薄層掃描法測(cè)定楓香槲寄生中齊敦果酸的含量

劉 航

四川省樂(lè)山食品藥品檢驗(yàn)所，四川 樂(lè)山 614000

桑寄生科槲寄生屬植物楓香槲寄生Viscum liquidambaricolum Hurm.F.，為我國(guó)傳統(tǒng)中藥“桑寄生”的商品藥材之一。該種植物植株形態(tài)特異，民間稱(chēng)之為螃蟹夾，又稱(chēng)扁枝寄生。由于寄生植物種類(lèi)的不同，楓香槲寄生在各地有不同的名稱(chēng)，如廣東稱(chēng)“楓香寄生”，廣西稱(chēng)“楓樹(shù)寄生”，四川稱(chēng)“桐寄生”。楓香槲寄生藥材功能為祛風(fēng)濕，補(bǔ)肝腎，強(qiáng)筋骨，安胎。用于風(fēng)濕痹痛，腰膝酸軟，胎動(dòng)不安，與《中國(guó)藥典》收載的“槲寄生”(Viscum coloratura(Komar.)Nakai)具有同等功效。經(jīng)研究，楓香槲寄生的化學(xué)成分主要有齊敦果酸、齊敦果酸酯、古柯二醇等三萜成分及肌醇，為進(jìn)一步準(zhǔn)確地鑒定楓香槲寄生，本文采用薄層掃描測(cè)定楓香槲寄生中齊敦果酸的含量，取得良好效果。

1 儀器與試藥

島津 CS－9301薄層掃描儀;定量毛細(xì)管 (U.S.A.by Drummond Scientific Co.);電子分析天平 (XS205DUa1Rabge);薄層硅膠G板 (青島海浪硅膠干燥劑廠);齊敦果酸對(duì)照品 (中國(guó)藥品生物制品檢定所提供，供含量測(cè)定用);楓香槲寄生 (筆者采集并經(jīng)成都中醫(yī)藥大學(xué)峨眉學(xué)院祝正銀教授鑒定);所用試劑均為分析純。

2 薄層色譜條件及掃描條件

吸附劑:硅膠G;展開(kāi)劑:環(huán)己烷－三氯甲烷－乙酸乙酯－甲醇 (20:5:8:0.1);顯色方法:噴以10%硫酸乙醇溶液，于110℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。掃描波長(zhǎng):λS=520nm，λR=700nm。

3 方法與結(jié)果

3.1 對(duì)照品溶液的制備

取齊墩果酸對(duì)照品適量，精密稱(chēng)定，加無(wú)水乙醇制成每1m1含0.5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。

3.2 供試品溶液的制備

取本品粗粉約1g，精密稱(chēng)定，置具塞錐形瓶中，精密加入鹽酸乙醇溶液 (1→10)30m1，稱(chēng)定重量，超聲處理1.5小時(shí)，放冷，再稱(chēng)定重量，用鹽酸乙醇溶液補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)。精密量取續(xù)濾液15m1，濃縮至約5m1，加水10m1，轉(zhuǎn)移至分液漏斗中，加三氯甲烷振搖提取5次(20m1、20m1、20m1、15m1、15m1)，合并提取液，回收溶劑至干，殘?jiān)尤燃淄?m1使溶解，置中性氧化鋁小柱(100～200目，5g，內(nèi)徑0.9cm)上，用三氯甲烷 －甲醇(80:1)30m1洗脫，棄去洗液，再用三氯甲烷－甲醇 (20:1)50m1洗脫，收集洗脫液，回收溶劑至干，殘?jiān)訜o(wú)水乙醇使溶解，轉(zhuǎn)移至5m1量瓶中，稀釋至刻度，搖勻，即得。

3.3 線性關(guān)系考察

精密吸取上述對(duì)照品溶液 (0.621mg/m1)1、2、3、4、6、8μ1，點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，展開(kāi)，取出，晾干，顯色，測(cè)定峰面積，見(jiàn)圖2。以峰面積為縱坐標(biāo)，齊敦果酸含量為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線并計(jì)算得回歸方程:Y=858.67X+229.89，r=0.9989，見(jiàn)圖 1。

3.4 穩(wěn)定性試驗(yàn)

精密吸取齊敦果酸對(duì)照品2μL，點(diǎn)于薄層板上，展開(kāi)，顯色，每隔15 min測(cè)定1次斑點(diǎn)的峰面積積分值，共測(cè)定5次，結(jié)果表明齊敦果酸顯色后在1h內(nèi)穩(wěn)定，RSD=1.11%。

3.5 精密度試驗(yàn)

用定量毛細(xì)管吸取對(duì)照品溶液2μ1，點(diǎn)相同濃度的5個(gè)點(diǎn)于同一塊薄層板上，展開(kāi)，顯色，掃描，測(cè)量峰面積的RSD為1.39%。結(jié)果表明:本法精密度良好。

3.6 重復(fù)性試驗(yàn)

精密稱(chēng)取扁枝槲寄生藥材 (峨嵋山市大廟柿子坪)樣品5份，每份約1g，按前述供試品制備方法及色譜條件進(jìn)行齊敦果酸含量測(cè)定，結(jié)果樣品5份平均含量為0.243%，RSD=1.39%。結(jié)果表明:本法重復(fù)性良好。

3.7 回收率試驗(yàn)

采用加樣回收方法測(cè)定回收率。取扁枝槲寄生藥材(峨眉山市大廟柿子坪)樣品5份 (測(cè)定含量為0.245%)，每份約 0.5g，精密稱(chēng)定;分別加入齊敦果酸對(duì)照品1.242mg，按正文供試品制備方法及色譜條件進(jìn)行齊敦果酸含量測(cè)定，結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 回收率試驗(yàn)結(jié)果

3.8 樣品測(cè)定

精密吸取供試品溶液5μ1、對(duì)照品溶液2μ1與4μ1，分別交叉點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，按上述條件測(cè)定6批樣品中齊敦果酸含量，結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 樣品的含量測(cè)定結(jié)果

4 討論

采用薄層掃描法測(cè)定楓香槲寄生中齊敦果酸的含量，其方法簡(jiǎn)便，結(jié)果準(zhǔn)確可靠，可以用于楓香槲寄生的質(zhì)量控制。

［1］國(guó)家藥典委員會(huì).中國(guó)藥典 (一部) ［S］.化學(xué)工業(yè)出版社，2005:258.

［2］中國(guó)科學(xué)院中國(guó)植物志編輯委員會(huì).中國(guó)植物志 (第24卷)［M］.科學(xué)出版社，1983:156.