飼糧蛋白質(zhì)水平對肥育豬背最長肌嫩度及骨骼肌特異性蛋白－核轉(zhuǎn)錄因子κB信號途徑的影響

張 勇 崔 巖 陶 亮 朱宇旌 鄧 科 孫 璀 邵彩梅

(1.沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)畜牧獸醫(yī)學(xué)院，沈陽 110866;2.遼寧禾豐牧業(yè)股份有限公司，沈陽 110164)

飼糧蛋白質(zhì)水平對肥育豬背最長肌嫩度及骨骼肌特異性蛋白－核轉(zhuǎn)錄因子κB信號途徑的影響

張 勇1崔 巖1陶 亮1朱宇旌1鄧 科1孫 璀1邵彩梅2

(1.沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)畜牧獸醫(yī)學(xué)院，沈陽 110866;2.遼寧禾豐牧業(yè)股份有限公司，沈陽 110164)

本試驗旨在研究飼糧理想蛋白質(zhì)水平對背最長肌嫩度及骨骼肌特異性蛋白－核轉(zhuǎn)錄因子κB(P94-NFκB)信號途徑相關(guān)蛋白和鈣蛋白酶抑制蛋白(CAST)mRNA表達量的影響。選擇初始重約50 kg的杜洛克×長白×大白三元雜交豬90頭，隨機分配到3個處理，每個處理3個重復(fù)，每個重復(fù)10頭，公母各占1/2。3個處理分別采用12%、16%、20%理想蛋白質(zhì)水平的飼糧，飼糧能量水平相同。正試期58 d，結(jié)束后屠宰取樣，測定肌肉剪切力并利用實時定量PCR法測定豬背最長肌P94、NFκB、核轉(zhuǎn)錄因子抑制物(IκB)和CAST mRNA表達量。結(jié)果表明:1)飼糧蛋白質(zhì)水平對背最長肌剪切力、P94、NFκB、IκB和CAST mRNA表達量有顯著影響(P＜0.05);隨飼糧蛋白質(zhì)水平升高，背最長肌剪切力、IκB和 CAST mRNA表達量升高、P94和NFκB mRNA 表達量降低。2)背最長肌剪切力與 IκB(相關(guān)系數(shù)為 0.513，P＜0.05)、CAST mRNA表達量(相關(guān)系數(shù)為0.816，P＜0.01)呈正相關(guān)。3)CAST與P94 mRNA表達量呈負相關(guān)(相關(guān)系數(shù)為 －0.496，P＜0.05)，與 IκB mRNA 表達量呈正相關(guān)(相關(guān)系數(shù)為 0.710，P＜0.01)。4)P94 與 NFκB mRNA 表達量呈正相關(guān)(相關(guān)系數(shù)為 0.550，P＜0.05)，與 IκB mRNA表達量呈負相關(guān)(相關(guān)系數(shù)為－0.518，P＜0.05);IκB與NFκB mRNA表達量呈負相關(guān)(相關(guān)系數(shù)為－0.539，P＜0.05)。結(jié)果提示:飼糧高蛋白質(zhì)水平提高了豬背最長肌剪切力、CAST和IκB mRNA表達量，降低了肌肉嫩度和P94 mRNA表達量;豬背最長肌P94-NFκB信號途徑在肌肉嫩度調(diào)控過程中發(fā)揮一定作用，但不是主要途徑。

蛋白質(zhì)水平;鈣蛋白酶抑制蛋白;骨骼肌特異性蛋白;核轉(zhuǎn)錄因子κB;肌肉嫩度

肉品質(zhì)直接影響到養(yǎng)殖業(yè)、肉類加工業(yè)和批發(fā)零售業(yè)效益以及廣大消費者的切身利益，如何提高肉品質(zhì)已成為當(dāng)今學(xué)者共同關(guān)心的一項重大課題。嫩度作為評價肉品質(zhì)的重要指標(biāo)而倍受矚目。在肌肉組織中，鈣蛋白酶系(calpains)控制著肌纖維蛋白的降解，這一過程是肌肉蛋白質(zhì)降解的限速步驟［1］，鈣蛋白酶系在肌肉纖維更新及宰后的嫩化中扮演著重要角色［2］。骨骼肌特異性蛋白酶(P94，又名 calpain-3、CAPN3)和鈣蛋白酶抑制蛋白(calpastatin，CAST)都屬于鈣蛋白酶系統(tǒng)的一員。核轉(zhuǎn)錄因子κB(NFκB)廣泛存在于真核生物中，是一個由復(fù)雜的多肽亞基組成的蛋白質(zhì)家族，在肌細胞形成、肌細胞再生和細胞增殖中發(fā)揮了重要作用。骨骼肌特異性蛋白酶－核轉(zhuǎn)錄因子κB(P94-NFκB)信號途徑與肌細胞核凋亡密切相關(guān)。近年來，對P94的研究多集中于P94多態(tài)性的分析［3－4］，對 NFκB 和核轉(zhuǎn)錄因子抑制物(IκB)的研究多集中在干細胞生物學(xué)領(lǐng)域及肌肉疾病的研究［5－6］，在動物營養(yǎng)中的應(yīng)用很少，并且對 P94-NFκB信號途徑與肌肉嫩度的聯(lián)系更是鮮見報道。曾有報道利用分子生物學(xué)技術(shù)手段研究飼糧營養(yǎng)水平對肌肉嫩度的影響，從微觀角度探討相關(guān)基因表達對肌肉嫩度的調(diào)控機制。本試驗考察飼糧理想蛋白質(zhì)水平對生長肥育豬肌肉CAST和P94-NFκB信號途徑的影響，明確 CAST與 P94-NFκB信號途徑在豬肌肉嫩度調(diào)控中的作用，為改善豬肉品質(zhì)提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗儀器

數(shù)顯式肌肉嫩度儀(C-LM 3型，東北農(nóng)業(yè)大學(xué)工程學(xué)院研制);高速臺式冷凍離心機(TGL-20M，長沙湘儀離心機儀器有限公司);紫外分光光度計(Cary 50 Probe，美國 Varian公司);基因擴增儀［TC-96/G/H(6)，杭州博日科技有限公司］;PCR儀(ABIPRISM 7000 HT Real-Time RCR System，美國ABI公司);凝膠成像系統(tǒng)(江蘇捷達)。

1.2 試驗試劑

RNA提取試劑盒(RNAiso Reagent)、熒光定量PCR(real time-PCR，RT-PCR)試劑盒［SYBRPrimeScriptTMRT-PCR Kit(Perfect Real Time)］、DEPC水、DNA分子量標(biāo)準(DL2000)、50 bp DNA Ladder Marker均購自于TaKaRa公司;瓊脂糖購自于寶泰克(西班牙)公司;其他常用化學(xué)試劑均為國產(chǎn)分析純。

1.3 試驗動物與試驗設(shè)計

本試驗采用完全隨機區(qū)組試驗設(shè)計，選擇初始重約50 kg的杜洛克×長白×大白三元雜交豬90頭，隨機分配到3個處理，每個處理3個重復(fù)，每個重復(fù)10頭，公母各占1/2。3個處理分別采用12%、16%、20%理想蛋白質(zhì)水平的飼糧，飼糧能量水平相同，正試期58 d，參照NRC(1998)肥育豬的營養(yǎng)需要配合成粉狀全價料，飼糧消化能保持相同。飼糧組成及營養(yǎng)水平見表1。

1.4 飼養(yǎng)管理

試驗前進行驅(qū)蟲、防疫、編號等工作。試驗豬水泥地面單圈飼養(yǎng)，自由采食，以鴨嘴式飲水器提供充足清潔飲水，日飼喂3次，清糞3次，保持舍內(nèi)清潔，隨時觀察并記錄飼養(yǎng)期間豬的食欲、精神狀況、糞便等情況。

1.5 樣品采集制備

為了使胴體盡量少受破壞，肉樣采集位置為豬最后肋骨和最后腰椎間的單側(cè)背最長肌，采樣400 g，用于肉品質(zhì)測定;并在最短的時間內(nèi)于第13～16肋骨間取豬背最長肌樣本30 g，放入錫箔紙中包好，用液氮迅速冷凍，之后放于－80℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.6 肌肉嫩度測定

采用C-LM 3型數(shù)顯式肌肉嫩度儀測定肉樣剪切力值，具體試驗步驟參考張勇等［7－8］文獻。

1.7 利用RT-PCR測定相關(guān)蛋白m RNA表達量

1.7.1 總 RNA 提取

參照RNA提取試劑盒推薦方法，提取豬背最長肌樣品總RNA。提取后的RNA用紫外分光光度計在260 nm和280 nm處測定吸光度值，根據(jù)OD260nm/OD280nm檢驗純度，并按如下公式計算RNA的濃度:

1.7.2 cDNA 合成

按照RT-PCR試劑盒操作方法進行。cDNA合成后放－20℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.7.3 引物設(shè)計與合成

本試驗選擇β－肌動蛋白(β-actin)作為內(nèi)參，用相對定量的方法，測定肥育豬 P94、NFκB、IκB、CAST的mRNA相對表達量。引物均由TaKaRa寶生物工程(大連)有限公司合成，引物序列及參數(shù)見表2。

1.7.4 RT-PCR

β-actin、P94、NFκB、IκB PCR 擴增反應(yīng)的反應(yīng)體系均為25μL:TaKaRa SYBR Prem ix Ex Taq(2×)12.5 μL，上游、下游引物各 0.5 μL(10 μmol/L)，Rox Reference Dye(50 × )0.5 μL，模板cDNA溶液2μL，RNase-free H2O 9μL。

反應(yīng)條件:94℃預(yù)變性5 m in;94℃變性30 s，59～63℃退火30 s(具體基因的退火溫度見表2)，72℃延伸45 s，40個循環(huán);72℃最后延伸2 m in。

表1 飼糧組成及營養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))Table 1 Composition and nutrient levels of diets(air-dry basis) %

1.7.5 電泳

將預(yù)先配制好的加溴化乙錠(EB)的1%瓊脂糖凝膠融化，冷卻至約60℃，倒入裝好梳子的膠槽內(nèi)，使凝膠厚度為5～7 mm，待凝膠完全凝固后，小心移去梳子，將凝膠放入裝有1×TAE電泳緩沖液的電泳槽中，將5μL PCR產(chǎn)物與1μL電泳上樣緩沖液(6×Loading buffer)混合后，點樣。同時于樣品旁邊點5μL DL2000 DNA Maker作為分子量標(biāo)記，110 V電壓電泳20 m in。紫外線下觀察結(jié)果，并拍照記錄。

1.8 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析

用中國科學(xué)院沈陽應(yīng)用生態(tài)研究所的ABI Prism 7000 SDS software 1.5進行相對定量分析。采用2－△△Ct的計算方法計算出目的基因的相對表達量，用 SPSS 16.0對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析，并用LSD法和Duncan氏法進行多重比較，結(jié)果用平均值±標(biāo)準差表示。

2 結(jié)果

2.1 背最 長 肌剪 切 力 及 P94、NFκB、IκB 和CAST m RNA表達量

從表3可見，背最長肌剪切力隨飼糧蛋白質(zhì)水平的升高而升高，20%組顯著高于12%、16%組(P＜0.05)。豬背最長肌 P94、NFκB mRNA 表達量隨飼糧蛋白質(zhì)水平的升高而降低，其中P94 mRNA表達量在20%組與12%、16%組之間差異顯著(P＜0.05)，而 NFκB mRNA 表達量在不同組之間差異不顯著(P＞0.05)。豬背最長肌 IκB、CAST mRNA表達量隨飼糧蛋白質(zhì)水平的升高而升高，其中IκB mRNA表達量20%組與16%組之間差異顯著(P＜0.05)，20%組與12%組差異極顯著(P＜0.01)，而 CAST mRNA表達量在20%組與12%、16%組之間差異極顯著(P＜0.01)。所有基因mRNA表達量在16%組與12%組之間差異均不顯著(P＞0.05)。

表2 引物序列及實時定量PCR反應(yīng)條件Table 2 Primer sequences and the conditions for real-time PCR

表3 飼糧不同蛋白質(zhì)水平對豬背最長肌剪切力及P94、NFκB、IκB和CAST m RNA相對表達量的影響Table 3 Effects of dietary protein level on the shear force and P94、NFκB、IκB and CAST mRNA relative expression levels of longissimus dorsi in pigs

2.2 背最 長肌剪 切 力 與 P94、NFκB、IκB 和CAST m RNA表達量相關(guān)性

由表4可見，背最長肌剪切力與 P94、NFκB mRNA表達量呈負相關(guān)，剪切力隨背最長肌P94、NFκB mRNA表達量的降低而升高，相關(guān)系數(shù)分別為－0.453、－0.181，但相關(guān)性不顯著(P＞0.05)。背最長肌剪切力與IκBmRNA表達量呈正相關(guān)，剪切力的值隨背最長肌IκB mRNA表達量的升高而升高，相關(guān)系數(shù)為0.513，相關(guān)性顯著(P＜0.05)。背最長肌剪切力與CAST mRNA表達量呈正相關(guān)，剪切力隨背最長肌CAST m RNA表達量的升高而升高，相關(guān)系數(shù)為0.816，相關(guān)性極顯著(P＜0.01)。

表4 豬背最長肌剪切力與P94、NFκB、IκB和CAST m RNA相對表達量回歸方程Table 4 Regression equations between shear force and mRNA relative expression levels of P94，NFκB，IκB and CAST of longissimus dorsi in pigs

2.3 背最長肌 P94、NFκB、IκB 與 CAST m RNA表達量的相關(guān)性

由表5可見，CAST與P94、NFκB mRNA表達量呈負相關(guān)，相關(guān)系數(shù)分別為 －0.496、－0.224，其中CAST與P94 mRNA表達量的相關(guān)性顯著(P＜0.05)。CAST 與 IκB mRNA 表達量呈正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)為0.710，相關(guān)性極顯著(P＜0.01)。

表5 豬背最長肌CAST與P94、NFκB、IκB m RNA相對表達量回歸方程Table 5 Regression equations formRNA relative expression levels of CAST and P94，NFκB and IκB of longissimus dorsi in pigs

2.4 背最長肌 P94、NFκB、IκB m RNA 表達量三者之間的相關(guān)性

由表6可見，P94與NFκB mRNA表達量呈正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)為0.550，隨著P94 mRNA表達量的增加，NFκB mRNA表達量也隨之增加，相關(guān)性顯著(P＜0.05)。P94與 IκB mRNA 表達量呈負相關(guān)，相關(guān)系數(shù)為 －0.518，隨著P94 mRNA表達量的增加，IκB mRNA表達量降低，相關(guān)性顯著(P＜0.05)。IκB 與 NFκB mRNA 表達量呈負相關(guān)，相關(guān)系數(shù)為 －0.539，隨著 IκB mRNA 表達量的增加，NFκB mRNA表達量降低，相關(guān)性顯著(P＜0.05)。

表6 豬背最長肌P94與NFκB、IκB m RNA相對表達量回歸方程Table 6 Regression equations formRNA relative expression levels of NFκB，P94 and IκB of longissimus dorsi in pigs

3 討論

3.1 理想蛋白質(zhì)水平對豬背最長肌剪切力的影響

理想蛋白質(zhì)是氨基酸平衡最佳的蛋白質(zhì)。飼糧蛋白質(zhì)不足，肌肉蛋白質(zhì)合成受阻，未被利用的能量以脂肪的形式沉積下來，使肌內(nèi)脂肪含量增加;提高飼糧蛋白質(zhì)水平有促進蛋白質(zhì)沉積的作用。Davey等［9］發(fā)現(xiàn)，用高蛋白質(zhì)飼糧飼喂瘦肉型豬，可提高瘦肉率，降低肌肉內(nèi)脂肪水平，肉的嫩度下降。Goerl等［10］研究了飼糧蛋白質(zhì)水平對28～104 kg豬肉品質(zhì)的影響，同樣發(fā)現(xiàn)，隨飼糧蛋白質(zhì)水平的增加，胴體背膘厚下降、瘦肉率增加、肉嫩度下降。張克英等［11］研究表明，隨飼糧理想蛋白質(zhì)水平的提高，肌肉率趨于增加、肌肉脂肪含量顯著下降。何若鋼等［12］采用3個能量水平和3個蛋白質(zhì)水平對生長期特種野豬屠宰性能的影響進行了評定，肌肉剪切力、瘦肉率隨飼糧蛋白質(zhì)水平的增加而增加。在本試驗中隨著飼糧蛋白質(zhì)水平的提高，肌肉剪切力也隨之提高，與上述研究結(jié)果相一致。低蛋白質(zhì)水平能提高肉的嫩度，其原因可能是肌肉內(nèi)脂肪含量的升高和低蛋白質(zhì)飼糧促使體內(nèi)蛋白質(zhì)周轉(zhuǎn)加快所致。

3.2 理想蛋白質(zhì)水平對 CAST和 P94-NFκB信號途徑相關(guān)蛋白m RNA表達量的影響

隨著營養(yǎng)基因組學(xué)的不斷發(fā)展，營養(yǎng)水平與基因型之間的互作逐步被人們所認識。鈣蛋白酶系統(tǒng)在骨骼肌肌絲蛋白降解過程中起到重要作用，存在于絕大多數(shù)細胞中［13］。飼糧蛋白質(zhì)水平會影響動物機體內(nèi)的蛋白質(zhì)周轉(zhuǎn)代謝，有可能也會影響骨骼肌中有關(guān)蛋白質(zhì)降解的基因。本試驗結(jié)果表明，隨著飼糧理想蛋白質(zhì)水平的升高，CAST mRNA表達量顯著升高，而P94 mRNA表達量顯著降低。P94是calpains的成員之一，而CAST正是calpains的抑制劑，CAST mRNA表達量的增加或減少必然會引起calpainsmRNA表達量的減少或增加，這與本試驗結(jié)果相符合。Senskypl等［14］曾研究表明，注射生長激素和飼喂β－興奮劑克倫特羅均可改變背最長肌CAST mRNA表達量，但P94與NFκB未發(fā)生變化，提出生長激素和β－興奮劑對CAST mRNA表達的調(diào)控與P94-NFκB信號途徑無關(guān)。本試驗中飼糧理想蛋白質(zhì)水平對P94、IκB mRNA表達量有顯著影響，但對NFκB mRNA表達量無顯著性影響，這表明理想蛋白質(zhì)水平對P94-NFκB信號途徑存在一定影響，但具體的影響機制還需要進一步研究。

3.3 CAST和P94-NFκB信號途徑對肌肉嫩度的影響

肉的嫩度好壞是肌肉內(nèi)部結(jié)構(gòu)的反映，在一定程度上反映了肌原纖維、結(jié)締組織以及肌肉脂肪的含水量、分布和化學(xué)結(jié)構(gòu)［15］。CAST是細胞內(nèi)專一抑制calpain活性的蛋白質(zhì)，CAST是通過抑制calpain的自溶作用而發(fā)揮作用的，且這種抑制作用并不受 pH 的影響［16］。Delgado 等［17］發(fā)現(xiàn)，降解后的CAST同樣具有抑制calpain的活性，并發(fā)現(xiàn)肉的嫩化與CAST活性及降解速度有關(guān)。Melody等［18］研究表明，CAST與肌肉發(fā)育之間存在密切關(guān)系，CAST能提高肌肉的嫩度，指出通過調(diào)節(jié)calpain和CAST的活性可調(diào)節(jié)肌肉的發(fā)育，從而提高家畜的瘦肉率和產(chǎn)出率，提高肌肉的質(zhì)量。Koohmaraie等［19］研究認為，高水平的 CAST抑制宰后肌肉蛋白水解和嫩化。程豐等［20］發(fā)現(xiàn)，CAST的基因型與豬肉的嫩度存在相關(guān)性，為CAST作為豬肉嫩度的候選基因奠定了基礎(chǔ)。武艷群等［21］試驗進一步證明CAST是一個與肉質(zhì)相關(guān)性非常高的候選基因。曾有試驗表明CAST mRNA表達量與肌肉嫩度顯著相關(guān)［7－8］。本試驗結(jié)果同樣證實CAST與肌肉嫩度存在顯著相關(guān)性，CAST mRNA表達量的增加降低豬背最長肌嫩度。

P94-NFκB信號途徑與肌細胞凋亡密切相關(guān)。Ouali等［22］推斷，動物宰后應(yīng)該有一個細胞凋亡的過程，從微觀角度看，肌肉的成熟嫩化是肌細胞發(fā)生凋亡進而繼發(fā)性壞死的過程，因此，細胞凋亡與肌肉的成熟嫩化有著密切的關(guān)系。P94是骨骼肌NFκB信號途徑的上游調(diào)節(jié)者，調(diào)節(jié)相關(guān)基因表達，維持肌核功能。2A型臍帶型肌營養(yǎng)不良癥患者肌肉中P94的表達缺陷導(dǎo)致IκB-α在患者肌肉中積累，從而減弱NFκB對基因表達的調(diào)控，導(dǎo)致肌核程序性細胞凋亡［23］。Ojima等［24］探討了 P94在骨骼肌細胞信號調(diào)節(jié)途徑中的作用，試驗結(jié)果指出P94受肌纖維的種類、肌纖維的收縮、肌節(jié)的成熟化的影響。Kimberly等［25］研究發(fā)現(xiàn)鼠的肌肉營養(yǎng)失調(diào)主要是由P94的活性引起的。Murphy等［26］在鼠的骨骼肌中發(fā)現(xiàn)P94的活性與肌纖維密切聯(lián)系。沙玉圣等［27］試驗證明通過上調(diào)半腱肌P94 mRNA的表達可顯著改善半腱肌的嫩度。但Parr等［28］的研究表明，P94與豬背最長肌的嫩度并沒有直接的關(guān)系。本試驗結(jié)果顯示:P94 mRNA表達量與豬背最長肌嫩度存在負相關(guān)性，但是相關(guān)性不顯著，本結(jié)果與Parr等的結(jié)論相符合。本試驗結(jié)果也顯示NFκB mRNA表達量與豬背最長肌嫩度沒有相關(guān)性，這表明P94-NFκB信號途徑與豬背最長肌嫩度并無明顯關(guān)系。對于P94-NFκB信號途徑與肌肉嫩度的研究國內(nèi)外鮮見報道，其間具體的相關(guān)性還有待研究。

4 結(jié)論

①飼糧高蛋白質(zhì)水平提高了豬背最長肌剪切力、降低了肌肉嫩度。

②飼糧高蛋白質(zhì)水平提高了豬背最長肌CAST mRNA表達量;對P94-NFκB信號途徑上游調(diào)節(jié)者顯著降低了P94和IκB mRNA表達量分別起到降低和提高的作用。

③豬背最長肌剪切力與IκB mRNA表達量呈顯著正相關(guān)、與 P94、NFκB mRNA表達量呈不顯著負相關(guān)，表明豬背最長肌P94-NFκB信號途徑在肌肉嫩度調(diào)控過程中發(fā)揮一定作用，但不是主要途徑。

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Author，ZHANG Yong，professor，E-mail:syndzhy@yahoo.com.cn

(編輯 王智航)

Dietary Protein Level A ffects the Tenderness and P94-NFκB Signaling Pathway of Longissim us Dorsi in Finishing Pigs

ZHANG Yong1CUIYan1TAO Liang1ZHU Yujing1DENG Ke1SUN Cui1SHAO Caimei2
(1.School of Animal Science and Veterinary，Shenyang Agricultural University，Shenyang110866，China;2.Liaoning Wellhope Agri-Tach Co.Ltd.，Shenyang110164，China)

The study was conducted to investigate the effect of dietary ideal protein level on tenderness and mRNA expression levels of P94-NFκB signaling pathway related to proteins and CAST of longissimus dorsi in finishing pigs.Ninety crossbred pigs(Duroc × Landrace × Large white，about 50 kg BW)were random ly allocated into 3 treatments with 3 replicates per treatment and 10 heads per replicate.Pigs in the three treatments were fed dietswith the same energy level and ideal protein levels at12%，16%and 20%，respectively.A ll pigs were slaughtered after 58 days experiment and then muscle samples were collected for the analysis of shear force，meanwhile，mRNA expression levels of P94，NFκB，IκB and CAST of longissimus dorsi in pigs were determ ined by real-time PCR.The results showed as follow s:1)there were significant effects of dietary protein level on shear force and the mRNA expression levels of P94，NFκB，IκB and CAST of longissimus dorsi(P＜0.05);with the increasing of dietary protein level，the shear force and mRNA expression level of IκB and CAST were increased，but that of P94 and NFκB were decreased.2)the shear force was positively correlated with the mRNA expression levels of IκB(coefficient correlation=0.513，P＜ 0.05)and CAST(coefficient correlation=0.816，P＜0.01).3)ThemRNA expression level of CAST was negatively correlated with that of P94(coefficient correlation= －0.496，P＜0.05)，but positively correlated with that of IκB(coefficient correlation=0.710，P＜0.01).4)ThemRNA expression level of P94 was positively correlated with thatof NFκB(coefficient correlation=0.550，P＜0.05)，butnegatively correlated with thatof IκB(coefficient correlation= － 0.518，P＜ 0.05);the mRNA expression levels of IκB and NFκB were negatively correlated(coefficient correlation= －0.539，P＜0.05)to each other.The results indicate that high dietary protein level can increase the shear force and themRNA expression levels of CAST and IκB，but decrease the tenderness and themRNA expression level of P 94;P94-NFκB signaling pathway plays a role in the process of regulating muscle tenderness，but it is not themain pathway.［Chinese Journal of Animal Nutrition，2011，23(8):1342-1350］

protein level;CAST;P 94;NFκB;muscle tenderness

S828

A

1006-267X(2011)08-1342-09

10.3969/j.issn.1006-267x.2011.08.013

2011－02－14

國家自然科學(xué)基金“鈣蛋白酶調(diào)控豬體蛋白降解的信號途徑研究”(30972112)

張 勇(1972—)，男，甘肅武威人，教授，博士，碩士生導(dǎo)師，主要從事分子營養(yǎng)學(xué)與飼料資源開發(fā)利用研究。E-mail:syndzhy@yahoo.com.cn