尿素試劑對(duì)葡萄糖測定有攜帶污染

付柳平

(劉公廟鎮(zhèn)衛(wèi)生院，江西 樟樹 331212)

筆者使用TC6060全自動(dòng)生化分析儀檢測同一標(biāo)本的腎功能常規(guī)和葡萄糖的過程中，發(fā)現(xiàn)尿素試劑對(duì)葡萄糖測定有攜帶污染，當(dāng)改變測定項(xiàng)目的分析順序，可有效避免尿素試劑對(duì)葡萄糖測定帶來的攜帶污染?，F(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 儀器 TC6060全自動(dòng)生化分析儀，江西特康科技有限公司生產(chǎn)。

1.2 試劑

1.2.1 尿素試劑 江西特康科技有限公司生產(chǎn)。單液體試劑，為酶聯(lián)速率法。試劑組成：Tris緩沖液115mmol/L,谷氨酸脫氫酶>800U/L，NADH0.35mmol/L，二磷酸腺苷1.5mmol/L，α-酮戊二酸7.5mmol/L，尿素酶>40000U/L，非反應(yīng)性填充物及穩(wěn)定劑適量。

1.2.2 葡萄糖試劑 江西特康科技有限公司生產(chǎn)。雙液體試劑，為GOD-POD法。試劑組成Ⅰ：磷酸鹽緩沖液110mmol/L，葡萄糖氧化酶250U/L，4-羥基苯甲酸10mmol/L，4-氨基安替比林0.3mmol/L。試劑Ⅱ：磷酸鹽緩沖液110mmol/L，過氧化物酶250U/L，非反應(yīng)性填充物及穩(wěn)定劑適量。

1.2.3 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液 江西特康科技有限公司生產(chǎn)。批號(hào)：542716443，靶值：5.05mmol/L。

1.3 方法

1.3.1 葡萄糖測定參數(shù) 方法：終點(diǎn)法；溫度：37℃；波長：510nm；樣本用量；4.0μl；試劑Ⅰ用量：240μl，反應(yīng)時(shí)間：120s；試劑Ⅱ用量：60μl，反應(yīng)時(shí)間：400s；檢測點(diǎn)數(shù)：3。

1.3.2 尿素測定參數(shù) 檢測方法：兩點(diǎn)法；溫度：37℃；主波長：340nm；樣本用量：3.0μl；試劑用量：300μl；反應(yīng)時(shí)間：60s；檢測點(diǎn)數(shù)：15。

2 結(jié)果

2.1 取葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液，單獨(dú)測定GLU10次，測得其均值為4.92mmol/L。

2.2 用尿素試劑當(dāng)作病人標(biāo)本，測定葡萄糖10次，測得其均值為22.83mmol/L。

2.3 攜帶污染試驗(yàn) 按先測定尿素，再測定葡萄糖的分析程序，測定葡萄糖10次，測得其均值為9.20mmol/L，平均偏差值為：9.20-4.92=4.28，偏差率為：4.28/4.92=87%。

2.4 改變項(xiàng)目分析順序，具體為：由原來尿素→葡萄糖，改變?yōu)槟蛩亍偰懝檀肌咸烟?。用多份混合血清單?dú)測定葡萄糖10次，測得其均值為5.47mmol/L，然后按上述改變后的分析順序測定葡萄糖10次，測得其均值為5.56mmol/L，平均偏差率為：(5.56～5.47)/5.47=1.65%。實(shí)驗(yàn)表明：通過改變項(xiàng)目分析順序，可以避免尿素試劑對(duì)葡萄糖測定帶來的攜帶污染。

3 討論

任何品牌的全自動(dòng)生化分析儀的自凈率都是有限的[1]，檢測試劑排序不當(dāng)就會(huì)出現(xiàn)不可逆轉(zhuǎn)的誤差[2]，直接影響檢測結(jié)果的可靠性[3]，很容易給臨床造成無效數(shù)據(jù)，影響臨床診療水平。尿素試劑對(duì)葡萄糖測定有攜帶污染，通過用尿素試劑當(dāng)作病人標(biāo)本進(jìn)行葡萄糖測定，其均值高達(dá)22.83mmol/L，而尿素試劑作為標(biāo)本分別與葡萄糖試劑Ⅰ，Ⅱ進(jìn)行葡萄糖測定，二者測定值均幾乎為零。具體原因，江西特康科技有限公司的工程師確認(rèn)為尿素試劑成分中的葡萄糖直接參加了葡萄糖氧化酶—過氧化物酶的反應(yīng)。因此我們在工作過程中，既要有敏銳的觀察力，又要對(duì)所用試劑的成分有足夠了解，設(shè)計(jì)最佳的項(xiàng)目分析順序，防止試劑針的攜帶污染。

[1]郭 杰.全自動(dòng)生化分析儀的精密度和交叉污染率的評(píng)價(jià)[J].現(xiàn)代檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2004,19(2):140-142.

[2]韓來新.總膽固醇試劑對(duì)總膽汁酸測定有攜帶誤差[J].現(xiàn)代檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2004,19(1):51-53.

[3]鄭家齊.編.醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)質(zhì)量控制[M].第1版,北京:人民衛(wèi)生出版社,1997:269-271.