Galectin-3、整合素 ανβ3 蛋白在人腦膠質(zhì)瘤中的表達(dá)及意義

(唐山市開灤醫(yī)院，河北唐山 063000)

腦膠質(zhì)瘤是神經(jīng)系統(tǒng)最常見的惡性腫瘤，2009年3～9月，我們采用免疫組化法檢測正常腦組織及不同級別腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞中的半乳糖凝集素-3(Galectin-3)、整合素 ανβ3蛋白表達(dá)，旨在探討其在腦膠質(zhì)瘤發(fā)生、發(fā)展及浸潤中的作用。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 本文40例腦膠質(zhì)瘤患者，男26例、女14例，年齡 13～68(45.90 ±15.51)歲、中位年齡49歲。根據(jù)2000年WHO制定的中樞神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤分級標(biāo)準(zhǔn)，腦膠質(zhì)瘤Ⅰ級12例，Ⅱ級11例，Ⅲ級13例，Ⅳ級4例。另取5例腦外傷行內(nèi)減壓術(shù)患者的正常腦組織作為正常對照。

1.2 檢測方法 選擇40例患者經(jīng)甲醛固定、石蠟包埋的腦膠質(zhì)瘤標(biāo)本，蠟塊連續(xù)切片，片厚4 μm。采用免疫組化S-P法染色，一抗為兔抗人Galectin-3、整合素 ανβ3多克隆抗體(抗體濃度均為1∶100)，DAB顯色，蘇木素復(fù)染。Galectin-3、整合素ανβ3蛋白以腫瘤細(xì)胞胞質(zhì)及胞膜出現(xiàn)棕色或棕黃色染色為陽性。每例切片在400倍視野下隨機(jī)選取最高密度區(qū)域的5個(gè)不重復(fù)視野，計(jì)數(shù)每個(gè)視野細(xì)胞總數(shù)及陽性染色細(xì)胞數(shù)，根據(jù)每例5個(gè)視野細(xì)胞總數(shù)及陽性細(xì)胞總數(shù)計(jì)算其陽性指數(shù)(LI)。腫瘤細(xì)胞陽性程度分級:陽性細(xì)胞數(shù)≤4%為陰性，5%～10%為弱陽性，11%～50%為陽性，＞50%為強(qiáng)陽性。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件，組間LI比較用t檢驗(yàn)，陽性率比較用χ2檢驗(yàn)，兩因素間的關(guān)系采用直線相關(guān)分析。P≤0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 Galectin-3蛋白表達(dá) 正常腦組織中Galectin-3蛋白無表達(dá)。腦膠質(zhì)瘤患者的Galectin-3蛋白主要表達(dá)于瘤細(xì)胞胞質(zhì)及胞膜，其中Ⅰ、Ⅱ級腦膠質(zhì)瘤患者陽性4例、弱陽性5例，陽性表達(dá)率為39.13%，LI為(5.65 ±3.47)%;Ⅲ、Ⅳ級腦膠質(zhì)瘤患者強(qiáng)陽性4例、陽性 7例、弱陽 2例，陽性表達(dá)率為76.47%，LI為(27.88 ±22.13)%。Ⅲ、Ⅳ級腦膠質(zhì)瘤的Galectin-3蛋白陽性表達(dá)率及LI均高于Ⅰ、Ⅱ級腦膠質(zhì)瘤(P均＜0.05)。

2.2 整合素ανβ3蛋白表達(dá) 正常腦組織中整合素ανβ3蛋白無表達(dá)。腦膠質(zhì)瘤患者的整合素ανβ3蛋白主要位于瘤細(xì)胞胞質(zhì)及胞膜，Ⅰ、Ⅱ級腦膠質(zhì)瘤患者陽性3例、弱陽性5例，陽性表達(dá)率為34.78%，LI為(5.35±3.46)%;Ⅲ、Ⅳ級腦膠質(zhì)瘤患者強(qiáng)陽性3例、陽性8例、弱陽性3例，陽性表達(dá)率為82.35%，LI為(23.53±17.56)%。Ⅲ、Ⅳ級腦膠質(zhì)瘤的整合素ανβ3蛋白陽性表達(dá)率及LI均高于Ⅰ、Ⅱ級腦膠質(zhì)瘤(P 均 ＜0.05)。

2.3 Galectin-3與整合素 ανβ3的相關(guān)性分析 繪制散點(diǎn)圖示Galectin-3與整合素ανβ3間呈直線趨勢(圖略);直線相關(guān)分析顯示，二者呈顯著正相關(guān)(r=0.966，P ＜0.05)。Galection-3 蛋白表達(dá)陽性者中，整合素 ανβ3蛋白陽性表達(dá)率為90.91%(20/22)，Galection-3蛋白表達(dá)陰性者中，整合素ανβ3蛋白陽性表達(dá)率為11.11%(2/18)。

3 討論

Galectin-3是一個(gè)31 kD的β半乳糖蛋白，存在于細(xì)胞內(nèi)外，主要與細(xì)胞內(nèi)的糖蛋白、細(xì)胞表面分子和細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)蛋白發(fā)生作用，降低腫瘤細(xì)胞與ECM黏附，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞侵襲，參與腫瘤的發(fā)生及發(fā)展［1］。Bresalier等［2］首先用免疫組化法觀察腦膠質(zhì)瘤患者的Galectin-3表達(dá)，發(fā)現(xiàn)Ⅰ、Ⅱ級腦膠質(zhì)瘤呈低表達(dá)，Ⅲ、Ⅳ級星形細(xì)胞瘤和膠母細(xì)胞瘤呈高表達(dá);提示Galectin-3表達(dá)水平與病理分級呈正相關(guān)［3］。Galectin-3在正常腦組織不表達(dá)，在腫瘤組織中表達(dá)，表明其對腫瘤周圍組織侵襲起重要作用。Camby等體外研究表明，Galectin-3與腦膠質(zhì)瘤的浸潤、遷移有關(guān)。本研究顯示，Ⅲ、Ⅳ級腦膠質(zhì)瘤患者的Galectin-3蛋白陽性表達(dá)率及LI均高于Ⅰ、Ⅱ級腦膠質(zhì)瘤，正常腦組織內(nèi)無表達(dá)，與以往報(bào)道一致。因此認(rèn)為，Galectin-3蛋白表達(dá)失調(diào)可能是腦膠質(zhì)瘤間變及膠質(zhì)瘤細(xì)胞獲得侵襲能力的標(biāo)志，其與腦膠質(zhì)瘤的生物學(xué)特性相符合。

整合素ανβ3是一種具有多功能的整合素分子［4］，細(xì)胞表面的整合素 ανβ3與其配體結(jié)合后，可介導(dǎo)細(xì)胞黏附和信號轉(zhuǎn)導(dǎo)，在腫瘤的浸潤和轉(zhuǎn)移中發(fā)揮作用。有研究發(fā)現(xiàn)，腫瘤細(xì)胞表面的ανβ3整合素細(xì)胞黏附受體與ECM成分黏附，引起腫瘤細(xì)胞游離或通過基底膜的過程，是惡性腫瘤浸潤、生長和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的始動(dòng)步驟［5］。研究發(fā)現(xiàn)，整合素 ανβ3在正常腦組織不表達(dá)，在腦膠質(zhì)瘤的星形細(xì)胞瘤中表達(dá)，且其表達(dá)水平與膠質(zhì)瘤分級和組織學(xué)類型密切相關(guān)［6］。本研究顯示，整合素 ανβ3蛋白在Ⅰ～ Ⅳ級腦膠質(zhì)瘤中呈不同程度的表達(dá)，其中Ⅲ、Ⅳ級腦膠質(zhì)瘤的陽性表達(dá)率明顯高于Ⅰ、Ⅱ級腦膠質(zhì)瘤，正常腦組織無表達(dá)，與以往報(bào)道一致。提示腦膠質(zhì)瘤惡性程度越高，整合素ανβ3蛋白表達(dá)水平越高，越有利于腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞侵襲性生長，促進(jìn)腫瘤的浸潤和轉(zhuǎn)移。整合素ανβ3蛋白表達(dá)可作為腦膠質(zhì)瘤惡性及侵襲程度的參考指標(biāo)。本研究還顯示，Galectin-3、整合素ανβ3蛋白陽性表達(dá)呈顯著正相關(guān)，均為腫瘤的浸潤、生長提供有利的生存內(nèi)環(huán)境。其機(jī)制可能為Galectin-3的功能性糖識別域與整合素α1β1上的半乳糖殘基結(jié)合，調(diào)節(jié)腫瘤細(xì)胞與ECM結(jié)合;高水平的Galectin-3可導(dǎo)致整合素與ECM配體結(jié)合障礙，從而調(diào)節(jié)細(xì)胞黏附，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞浸潤［7］。

綜上所述，Galectin-3、整合素 ανβ3可共同促進(jìn)腦膠質(zhì)瘤的發(fā)展、浸潤及血管生成，聯(lián)合檢測腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞中的Galectin-3、整合素ανβ3蛋白表達(dá)，對預(yù)測腦膠質(zhì)瘤的惡性程度、侵襲性及預(yù)后有重要意義。

［1］邢變枝，毛善平.Galectin-3在人腦星形膠質(zhì)瘤細(xì)胞中的表達(dá)［J］.卒中與神經(jīng)疾病，2010，11(6):381-384.

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