切達奶酪粉部分替代魚粉對虹鱒幼魚生長性能、體成分及血漿生化指標的影響

鄒方起 徐美娜 王 嘉 薛 敏* 吳秀峰 鄭銀樺 王赤龍 吳立新

(1.中國農(nóng)業(yè)科學院飼料研究所國家水產(chǎn)飼料安全評價基地，北京 100081;2.大連海洋大學，大連 116023)

切達奶酪粉部分替代魚粉對虹鱒幼魚生長性能、體成分及血漿生化指標的影響

鄒方起1，2徐美娜1，2王 嘉1薛 敏1*吳秀峰1鄭銀樺1王赤龍1吳立新2

(1.中國農(nóng)業(yè)科學院飼料研究所國家水產(chǎn)飼料安全評價基地，北京 100081;2.大連海洋大學，大連 116023)

本試驗旨在研究用切達奶酪粉(cheddar cheese by-products，CCB)部分替代魚粉對虹鱒(Oncorhynchusmykiss)幼魚生長性能、體成分和血漿生化指標的影響。用切達奶酪粉分別替代基礎飼料中0、15%、30%和45%的魚粉蛋白質，同時逐漸降低豆油使用量，配成4個等氮等能的試驗飼料，并分別命名為C0、C15、C30、C45。選用初均重為(5.73±0.00)g的虹鱒幼魚640尾，隨機分為4組，每組設4個重復，每個重復40尾，在循環(huán)水養(yǎng)殖系統(tǒng)中養(yǎng)殖8周。結果表明，C15、C30組虹鱒幼魚的各項生長指標與對照組(C0組)相比均沒有顯著差異(P＞0.05)，而C45組虹鱒幼魚的日攝食量、增重率、特定生長率顯著低于對照組(P＜0.05)。C15、C30組虹鱒幼魚的肥滿度、肝體比、臟體比、體成分較對照組差異不顯著(P＞0.05)，而C45組虹鱒幼魚的魚體灰分含量顯著高于對照組(P＞0.05)。C30組虹鱒幼魚的各項血漿生化指標與對照組相比均沒有顯著差異(P＞0.05)。根據(jù)本試驗結果，切達奶酪粉可以在虹鱒幼魚飼料中替代30%的魚粉蛋白質(9.6%魚粉，同時使豆油的添加量由5%降至3%)而不顯著影響其生長性能、體成分和血漿生化指標。

虹鱒;切達奶酪粉;魚粉;蛋白質源

受厄爾尼諾現(xiàn)象和海洋漁業(yè)資源過度捕撈的雙重影響，以及全球養(yǎng)殖業(yè)的迅猛發(fā)展，國際魚粉價格不斷攀升。因此，尋求能夠部分或全部替代魚粉的蛋白質源用以降低養(yǎng)殖成本和養(yǎng)殖風險成為養(yǎng)殖業(yè)的最為關注的問題。

切達奶酪粉(cheddar cheese by-products，CCB)，商品名為奇飼粉(cheese plus cheese)，是一種用食品工業(yè)中的各種奶酪型產(chǎn)物包括干奶酪、奶酪殼、加工后的奶酪食品、奶酪粉和奶酪快餐產(chǎn)品制成的干燥而細滑的奶酪產(chǎn)品［1］。由于其粗蛋白質(34%左右)和粗脂肪(20%左右)含量高、氨基酸組成好，并具有較好的適口性，在高檔乳仔豬配合飼料中應用較多［2－3］，而在水產(chǎn)動物飼料中應用尚未見報道。由于切達奶酪粉成本相對較高(每噸12 000元左右)，目前僅適用于比較高檔的飼料，如肉食性水產(chǎn)動物飼料、仔豬教槽料和寵物飼料。切達奶酪粉作為一種新型的優(yōu)質飼料蛋白質源，由于其具有相對穩(wěn)定的價格和來源，在魚粉價格居高不下的情況下，研究其替代魚粉的意義顯得尤為重要。本試驗擬研究切達奶酪粉部分替代魚粉對虹鱒幼魚生長性能、體成分及血漿生化指標的影響，以期為切達奶酪粉在水產(chǎn)動物飼料中的應用提供理論依據(jù)和數(shù)據(jù)支持。

1 材料與方法

1.1 試驗飼料

試驗用切達奶酪粉由美國國際原料公司提供，魚粉為蒸汽低溫干燥白魚粉(Trident Seafoods，USA)，二者的營養(yǎng)水平及氨基酸組成見表1，其他飼料原料為市售商品原料。對所有原料進行營養(yǎng)成分分析后配制基礎飼料。試驗飼料分別用切達奶酪粉等蛋白質替代基礎飼料中0、15%、30%和45%的魚粉蛋白質，同時調(diào)整各組試驗飼料中豆油的使用量，使4組試驗飼料等氮等能且必需氨基酸組成一致，并分別命名為 C0、C15、C30和C45。飼料原料經(jīng)粉碎后過100目篩，用雙螺桿擠壓機(型號TSE－65)制成粒徑為2.0 mm的擠壓膨化沉性飼料，自然冷卻晾干后－20℃保存?zhèn)溆谩Ｔ囼烇暳辖M成及營養(yǎng)水平見表2，氨基酸組成見表3。

表1 切達奶酪粉和魚粉的營養(yǎng)水平及氨基酸組成(風干基礎)Table 1 Nutrient levels and am ino acid composition of CCB and fish meal(air-dry basis) %

1.2 試驗設計與飼養(yǎng)管理

試驗用魚購自北京市水產(chǎn)科學研究所，在室內(nèi)循環(huán)水養(yǎng)殖系統(tǒng)中先用基礎飼料馴養(yǎng)2周，待其適應后，挑選個體均勻、健康的虹鱒幼魚開始試驗。試驗魚初始體重為(5.73±0.00)g，隨機分為4組，每組4個重復，每個重復40尾，試驗期56 d。試驗在中國農(nóng)業(yè)科學院飼料研究所國家水產(chǎn)飼料安全評價基地室內(nèi)循環(huán)水養(yǎng)殖系統(tǒng)中進行(桶直徑80 cm、容積0.25 m3)，水源為曝氣井水。試驗養(yǎng)殖用水的溶氧保持在8 mg/L以上，水溫(18 ±2)℃，pH 7.5 ～8.0，氨態(tài)氮 ＜0.5 mg/L，日光照12 h。試驗期間每天分別在09:00和16:00各表觀飽食投喂1次。

1.3 測定指標與方法

試驗結束后，魚體空腹24 h后稱重，每桶取4尾魚(每組共16尾)，用于測定全魚粗蛋白質、粗脂肪、能量、灰分和水分;另取4尾分別測量體重和體長，然后解剖，稱量內(nèi)臟重和肝臟重;飼料、全魚的粗蛋白質、粗脂肪、能量、灰分和水分的測定方法參考AOAC(1995);飼料中16種氨基酸含量的測定采用國標方法(GB/T 18246—2000)，其中含硫氨基酸采用氧化水解，其他氨基酸采用酸水解進行前處理，之后使用日立氨基酸分析儀(型號Hitachi L－8900)進行測定。每個樣品測定2個重復。

表2 試驗飼料組成及營養(yǎng)水平(干物質基礎)Table 2 Com position and nutrient levels of experimental diets(DM basis) %

血漿的制備:每桶取3尾魚(每組共12尾魚)，用800 mg/kg三氯叔丁醇溶液麻醉后，用2 m L一次性滅菌針管從尾柄上方插入靜脈采血，注入到抗凝管中(草酸鉀－氟化鈉抗凝，冰浴操作)。在4℃下，4 000 r/m in離心10 m in后，吸取血漿并分裝后于－80℃保存?zhèn)錅y。

血漿中谷丙轉氨酶(alanine am inotransferase，ALT)、谷 草 轉 氨 酶 (aspartate am inotransferase，AST)、葡萄糖(glucose，GLU)、總膽固醇(total cholesterol，TC)、甘油三酯(triglyceride，TG)采用南京建成生物工程研究所生產(chǎn)的試劑盒測定，測定方法參照說明書。

1.4 計算公式

特定生長率(specific growth rate，SGR，%/d)=100×(ln魚體末重－ln魚體初重)/試驗天數(shù);

表3 試驗飼料氨基酸組成(風干基礎)Table 3 Am ino acid composition of experimental diets(air-dry basis) %

1.5 統(tǒng)計分析

試驗數(shù)據(jù)用STATISTICA 6.0軟件中ANOVA進行單因子方差分析，差異顯著性用Duncan氏法進行多重比較，顯著性水平為P＜0.05，試驗數(shù)據(jù)以平均值±標準誤表示。

2 結果與分析

2.1 切達奶酪粉部分替代魚粉對虹鱒幼魚生長性能的影響

由表4可知，C15、C30組虹鱒幼魚的各項生長指標與對照組(C0組)相比均沒有顯著差異(P＞0.05)，而 C45組的日攝食量、增重率、特定生長率顯著低于對照組(P＜0.05)，說明切達奶酪粉替代15%和30%的魚粉對虹鱒幼魚的生長性能未產(chǎn)生不利影響，而替代45%的魚粉則降低了虹鱒幼魚的生長性能。

表4 切達奶酪粉部分替代魚粉對虹鱒幼魚生長性能的影響Table 4 Effects of a partial replacement of fishmeal by CCB on growth performance of juvenile rainbow trout

2.2 切達奶酪粉部分替代魚粉對虹鱒幼魚形體指標的影響

由表5可知，各替代組(C15、C30、C45組)的臟體比、肝體比和肥滿度較對照組均沒有顯著差異(P＞0.05)，說明切達奶酪粉部分替代魚粉對虹鱒幼魚的形體指標沒有產(chǎn)生不良影響。C45組虹鱒的肝體比顯著低于C30組(P＜0.05)。

表5 切達奶酪粉部分替代魚粉對虹鱒幼魚形體指標的影響Table 5 Effects of a partial replacement of fish meal by CCB on physical parameters of juvenile rainbow trout %

2.3 切達奶酪粉部分替代魚粉對虹鱒幼魚體成分的影響

由表6可知，切達奶酪粉部分替代魚粉對虹鱒幼魚魚體粗蛋白質、粗脂肪、水分、總能含量均沒有顯著影響(P＞0.05)，但隨著替代水平的升高，魚體灰分含量有升高的趨勢，且C45組顯著高于對照組(P＞0.05)，說明15%和30%的替代水平不會對虹鱒幼魚體成分產(chǎn)生不利影響。

表6 切達奶酪粉部分替代魚粉對虹鱒幼魚體成分的影響Table 6 Effects of a partial replacement of fish meal by CCB on body composition of juvenile rainbow trout

2.4 切達奶酪粉部分替代魚粉對虹鱒幼魚血漿生化指標的影響

由表7可知，C30組虹鱒幼魚的各項血漿生化指標與對照組相比均沒有顯著差異(P＞0.05)，說明切達奶酪粉替代30%的魚粉對虹鱒幼魚的血漿生化指標未產(chǎn)生不利影響。C15組的血漿總膽固醇含量顯著高于 C45組(P＜0.05)，C30組的血漿甘油三酯含量顯著高于C45組(P＜0.05)，C15和C45組的血漿葡萄糖含量顯著高于對照組(P＜0.05)，各組的血漿谷草轉氨酶和谷丙轉氨酶活力未見顯著差異(P＞0.05)，說明隨著切達奶酪粉替代魚粉水平的升高，虹鱒幼魚血漿生化指標未表現(xiàn)出與替代水平相關的規(guī)律性變化。

表7 切達奶酪粉部分替代魚粉對虹鱒幼魚血漿生化指標的影響Table 7 Effects of a partial replacement of fish meal by CCB on plasma biochem ical indices of juvenile rainbow trout

3 討論

3.1 切達奶酪粉部分替代魚粉對虹鱒幼魚生長性能的影響

目前已有大量研究表明，動植物蛋白質源能夠在虹鱒飼料中部分替代魚粉蛋白質而不影響魚體的生長性能，但由于替代蛋白質源、飼料配方、魚粉質量以及試驗魚體品質和飼養(yǎng)環(huán)境的不同，在虹鱒飼料中各替代蛋白質源替代魚粉的比例也不盡相同。Yoshitom i等［4］研究認為，用磷蝦粉在虹鱒幼魚飼料中可以替代15%的魚粉蛋白質(智利魚粉，添加量58%)而不顯著影響虹鱒幼魚的生長性能;Aas等［5］研究指出，在虹鱒飼料中可以添加27%的菌體蛋白粉替代相應水平的魚粉蛋白質(北歐低溫蒸汽干燥魚粉，添加量63.5%)而不顯著影響虹鱒的特定生長率和飼料轉換率;Luo等［6］用脫酚棉籽蛋白替代秘魯魚粉的試驗表明，在虹鱒幼魚飼料中用脫酚棉籽蛋白可以替代50%的魚粉蛋白質(秘魯魚粉，添加量45%)而不顯著影響虹鱒幼魚的生長性能和體成分;Lee等［7］研究表明，在虹鱒飼料中通過補充無機磷酸鹽、限制性氨基酸和?；撬?，混合植物蛋白質源(大豆?jié)饪s蛋白和玉米蛋白粉)能夠完全替代45%美國鱭魚粉而不影響虹鱒的生長性能和飼料利用率;徐奇友等［8］用大豆分離蛋白和肉骨粉(1∶1)在虹鱒飼料中可以替代10%～20%的魚粉(秘魯蒸汽紅魚粉，添加量30%)而不顯著影響虹鱒的生長性能。然而，Gomes等［9］的研究表明，混合植物蛋白質源完全替代52.8%的葡萄牙紅魚粉后，虹鱒的末均重和特定生長率均顯著降低。由此可看出，虹鱒雖然是一種典型的肉食性魚類，但通過營養(yǎng)素平衡，在一定范圍內(nèi)也能夠較好地利用替代性蛋白質源而不影響其生長性能。對于肉食性魚類來說，替代魚粉存在的主要問題是適口性差［10］、限制性氨基酸含量低［11］以及消化率較低等［12］。切達奶酪粉作為一種奶酪制品，具有特殊的奶酪香味，含有牛奶中的營養(yǎng)物質如氨基酸、脂肪、礦物質(如鈣和磷)等，較利于動物吸收［1］。切達奶酪粉的必需氨基酸組成與魚粉非常接近，在魚類飼料中等蛋白質替代魚粉后不需要額外補充晶體氨基酸，使其作為魚類飼料優(yōu)質蛋白質源具有較大的優(yōu)勢。此外，切達奶酪粉脂肪含量達到20%，且主要為乳脂成分，對于提升動物飼料能量、節(jié)約油脂成本具有一定優(yōu)勢。在本研究中，隨切達奶酪粉替代魚粉的用量從零增加到28.03%，飼料中豆油的使用量可從5%下降到1%，飼料整體成本顯著下降。

3.2 切達奶酪粉部分替代魚粉對虹鱒幼魚攝食的影響

隨切達奶酪粉替代魚粉水平的增加，虹鱒日攝食量有所下降，45%替代魚粉組的日攝食量顯著低于對照組。這可能與切達奶酪粉本身含有一定劑量的著色劑(胭脂樹橙)有關。胭脂樹橙是一種黃色或橙色的類胡蘿卜素類著色劑，被廣泛應用于食品工業(yè)尤其是乳制品行業(yè)［13］。胭脂樹橙是切達奶酪的主要著色劑，而切達奶酪是切達奶酪粉的主要原料來源之一，因而切達奶酪粉呈一定的橙黃色［1］。隨飼料中切達奶酪粉添加量的增加，飼料的顏色也隨之加深。目前對于水產(chǎn)動物視覺攝食選擇的研究較少，榮長寬等［14］研究表明，對蝦對飼料的顏色攝食有偏好;Pichirikkat等［15］研究表明，環(huán)境顏色對黃顙魚的生長和攝食有重要影響，黃顙魚在深藍色和黑色環(huán)境下攝食較為旺盛。目前已有研究表明，視覺對肉食性魚類攝食影響較為顯著［16－17］，但切達奶酪粉的顏色(橘黃色)是否是影響虹鱒攝食的因素之一，尚需要進一步研究。用切達奶酪粉替代部分魚粉，除灰分以外魚體的其他成分均沒有顯著影響，同時，隨切達奶酪粉替代水平的升高，各替代組的蛋白質沉積率、能量沉積率與對照組沒有顯著差異，說明虹鱒能夠較好的利用切達奶酪粉中的營養(yǎng)物質，可將其消化、吸收并轉化為自身的營養(yǎng)成分，并未因魚體對切達奶酪粉蛋白質的吸收利用問題而造成氮排放量的增加。

3.3 切達奶酪粉部分替代魚粉對虹鱒幼魚血漿生化指標的影響

魚類的血液生化指標在一定程度上能夠反映魚體的生理和健康狀況，是魚類疾病診斷的依據(jù)之一。目前有關虹鱒幼魚血漿生化指標含量的標準范圍尚未見明確的研究報道，研究結論大多是根據(jù)試驗結果的差異性和前人研究的結果進行比較而得出。血糖高低可作為魚體營養(yǎng)狀況優(yōu)劣的指標，本試驗得出的血漿葡萄糖含量值(3.03～4.30 mmol/L)較陸陽等［18］在虹鱒幼魚飼料中用豆粕替代魚粉的血清葡萄糖含量值(0.61～1.15 mmol/L)偏高，而與 Li等［19］研究的虹鱒對照組血漿葡萄糖含量值(3.28～5.93 mmol/L)相近。萬雄萍等［20］研究表明，隨存放時間延長，血清葡萄糖含量較血漿葡萄糖含量下降明顯。因此，建議對于血糖等易降解指標，血清樣品需及時檢測，如需保存一定時間，建議以血漿為樣本更為準確。血漿轉氨酶活力的高低在一定程度上反映了肝臟受損傷的程度，肝臟受損傷后，血漿中的谷草轉氨酶和谷丙轉氨酶活力會升高，血漿中谷草轉氨酶和谷丙轉氨酶活力越高，表明肝臟受損傷程度越重。本試驗用虹鱒血漿測得的谷草轉氨酶(99.86 ～123.36 U/L)和谷丙轉氨酶活力數(shù)值(7.36 ～10.03 U/L)較陸陽等［18］用虹鱒血清測得的谷草轉氨酶(389.00～427.33 U/L)和谷丙轉氨酶活力數(shù)值(19.00～21.00 U/L)偏低;同時谷草轉氨酶活力數(shù)值還較Li等［21］用虹鱒血漿測得的對照組(251.35～279.54 U/L)和維拉帕米慢性攻毒組的數(shù)值(305.94～418.12 U/L)偏低。喻霞云等［22］研究表明，草酸鉀－氟化鈉抗凝劑不會影響谷草轉氨酶和谷丙轉氨酶的活力?？偰懝檀己透视腿ナ欠从硻C體內(nèi)脂肪代謝水平的重要指標，隨切達奶酪粉替代水平的升高，切達奶酪粉對虹鱒幼魚的脂肪代謝未產(chǎn)生明顯規(guī)律性影響，其總膽固醇含量值(6.32～8.10 mmol/L)與 Kaushik等［23］在虹鱒飼料中用大豆?jié)饪s蛋白和大豆粉替代部分魚粉后所得值(4.18～7.10 mmol/L)相近，而甘油三酯含量值(1.38～2.20 mmol/L)較 Romarheim等［24］在虹鱒飼料中用膨化豆粕替代部分魚粉后所得值(5.30～8.50 mmol/L)偏低，這可能是由于飼料的營養(yǎng)組成、養(yǎng)殖環(huán)境、試驗魚的生長階段以及樣品檢測方法不同等原因造成的。目前切達奶酪粉在魚類飼料上替代魚粉對虹鱒幼魚血液生化指標的影響尚未見相關報道，本文研究表明，除血漿葡萄糖外，切達奶酪粉替代45%以內(nèi)的魚粉并未對虹鱒幼魚的血液生化指標產(chǎn)生影響。

4 結論

在本試驗條件下，切達奶酪粉可以在虹鱒幼魚飼料中替代30%的魚粉蛋白質(9.6%魚粉，同時使豆油的添加量由5%降至3%)而不顯著影響其生長性能、體成分和血漿生化指標。

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*Corresponding author，professor，E-mail:xuemin@caas.net.cn

(編輯 菅景穎)

Effects of a Partial Rep lacement of Fish Meal by Cheddar Cheese By-products on Grow th Performance，Body Com position and Plasm a Biochem ical Indices of Juvenile Rainbow Trout(Oncorhynchusmykiss)

ZOU Fangqi1，2XU Meina1，2WANG Jia1XUE Min1*WU Xiufeng1ZHENG Yinhua1WANG Chilong1WU Lixin2
(1.Feed Institute Research，Chinese Academy of Agricultural Sciences，Beijing100081，China;2.Dalian Ocean University，Dalian116023，China)

An 8-week growth trialwas conducted to evaluate the effects of a partial replacementof fishmeal by cheddar cheese by-products(CCB)on growth performance，body composition and plasma biochem ical indices of juvenile rainbow trout(Oncorhynchus mykiss).Four isonitrogenous and isoenergetic diets were prepared with CCB to replace 0，15%，30%and 45%of protein supplied by fish meal and meanwhile the soybean oil was gradually decreased，and were named as C0，C15，C30 and C45，respectively.Forty juvenile rainbow troutwith initial average body weight of(5.73 ±0.00)g were random ly assigned to each tank with 4 replicates for each treatment in recirculation system.The results showed as follows:compared with control group(C0 group)，all growth indices of juvenile rainbow trout in C15 and C30 groupswere not significantly different(P＞0.05)，while dairy feed intake(AFI)，weight gain rate(WGR)and specific growth rate(SGR)of juvenile rainbow trout in C45 group were significantly decreased(P＜0.05).Condition factor(CF)，viscerasomatic index(VSI)，hepaticsomatic index(HSI)and body composition of juvenile rainbow trout in C15 and C30 groupswere not significantly different compared with control group(P＞0.05)，however，the body ash content of juvenile rainbow troutwas significantly higher than that in control group(P＜0.05).No significant differenceswere observed in plasma biochem ical indices between control group and C30 group(P＞0.05).In conclusion，CCB can replace 30%fishmeal protein(9.6%of fishmeal，and the soybean oil supplementation from 5%to 3%，concurrently)in juvenile rainbow trout diets with no significant effects on growth performance，body composition and plasma biochem ical indices.［Chinese Journal of Animal Nutrition，2011，23(8):1430-1438］

rainbow trout(Oncorhynchusmykiss);cheddar cheese by-products;fish meal;protein sources

S963

A

1006-267X(2011)08-1430-09

10.3969/j.issn.1006-267x.2011.08.024

2011－02－21

鄒方起(1984—)，男，山東莒縣人，碩士研究生，研究方向為水產(chǎn)動物營養(yǎng)與飼料。E-mail:zfq0125@163.com

*通訊作者:薛 敏，研究員，碩士生導師，E-mail:xuem in@caas.net.cn