、濃度有關(guān)。這可能與強(qiáng)力型油煙機(jī)清潔劑的復(fù)雜成分有關(guān)，它主要包括表面活性劑及一些助洗劑（如適當(dāng)?shù)膲A、溶劑）等。表面活性劑對魚類的存活力、繁殖力等有明顯的負(fù)面影響［９，１０］，對多種酶的指標(biāo)也會產(chǎn)生不同程度的影響［１１，１２］， 毒性較大［２］；表面活性劑可以引起細(xì)胞膜崩解、干擾細(xì)胞正常分裂等，對機(jī)體具有直接或間接的毒性作用。此外還有其他助洗劑等成分，可能使這種危害變得更為復(fù)雜和嚴(yán)重［１３］。

已有資料表明，清潔劑的基本成分之一為陰離子表面活性劑，陰離子表面活性劑最常見的主要成分直鏈烷基苯磺酸鈉純品對草魚魚苗的９６ ｈ ＬＣ５０值為５．９ ｍｇ/Ｌ［１４］。這與本研究急性毒性試驗中得到的對大鱗副泥鰍的９６ ｈ ＬＣ５０值（５．９０８ ｍＬ／Ｌ）基本一致。足見此類油煙機(jī)清潔劑的使用，對魚類等水生生物的影響較大，應(yīng)引起重視。

ＧＰＴ、ＧＯＴ是廣泛存在于動物線粒體中的重要氨基酸轉(zhuǎn)氨酶，在機(jī)體蛋白質(zhì)代謝中起重要作用，其活性變化亦是反映肝細(xì)胞受損傷的主要敏感指標(biāo)［１５］，可以借以評價強(qiáng)力型油煙機(jī)清潔劑對大鱗副泥鰍存在的生理毒性作用。在正常情況下，動物組織細(xì)胞內(nèi)的轉(zhuǎn)氨酶只有少量被釋放到血漿中，主要存在于肝臟細(xì)胞的胞漿中。當(dāng)肝臟組織中毒發(fā)生病變或者細(xì)胞受到外來物質(zhì)的損傷時，細(xì)胞膜的通透性改變，大量ＧＰＴ、ＧＯＴ滲入血液，肝的ＧＰＴ、ＧＯＴ活性明顯下降。而強(qiáng)力型油煙機(jī)清潔劑中的成分具有能改變細(xì)胞膜的通透性的作用，這可能是強(qiáng)力型油煙機(jī)清潔劑影響肝臟組織中ＧＰＴ、ＧＯＴ活性的原因之一。生理毒性試驗表明了強(qiáng)力型油煙機(jī)清潔劑對大鱗副泥鰍肝細(xì)胞中ＧＰＴ、ＧＯＴ的活性有顯著的影響。另外，為使試驗結(jié)論更具有說服力，可以進(jìn)一步增加對血清中ＧＰＴ、ＧＯＴ的活性以及多個組織中其他酶（如抗氧化酶等）活性的測定，這些都有待進(jìn)一步的研究。

當(dāng)今社會人們的生活質(zhì)量在不斷提高，對各種日化用品的需求量在加速增長。其中洗滌、清潔用品就是一個重要領(lǐng)域，有著廣闊的市場發(fā)展前景。有資料顯示，近１０余年來僅我國清潔劑的使用每年就以８％的速度遞增。這些日化用品的廣泛使用，無不給環(huán)境，特別是水環(huán)境造成很大的壓力。本研究探討的強(qiáng)力型油煙機(jī)清潔劑的使用，實際上在日常生活中的使用量要超過試驗用量，所以，在日常生活中使用這類油煙機(jī)清潔劑時一定要注意對周圍水環(huán)境安全性的影響。

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