7 種天然餌料對大西洋金黃水母（Chrysaora quinquecirrha）幼水母體存活和生長的影響

李達(dá)，王文章，周強(qiáng)，王瑋

（青島海洋科技館，山東 青島 266003）

大西洋金黃水母（Chrysaora quinquecirrha），又名大西洋海刺，屬刺胞動物門、缽水母綱、旗口水母目、游水母科、金黃水母屬，體色通常為不透明的白色[1]，顏色純凈，形態(tài)優(yōu)美，泳姿優(yōu)雅，具有極高的觀賞價值，已在許多水族館人工飼養(yǎng)和展示。

大西洋金黃水母分布于大西洋、印度洋沿岸以及西太平洋沿岸的溫暖水域[2]，常見于美國東部、墨西哥灣北部和印度東南等沿海[2-9]。在25℃～31℃的夏季沿海地區(qū)，大西洋金黃水母迅速生長[10]，大量出現(xiàn)在美國東部河口和沿海[4,5]。當(dāng)溫度接近15℃時，大西洋金黃水母開始從水面消失，溫度降至10℃時，仍有部分被發(fā)現(xiàn)于拖網(wǎng)上[11]。作為食物鏈的頂級捕食者，大西洋金黃水母利用傘體、觸手和口腕捕捉獵物[12]，以各種浮游生物如櫛水母、橈足類、枝角類、多毛類、魚卵和魚苗等為食[4,9,13-18]。利用高通量測序（Next-generation sequencing）方法對大西洋金黃水母消化道灌洗液、胃囊和觸手進(jìn)行DNA片段收集和測序，發(fā)現(xiàn)23 個不同的食物類群，包括以前未被記錄為被捕食物種的一些軟體生物。這些食物類群包括橈足類、魚類、櫛水母、海葵、片腳類、藤壺類、蝦類、多毛類、吸蟲、扁形蟲、棘皮動物、腹足類、雙殼類和半索動物等[19]。另有研究發(fā)現(xiàn)，大西洋金黃水母碟狀體對櫛水母幼體具有較明顯的選擇捕食性[20]。

在人工環(huán)境中飼養(yǎng)，溫度、鹽度、光照和pH 等環(huán)境因子顯著影響水母生長[21-27]。餌料種類和變化同樣影響水母生長發(fā)育和活力等[28-31]。處于生長期的幼水母體生長狀態(tài)能直觀反映出餌料是否滿足了營養(yǎng)需求。本研究通過對比單獨(dú)投喂不同天然餌料后大西洋金黃水母幼水母體的生長和存活情況，探究大西洋金黃水母幼水母體快速且健康生長的天然餌料種類，可為水母研究工作中的餌料結(jié)構(gòu)優(yōu)化提供策略和參考。

1 材料與方法

1.1 材料

大西洋金黃水母碟狀體及幼水母體均為本實(shí)驗(yàn)室自行培育。碟狀體經(jīng)過1～2 個月活鹵蟲無節(jié)幼體培養(yǎng)后，挑選形態(tài)完整，傘體收縮正常，活力強(qiáng)，傘徑（3.5±0.5）cm 的幼水母體作為實(shí)驗(yàn)對象，分別投喂海月水母（Aurelia aurita）碎塊、鹵蟲（Artemia）無節(jié)幼體、大黃魚（Larimichthys crocea）魚卵、大銀魚（Protosalanx hyalocranius）肉糜、糠蝦（Mysidacea）、橈足類（Copepods）及鹵蟲（Artemia）成蟲，其中海月水母和鹵蟲無節(jié)幼體為活體，其余為凍鮮。

1.2 方法

設(shè)7 個實(shí)驗(yàn)組，每組3 個平行，每個平行30 只幼水母體。所用實(shí)驗(yàn)缸為200 L 亞克力環(huán)形水母缸，進(jìn)缸24 h 內(nèi)不投喂。水母放入后，實(shí)時調(diào)節(jié)水流，使其口腕和觸手均自然伸長，無纏繞和卷曲。

每日上午10：00 投喂1 次。投喂量以水母胃囊飽滿為準(zhǔn)，每日調(diào)整投喂量。用巴氏吸管和亞克力空心管投喂。

每5 d 在投喂前從各缸隨機(jī)取3 只水母測量和記錄生長數(shù)據(jù)（不足3 只則以實(shí)際數(shù)量為準(zhǔn)）：用秒表計數(shù)其游動時的傘體收縮頻率；將水母放入實(shí)驗(yàn)托盤，使其傘體自然鋪平，口腕自然伸長，用吸水紙吸干體表水分后用游標(biāo)卡尺（美耐特MNT）測量傘徑和口腕長度；用電子天平（OHAUS，精度0.0001 g）稱量個體質(zhì)量。每日淘汰死亡、畸形、潰爛或傘體無收縮水母，記錄數(shù)量。

實(shí)驗(yàn)用源水均經(jīng)過沉淀、石英砂缸過濾和紫外燈殺菌。各實(shí)驗(yàn)組水溫維持在（22±1）℃，鹽度（32±1）。選用光源為90 W 太空燈（希帝萊品牌），每日光照12 h，昏暗12 h，光強(qiáng)變化模擬日出日落。每缸配有紫外殺菌燈、加熱裝置和制冷系統(tǒng)。每日傍晚吸污處理，清除剩余餌料和排泄物。每日使用滴流桶給所有實(shí)驗(yàn)缸補(bǔ)充淡水。每2 d 檢測各實(shí)驗(yàn)缸水中鹽度、亞硝態(tài)氮（NO2--N）和總氨氮（TAN）含量及pH，并通過換水及時調(diào)整水質(zhì)到理想指標(biāo)（鹽度32±1，亞硝態(tài)氮<0.02 mg/L，總氨氮<0.05 mg/L，pH 7.8～8.1）。每5 d 更換總水量的10%。實(shí)驗(yàn)為期60 d。

1.3 數(shù)據(jù)處理

實(shí)驗(yàn)結(jié)果用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。

存活率按下式計算：存活率/%=n1/n×100%。

式中，n1為存活的水母數(shù)量，n 為初始水母數(shù)量。

利用Excel 2010 和SPSS 20.0 統(tǒng)計分析軟件對各項(xiàng)數(shù)據(jù)進(jìn)行整理和分析，用Origin 2018 軟件進(jìn)行繪圖。用單因子方差分析法分析組間差異，用Student-Newman-Keul’s 檢驗(yàn)法分析組間顯著性，P<0.05 表示差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同餌料對大西洋金黃水母幼水母體存活率的影響

不同餌料對大西洋金黃水母幼水母體存活率的影響見圖1。海月組始終維持較高存活率；糠蝦組存活率在30 d 后開始出現(xiàn)明顯下降；橈足類組存活率在15 d 后開始緩慢下降；魚卵組和魚肉組存活率在15 d 后開始出現(xiàn)明顯下降；鹵蟲無節(jié)幼體組和鹵蟲成蟲組存活率自初始呈不斷下降。第60 d 各組存活率由高到低依次為：海月組（93.33±0.00）%、鹵蟲無節(jié)幼體組（17.78±1.92）%、鹵蟲成蟲組（11.11±1.92）%、魚卵組（4.44±1.93）%、魚肉組（4.44±1.93）%、糠蝦組（4.44±1.93）%和橈足類組（4.44±1.93）%。第60 d 差異性分析顯示，海月組、鹵蟲無節(jié)幼體組和鹵蟲成蟲組分別與其他組差異顯著（P<0.05），魚卵組、魚肉組、糠蝦組和橈足類組組間差異不顯著（P>0.05），與其他組差異顯著（P<0.05）。

圖1 不同餌料對大西洋金黃水母幼水母體存活率的影響Fig.1 Effects of different diets on survival rate of juvenile medusae of Atlantic sea nettle Chrysaora quinquecirrha

2.2 不同餌料對大西洋金黃水母幼水母體生長的影響

不同餌料對大西洋金黃水母傘徑、口腕長度、個體質(zhì)量和傘體收縮頻率的影響如表1 和圖2 所示。

表1 不同餌料對大西洋金黃水母幼水母體傘徑、口腕長度、個體質(zhì)量和傘體收縮頻率影響（30 日/60 日）Tab.1 Effects of different diets on test diameter,oral arm length,body weight and umbrella pulse frequency for juvenile medusae of Atlantic sea nettle Chrysaora quinquecirrha（30 days/ 60 days）

圖2 不同餌料對大西洋金黃水母幼水母體傘徑、口腕長度、個體質(zhì)量和傘體收縮頻率影響Fig.2 Effects of different diets on test diameter,oral arm length,body weight and umbrella pulse frequency for juvenile medusae of Atlantic sea nettle Chrysaora quinquecirrha

海月組和鹵蟲成蟲組幼水母體傘徑緩慢上升，最大值分別出現(xiàn)在第60 d 和第55 d；鹵蟲無節(jié)幼體組呈先快速上升后趨于平緩，最大值出現(xiàn)在第50 d；魚肉組呈先上升后趨于平緩，最大值出現(xiàn)在第20 d；魚卵組呈先上升后下降，最大值出現(xiàn)在第5 d；糠蝦組和橈足類組呈緩慢下降，最大值均出現(xiàn)在第15 d。第60 d 各組幼水母體傘徑由大到小依次為：鹵蟲無節(jié)幼體組、鹵蟲成蟲組、海月組、魚肉組、糠蝦組、魚卵組和橈足類組（圖2-a）。

海月組和鹵蟲成蟲組幼水母體口腕長緩慢上升，最大值分別出現(xiàn)在第60 d 和第40 d；鹵蟲無節(jié)幼體組呈先明顯上升后下降，最大值出現(xiàn)在第25 d；魚肉組呈先上升后趨于平緩，最大值出現(xiàn)在第15 d；糠蝦組、橈足類和魚卵組先上升后下降，最大值分別出現(xiàn)在第15 d、第30 d 和第5 d。第60 d 各組口腕長度由長到短依次為：鹵蟲成蟲組、鹵蟲無節(jié)幼體組、海月組、魚肉組、糠蝦組、橈足類組和魚卵組（圖2-b）。

鹵蟲無節(jié)幼體組幼水母體個體質(zhì)量明顯上升，最大值出現(xiàn)在第60 d；海月組和鹵蟲成蟲組呈緩慢上升，最大值分別出現(xiàn)在第60 d 和第55 d；魚肉組先上升后下降再趨于平緩，最大值出現(xiàn)在第20 d；魚卵組先上升后下降，最大值出現(xiàn)在第5 d；糠蝦組和橈足類組呈緩慢下降，最大值分別出現(xiàn)在第5 d和第0 d。第60 d 各組個體質(zhì)量由大到小依次為：鹵蟲無節(jié)幼體組、鹵蟲成體組、海月組、魚肉組、魚卵組、糠蝦組和橈足類組（圖2-c）。

海月組幼水母體傘體收縮頻率較為穩(wěn)定，呈緩慢下降，最大值出現(xiàn)在第25 d；鹵蟲無節(jié)幼體組、魚肉組和鹵蟲成蟲組呈持續(xù)下降，最大值分別出現(xiàn)在第0 d、第0 d 和第5 d（并列相同）、第5 d；糠蝦組和橈足類組先平緩再快速下降，最大值分別出現(xiàn)在第0 d 和第25 d；魚卵組先上升再下降，最大值出現(xiàn)在第10 d。第60 d 各組傘體收縮頻率由高到低依次為：海月組、魚卵組、鹵蟲無節(jié)幼體組、魚肉組、鹵蟲成蟲組、糠蝦組和橈足類組（圖2-d）。

3 討論

3.1 不同餌料對大西洋金黃水母幼水母體存活率的影響

本實(shí)驗(yàn)在統(tǒng)計存活率時，將畸形、潰爛或傘體不收縮的水母一并計入淘汰水母，統(tǒng)計結(jié)果反映了健康水母的最終數(shù)量。海水橈足類體內(nèi)不飽和脂肪酸含量高，并含有魚蝦蟹生長發(fā)育的必需氨基酸，是營養(yǎng)全面的海洋生物活餌料。投喂橈足類可提高人工育苗中海水魚蝦蟹幼體的成活率與活力[32,33]。橈足類富含二十碳五烯酸（EPA）、二十二碳六烯酸（DHA）、游離氨基酸和一些其他必需微量營養(yǎng)素以及消化酶，這些成分，尤其是不飽和脂肪酸是很多海洋魚類早期幼體正常發(fā)育的重要保證[33]。本實(shí)驗(yàn)中，橈足類組水母中后期的存活率下降，淘汰水母多傘體萎縮且無收縮活力，表現(xiàn)為營養(yǎng)缺乏，可能選用凍鮮橈足類為餌料，其中幼水母體所需的營養(yǎng)成分部分流失造成?？肺r組水母存活率曲線和淘汰水母狀態(tài)與橈足類組相似，同樣判斷為缺乏營養(yǎng)，糠蝦組水母進(jìn)食后排出較多的食物殘?jiān)?，這種情況在不同餌料組合對馬來沙水母（Sanderia malayensis）生長影響[30]的實(shí)驗(yàn)中同樣出現(xiàn)，認(rèn)為幼水母體的胃囊在消化糠蝦時存在一定困難。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，魚卵組水母在進(jìn)食后排出的部分魚卵殘?jiān)鼤恢别じ皆诳谕蟾亢涂谕笊希摻M淘汰水母多呈傘體萎縮且口腕嚴(yán)重萎縮，認(rèn)為與魚卵的高脂肪組成有關(guān)，其高黏稠度的餌料可能不利于水母的消化和殘餌排出，水母無法正常游動和消化代謝。鹵蟲無節(jié)幼體組和鹵蟲成體組淘汰水母多呈畸形，表現(xiàn)為統(tǒng)一的傘體翻折，且淘汰個體遍及整個生長期，原因尚不明確，有待進(jìn)一步研究。

膠質(zhì)類生物（水螅水母和海月水母碟狀體）在霞水母（Cyanea nozakii）胃囊中平均存留時間顯著短于橈足類和魚類，隨著橈足類、海月水母、魚類的體長增加,霞水母對其消化時間顯著增長[34]。本研究中，海月組水母存活率顯著高于其他組，且整體形態(tài)勻稱，認(rèn)為海月水母滿足該幼水母體營養(yǎng)，且易消化吸收。實(shí)驗(yàn)選用大銀魚魚肉并加工成肉糜投喂，意在有助于水母胃囊的消化，而該組水母進(jìn)食后仍然排出較多食物殘?jiān)ū憩F(xiàn)為光滑的膠質(zhì)團(tuán)顆粒），認(rèn)為魚糜消化不充分可能與實(shí)驗(yàn)水母的整體規(guī)格較小有關(guān)，也可能與膠狀肉質(zhì)有關(guān)。魚肉組淘汰水母個體多數(shù)已接近亞成體，表現(xiàn)為口腕萎縮且傘體活力差，認(rèn)為水母處于非營養(yǎng)缺乏導(dǎo)致的異常狀態(tài)，在后續(xù)實(shí)驗(yàn)中建議選用不同肉質(zhì)的魚肉種類來研究其對水母消化及生長的影響。

3.2 不同餌料對大西洋金黃水母幼水母體生長的影響

野外環(huán)境中，大西洋金黃水母食物選擇性較為廣泛[19]，人工飼養(yǎng)環(huán)境下，不僅要選擇滿足水母正常生長的餌料，還需對餌料的獲取難易以及對水質(zhì)的影響進(jìn)行權(quán)衡。

作為水母飼養(yǎng)研究的常用餌料，鹵蟲無節(jié)幼體營養(yǎng)豐富[35]且易被消化吸收[34]。在不同飼料對海月水母的生長性能影響實(shí)驗(yàn)中，發(fā)現(xiàn)鹵蟲無節(jié)幼體組生長性能最好，水母傘徑顯著高于其他各組[36]。本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，鹵蟲無節(jié)幼體組水母生長速度最快，其個體質(zhì)量指標(biāo)在后期表現(xiàn)出繼續(xù)生長的趨勢，具有一定生長潛力，且觀察到部分水母在第10 d 出現(xiàn)明顯性腺，認(rèn)為鹵蟲無節(jié)幼體能夠充分滿足該水母幼水母體生長所需營養(yǎng)。在第35 d 后，鹵蟲無節(jié)幼體組水母口腕長度普遍縮短且標(biāo)準(zhǔn)差變大，認(rèn)為與實(shí)驗(yàn)期間所觀察到部分組水母整體口腕過長導(dǎo)致相互纏繞并斷裂有關(guān)。海月組水母傘徑和個體質(zhì)量增長穩(wěn)定，兩項(xiàng)指標(biāo)均表現(xiàn)出繼續(xù)生長趨勢，傘體活力始終較強(qiáng)且穩(wěn)定，認(rèn)為海月水母同樣是該種水母幼水母體的優(yōu)質(zhì)餌料。海月水母本身含水量較大，單位體積內(nèi)其營養(yǎng)物質(zhì)總量相對較少，這也是導(dǎo)致海月組水母生長速度較慢的原因之一。鹵蟲成蟲組水母在飼養(yǎng)后期傘徑和個體質(zhì)量趨于平穩(wěn)，雖然兩項(xiàng)指標(biāo)均小于鹵蟲無節(jié)幼體組最大值，但其口腕長度相對較長，無生長異常狀態(tài)，因此認(rèn)為鹵蟲成蟲組水母在亞成體時期遇到生長瓶頸，可能餌料本身缺乏水母成體時期所需某種營養(yǎng)物質(zhì)導(dǎo)致，也可能受實(shí)驗(yàn)投喂頻次影響，水母日能量攝入相近于能量消耗。

魚肉作為水母飼料的研究報道較少。本研究發(fā)現(xiàn)，魚肉組水母在前期表現(xiàn)出明顯的生長優(yōu)勢，在0～5 d，其傘徑和個體質(zhì)量均大于其他組，在10～20 d階段，其傘徑和個體質(zhì)量均大于除鹵蟲無節(jié)幼體組外其他組（圖2）。通過對比發(fā)現(xiàn)，第45 d 時，魚肉組和海月組水母的傘徑和個體質(zhì)量基本一致，但魚肉組口腕長度只有海月組一半，傘體收縮頻率也明顯小于海月組。魚肉組在快速生長后出現(xiàn)的異常停滯狀態(tài)，原因尚不明確。實(shí)驗(yàn)所選魚肉為大銀魚肉，其對幼水母體前期生長具有的明顯促進(jìn)作用，認(rèn)為魚肉具有作為水母常規(guī)餌料的可研發(fā)性，利于降低水母飼養(yǎng)成本。

脂類是海水仔稚魚的必需營養(yǎng)要素，n-3 高度不飽和脂肪酸是海水仔稚魚的必需脂肪酸，直接影響其生長和存活，其中又以DHA 和EPA 尤為重要[37]。大黃魚魚卵含有豐富的脂肪酸和氨基酸[38]，DHA 含量遠(yuǎn)高鹵蟲無節(jié)幼體[35,38]。本研究中，魚卵組水母在投喂初期表現(xiàn)出較強(qiáng)的生長優(yōu)勢，認(rèn)為魚卵營養(yǎng)滿足幼水母體早期所需，而該組水母傘體收縮頻率在第10 d 明顯大于其他組的極值，說明魚卵中富含提升水母活力的營養(yǎng)物質(zhì)，可能與DHA 和EPA 有關(guān)。因此在日常飼養(yǎng)中，有望在水母的基礎(chǔ)餌料中額外添加指定營養(yǎng)物質(zhì)，以定向提高水母的生長速度和活力。研究表明，浮游橈足類是絕大多數(shù)幼魚和許多中上層經(jīng)濟(jì)魚類（如鯡Clupea pallasi、銀魚Salangidae、金色小沙丁魚Sardinella aurita、鮐Pneumatophorus japonicus 和竹莢魚Trachurus japonicus 等）及鯨類的主要天然餌料，又是底棲魚類的間接餌料[39]。橈足類具有豐富的磷脂，磷脂中具有高含量的高度不飽和脂肪酸和抗氧化物質(zhì)[40]。本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，橈足類組水母傘體收縮頻率在10～25 d 階段呈明顯升高，認(rèn)為橈足類中同樣含有提高水母活力的營養(yǎng)物質(zhì)。在實(shí)際飼養(yǎng)中，復(fù)合餌料投喂下的水母存活率和生長率往往大于單一餌料投喂，因此對于不同餌料的選擇和添加比例，以及添加劑的運(yùn)用，將是后續(xù)研究工作的重點(diǎn)之一。

3.3 結(jié)論

實(shí)驗(yàn)所選7 種天然餌料對大西洋金黃水母幼水母體存活和生長具有明顯差異性影響：海月組存活率最高（>90%），其他組存活率皆在50%以下；鹵蟲無節(jié)幼體、海月水母和鹵蟲成蟲具有穩(wěn)定的生長促進(jìn)作用（生長速度鹵蟲無節(jié)幼體＞鹵蟲成蟲＞海月水母），其中鹵蟲無節(jié)幼體組和海月組具有繼續(xù)生長趨勢；大銀魚肉在初期具有明顯生長促進(jìn)作用；黃花魚卵在初期具有明顯生長促進(jìn)作用和傘體活力提升作用；糠蝦和橈足類無明顯生長促進(jìn)作用。