氯柳酊的制備與質(zhì)量控制

石繼和，劉武斌，許 斌

（1.貴州省銅仁地區(qū)人民醫(yī)院藥劑科，貴州 銅仁 554300； 2.貴州省銅仁地區(qū)藥品檢驗(yàn)所，貴州 銅仁 554300）

氯柳酊為醫(yī)院自制的一種外用酊劑，主要由氯霉素和水楊酸組成，具有殺菌、抑制霉菌、溶解角質(zhì)的作用，臨床用于治療頭皮糠疹、尋常痤瘡、毛囊炎、脂溶性皮炎等。其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中分別采用紫外分光光度法測(cè)定氯霉素和中和法測(cè)定水楊酸含量，方法費(fèi)時(shí)、煩瑣。為此，筆者參照2010年版《中國(guó)藥典（二部）》采用高效液相色譜法同時(shí)測(cè)定氯霉素和水楊酸含量，效果滿意，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 儀器與試藥

LC－20AD型高效液相色譜儀，SIL－20A型自動(dòng)進(jìn)樣器，AUW－120D型電子天平（日本島津）。氯霉素（南京白敬宇制藥有限責(zé)任公司，批號(hào)為090606）；水楊酸（鎮(zhèn)江前進(jìn)化工有限責(zé)任公司，批號(hào)為20100329）；氯霉素對(duì)照品（批號(hào)為130555－200602），水楊酸對(duì)照品（批號(hào)為100106－200303），均購(gòu)于中國(guó)藥品生物制品檢定所；75％乙醇（自制），乙腈為色譜純；氯柳酊（規(guī)格為100mL，批號(hào)分別為20100704，20100714，20100726，醫(yī)院自制）。

2 方法與結(jié)果

2.1 處方與制備

處方為氯霉素10g，水楊酸20g，75％乙醇適量，共制成1000mL。取氯霉素與水楊酸，加75％乙醇適量，攪拌使溶解，濾過(guò)，自濾器添加75％乙醇至1 000mL，攪勻即得。

2.2 一般質(zhì)量控制

2.2.1 性狀

本品為無(wú)色透明液體。

2.2.2 鑒別

氯霉素：取本品2mL，加1％氯化鈣溶液3mL與鋅粉50mg，置水浴上加熱10min，傾取上清液，加苯甲酰氯約0.1 mL，立即強(qiáng)烈振搖1min，加三氯化鐵試液0.5mL與三氯甲烷2mL，振搖，水層顯紫紅色；取本品5mL，加醇制氫氧化鉀試液2mL，防止乙醇揮散，置水浴上加熱15min，溶液顯氯化物的鑒別反應(yīng)。

水楊酸：取本品2mL，加三氯化鐵試液2滴，溶液顯紫堇色。

2.2.3 檢查

應(yīng)符合2010年版《中國(guó)藥典（二部）》附錄酊劑項(xiàng)下規(guī)定[1]。

2.3 含量測(cè)定

2.3.1 色譜條件

色譜柱：Dikma C18柱（200 mm×4.6 mm，5μm）；流動(dòng)相：0.1％庚烷磺酸鈉溶液（0.1％庚烷磺酸鈉溶液500 mL，加二甲基甲酰胺5 mL、冰醋酸0.5 mL，混勻）－乙腈（75∶25）；柱溫：室溫；檢測(cè)波長(zhǎng)：272 nm；流速：1.0mL/min；進(jìn)樣量：20μL。

2.3.2 溶液制備

分別精密稱取氯霉素對(duì)照品與水楊酸對(duì)照品，加適量乙醇溶解，用流動(dòng)相稀釋成每1mL含氯霉素50μg與水楊酸100μg的對(duì)照品溶液。充分搖勻氯柳酊樣品，精密量取1mL，置50mL量瓶中，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，精密量取上述溶液2.5mL，置10mL量瓶中，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，即得供試品溶液。按照氯柳酊的處方與制法，制備不含氯霉素與水楊酸的陰性樣品，按照供試品溶液制備方法制備陰性對(duì)照品溶液。

2.3.3 方法學(xué)考察

系統(tǒng)適用性與干擾性試驗(yàn)：精密量取對(duì)照品溶液、供試品溶液、陰性對(duì)照品溶液，在擬訂的色譜條件下各進(jìn)樣20μL。色譜圖見(jiàn)圖1。結(jié)果表明，陰性對(duì)照品溶液在上述色譜條件下不干擾氯霉素與水楊酸的含量測(cè)定，氯霉素與水楊酸分離度良好。

圖1 高效液相色譜圖

線性關(guān)系考察：精密稱取氯霉素對(duì)照品9.86 mg與水楊酸對(duì)照品19.6mg，置100mL容量瓶中，加乙醇溶解并用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，精密量取1，3，4，5，6，8，12mL，置10mL容量瓶中，加流動(dòng)相稀釋至刻度，制成氯霉素質(zhì)量濃度為9.86，29.58，39.44，49.30，59.16，78.88，118.32μg/mL與水楊酸質(zhì)量濃度為19.60，58.80，78.40，98.00，117.60，156.80，235.20μg/mL的對(duì)照品溶液。精密吸取上述溶液各20μL，注入液相色譜儀，以峰面積（A）對(duì)質(zhì)量濃度（C）進(jìn)行線性回歸，氯霉素與水楊酸的回歸方程分別為A=13.566+39.165C（r=0.999 8）和 A=18.55+7.522C（r=0.999 8）。結(jié)果表明，氯霉素與水楊酸檢測(cè)質(zhì)量濃度線性范圍分別為9.86～118.32μg/mL和19.60～235.20μg/mL。

精密度試驗(yàn)：取線性關(guān)系考察項(xiàng)下含氯霉素49.30μg/mL與含水楊酸98.00μg/mL的對(duì)照品溶液，按擬訂的色譜條件重復(fù)進(jìn)樣5次。結(jié)果氯霉素與水楊酸峰面積的 RSD分別為0.49％和0.44％（n=5），表明方法精密度較好。

重復(fù)性試驗(yàn)：取同一批樣品（批號(hào)為20100704），依法制備同一質(zhì)量濃度的供試品溶液6份并測(cè)定含量。結(jié)果氯霉素與水楊酸的RSD分別為0.34％和0.31％（n=6），表明方法重復(fù)性良好。

加樣回收試驗(yàn)：精密吸取已知含量的氯柳酊樣品（批號(hào)為20100704）6份，分別精密加入含氯霉素39.44，49.30，59.16μg/mL與含水楊酸78.40，98.00，117.60μg/mL的對(duì)照品溶液1mL，依法進(jìn)樣測(cè)定，記錄峰面積并計(jì)算回收率。結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 加樣回收試驗(yàn)結(jié)果（n=6）

穩(wěn)定性試驗(yàn)：取同一供試品溶液，室溫放置，分別于0，2，4，8，12，24h時(shí)依法進(jìn)樣，記錄峰面積。結(jié)果氯霉素與水楊酸的 RSD分別為0.58％和0.42％（n=6），表明供試品溶液在24h內(nèi)穩(wěn)定。

2.3.4 樣品含量測(cè)定

取3批樣品，依法制備供試品溶液。分別精密吸取對(duì)照品溶液、供試品溶液各20μL，按擬訂的色譜條件進(jìn)樣，測(cè)定氯霉素和水楊酸的峰面積，并按外標(biāo)法計(jì)算含量。結(jié)果批號(hào)為20100704，20100714，20100726的樣品中，氯霉素與水楊酸含量分別為標(biāo)示量的99.40％和99.80％，99.60％和100.20％，100.20％和100.60％。

3 討論

氯柳酊是由氯霉素與水楊酸為主藥配制的復(fù)方制劑，彭芳玲等[2]采用雙波長(zhǎng)法測(cè)定其中氯霉素的含量，效果滿意。筆者采用高效液相色譜法在擬訂色譜條件下同時(shí)測(cè)定氯霉素和水楊酸兩種成分的含量，方法學(xué)考察表明，結(jié)果準(zhǔn)確，方法簡(jiǎn)便、靈敏、重現(xiàn)性好。

[1]國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典（二部）[M].北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010：附錄7.

[2]彭芳玲，龍 榮.氯柳酊的制備及質(zhì)量控制[J].現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生，2006，22（5）：673.