非淀粉多糖酶對肉雞血液生化指標(biāo)和十二指腸形態(tài)學(xué)的影響

呂秋鳳 林樹梅 欒新紅 劉 梅 安嬌陽 曹雙 曹敏建

非淀粉多糖酶對肉雞血液生化指標(biāo)和十二指腸形態(tài)學(xué)的影響

呂秋鳳 林樹梅 欒新紅 劉 梅 安嬌陽 曹雙 曹敏建

以玉米、豆粕為基礎(chǔ)日糧，研究在正常能量水平日糧和低能量水平日糧中添加非淀粉多糖酶對肉仔雞血液生化指標(biāo)、免疫功能及十二指腸形態(tài)學(xué)的影響。試驗采用單因素完全隨機(jī)化設(shè)計，將400只1 d AA+肉雞隨機(jī)分成4組，即正對照組、負(fù)對照組、試驗1組和試驗2組。試驗結(jié)果表明：在正常能量水平的玉米-豆粕型日糧中添加非淀粉多糖酶，可顯著提高血清血糖濃度和胰島素及T3的含量(P＜0.05)，降低了尿素氮濃度和T4水平(P＜0.05)，提高了十二指腸絨毛長度和隱窩深度(P＜0.05)，但生長激素含量差異不顯著(P＞0.05)；在負(fù)對照組中添加非淀粉多糖酶，試驗2組降低了尿素氮濃度(P＜0.05)，且略低于正對照組水平，而十二指腸絨毛長度和隱窩深度達(dá)到正對照組水平。

非淀粉多糖酶；肉雞；血液生化指標(biāo)；十二指腸形態(tài)學(xué)

非淀粉多糖（non-starch polysaccharide，NSP）是植物組織中除淀粉以外所有碳水化合物的總稱,是植物性飼料中主要抗?fàn)I養(yǎng)因子之一。非淀粉多糖在腸道內(nèi)能結(jié)合大量水分，增加食糜黏度，阻礙消化酶與底物的接觸，延長食糜在腸道內(nèi)停留的時間，影響機(jī)體對飼料營養(yǎng)物質(zhì)的吸收利用率。添加適當(dāng)?shù)耐庠疵改軌蛳堑矸鄱嗵堑目範(fàn)I養(yǎng)作用，降低單位生產(chǎn)成本，提高飼料的轉(zhuǎn)化效率，進(jìn)而提高其生產(chǎn)性能。本試驗以玉米-豆粕型日糧為基礎(chǔ)日糧，研究在正常能量水平日糧和低能量水平日糧中添加非淀粉多糖酶對肉雞血清生化指標(biāo)及十二指腸絨毛長度、隱窩深度的影響，為非淀粉多糖酶的生產(chǎn)應(yīng)用和深入研究提供參考。

1 材料和方法

1.1 試驗材料

非淀粉多糖酶（含酸性纖維素酶1000 IU/ml；中性木聚糖酶10000 IU/m l、α-半乳糖苷酶100 IU/ml等）為湖南尤特爾生化有限公司生產(chǎn)的液態(tài)復(fù)合酶。日糧為遼寧禾豐牧業(yè)有限公司生產(chǎn)的肉雞玉米－豆粕型飼料。

1.2 試驗設(shè)計

本試驗采用單因素完全隨機(jī)化設(shè)計，選擇1日齡健康A(chǔ)A+肉雞400只，隨機(jī)分成4個處理組，每個處理5個重復(fù)，每個重復(fù)20只。分為正對照組（飼喂正常能量水平的玉米-豆粕型日糧）、負(fù)對照（正對照基礎(chǔ)上日糧能量降低0.29 MJ/kg）、試驗1組（正對照基礎(chǔ)日糧+100ml/t非淀粉多糖酶）、試驗2組（負(fù)對照基礎(chǔ)日糧+100ml/t非淀粉多糖酶）。

1.3 試驗日糧

參照NRC（1998）并結(jié)合生產(chǎn)實踐配制基礎(chǔ)日糧。日糧組成及營養(yǎng)成分見表1。

1.4 飼養(yǎng)管理

試驗雞采用立體籠養(yǎng)，人工持續(xù)光照，育雛時采用紅外燈供暖，保持正常溫度（第1周33～34℃,第2周27～31℃），其后視具體氣溫情況供暖；雞舍自然通風(fēng)，相對濕度保持在55%～65%；自由飲水和采食，按正常肉雞免疫程序免疫。試驗于沈陽農(nóng)大養(yǎng)雞場進(jìn)行，飼養(yǎng)期共42 d。

1.5 測定指標(biāo)

1.5.1 血液指標(biāo)

于42日齡時從每處理中隨機(jī)抽取10只雞（每重復(fù)2只），翼靜脈采血8ml，集入10ml離心管傾斜放置，讓血液自然凝固。在血凝0.5 h后以3000 r/min離心15min分離血清，收集離心管上層血清，于-20℃下保存，以測定各項生化和免疫指標(biāo)。其中T3、T4、胰島素、生長激素含量采用放免法測定；血糖、尿素氮濃度采用比色法測定。T3、T4、胰島素、生長激素試劑盒購于北京北方生物技術(shù)研究所，血糖和尿素氮試劑盒購于南京建成生物工程研究所。

1.5.2 十二指腸形態(tài)學(xué)指標(biāo)

表1 基礎(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)水平（風(fēng)干基礎(chǔ)）

于42日齡按每個重復(fù)取1只雞宰殺，截取小腸的十二指腸前段，用生理鹽水沖洗。然后把十二指腸在Bouin's液中固定最少48 h，按照常規(guī)方法進(jìn)行沖洗、脫水、透明、浸臘、包埋、切片、蘇木素-伊紅染色和封片。用光學(xué)顯微鏡（10×40倍下）觀察各組石蠟切片，用江蘇捷達(dá)801系列彩色多媒體形態(tài)學(xué)分析系統(tǒng)進(jìn)行拍照分析。

1.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析

采用SPSS16.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析，各試驗處理組中的數(shù)據(jù)以平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示,對方差分析顯著者做Duncan's法多重比較。

2 結(jié)果與分析

2.1 非淀粉多糖酶對肉雞血液生化指標(biāo)的影響(見表2)

如表2所示，試驗1組血糖含量比正對照組提高了34.3%（P＜0.05），試驗2組血糖含量比負(fù)對照組提高了21.7%（P＜0.05），且超過正對照組水平。試驗1組尿素氮含量比正對照組降低了25.0%（P＜0.05）；試驗2組尿素氮含量比負(fù)對照組降低21.0%（P＜0.05），且略低于正對照組水平；試驗1組生長激素含量比正對照組提高了4.7%（P＞0.05），試驗2組生長激素含量比負(fù)對照組提高了3.8%（P＞0.05），且超過正對照組水平；試驗1組胰島素含量比正對照組提高了20.4%（P＜0.05），試驗2組胰島素含量比負(fù)對照組提高了10.2%（P＞0.05），且超過正對照組水平；試驗 1組 T3水平比正對照組提高了10.03%（P＞0.05），試驗2組T3水平比正對照組提高了14.29%（P＞0.05）；試驗1組T4水平比正對照組降低了15.66%（P＞0.05），試驗2組T4水平比負(fù)對照組降低了13.26%（P＞0.05）。

表2 非淀粉多糖酶對肉雞血糖、尿素氮濃度及生長激素、胰島素含量的影響

2.2 非淀粉多糖酶對肉雞十二指腸絨毛長度和隱窩深度的影響（見表3）

如表3所示，試驗1組十二指腸絨毛長度與正對照組相比增長了47.13%，差異顯著（P＜0.05），試驗2組的十二指腸絨毛長度與負(fù)對照組相比增長了38.57%，差異顯著，且顯著高于正對照（P＜0.05）；試驗1組十二指腸隱窩深度與正對照組相比增長了27.62%，差異顯著（P＜0.05），試驗 2組十二指腸隱窩深度與負(fù)對照組相比增長了37.71%，差異顯著，且顯著高于負(fù)對照組（P＜0.05）。

表3 非淀粉多糖酶對肉雞十二指腸絨毛長度和隱窩深度的影響(μm)

3 討論

3.1 非淀粉多糖酶對肉雞血液生化指標(biāo)的影響

血糖是動物體內(nèi)的主要能源物質(zhì)，它可以直接氧化供給動物機(jī)體代謝活動所需能量。艾曉杰等研究發(fā)現(xiàn)，日糧中添加非淀粉多糖酶可以提高雛鵝、生長鵝血糖水平。高峰等在小麥基礎(chǔ)日糧中添加酶制劑顯著促進(jìn)了斷奶仔豬的生長，仔豬血清中的血糖濃度有上升趨勢。杜繼忠等報告，在肉雞玉米-雜粕型日糧中添加復(fù)合酶制劑有提高肉雞血清中血糖濃度的趨勢，但差異不顯著。Friesen等認(rèn)為，酶制劑可以提高淀粉的消化利用率，淀粉分解后以葡萄糖的形式吸收進(jìn)入血液，從而提高血糖濃度。本試驗中在肉雞日糧中添加非淀粉多糖酶能提高血糖濃度，正對照加酶組(試驗1組)與正對照組相比提高了34.3%（P＜0.05），負(fù)對照加酶組(試驗 2 組)明顯高于負(fù)對照組 21.7%（P＜0.05），且超過正對照組水平。原因在于非淀粉多糖酶的作用結(jié)果，促進(jìn)了非淀粉多糖的消化，從而使血糖濃度升高。

尿素氮是機(jī)體蛋白質(zhì)代謝的終產(chǎn)物之一，它可作為衡量機(jī)體蛋白質(zhì)代謝的指標(biāo)。一般認(rèn)為血液尿素氮水平反映飼料蛋白利用情況，尿素氮水平升高反映蛋白分解加強(qiáng)，水平降低表示蛋白質(zhì)合成沉積增加。本試驗結(jié)果表明，正對照加酶組尿素氮含量比正對照組降低了25.0%（P＜0.05），負(fù)對照加酶組尿素氮含量比負(fù)對照組降低21.0%（P＜0.05），且略低于正對照組水平。說明非淀粉多糖酶可促進(jìn)蛋白質(zhì)沉積。

韓正康報道，非淀粉多糖有抑制與生長和代謝有關(guān)的分泌機(jī)能的能力，日糧中添加非淀粉多糖酶，可提高動物機(jī)體的消化利用率和禽體外周血液代謝激素水平，同時促進(jìn)動物機(jī)體的生長。高峰等報道，大麥日糧中添加粗酶制劑可影響畜禽外周血液激素水平，提高甲狀腺素（T3和T4）、生長激素和胰島素水平，降低胰高血糖素水平，從而有利于增強(qiáng)畜禽營養(yǎng)物質(zhì)代謝，T3是家禽機(jī)體內(nèi)主要的代謝激素，與生長激素密切相關(guān)，T3水平升高，表明機(jī)體代謝水平增高。另據(jù)劉長忠等報告，在雛鵝日糧中添加0.2%和0.4%非淀粉多糖酶可以提高血糖濃度，分別提高了19.47%和13.15%（P＜0.05），胰島素的提高幅度分別為20.55%與22.83%（P＜0.05），T3提高幅度分別為 17.60%與 16.00%（P＜0.05）。而對生長激素、T4均無顯著的影響（P＞0.05）。非淀粉多糖酶能在一定程度上影響體內(nèi)的激素分泌，原因可能是酶提高了禽類對日糧養(yǎng)分的消化和吸收，進(jìn)而影響體內(nèi)代謝，使血液中代謝產(chǎn)物含量或成分改變，而這對體內(nèi)激素的合成和分泌有明顯影響；酶制劑作為微生物發(fā)酵產(chǎn)物，可能在分解食糜時降解產(chǎn)生了生物活性物質(zhì)，如生物活性肽或寡糖，這些生物活性物質(zhì)可能作用于黏膜細(xì)胞有關(guān)受體或腸壁神經(jīng)叢，也可能進(jìn)入血液循環(huán)中，作用于神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)的細(xì)胞受體而發(fā)生生理效應(yīng)，影響家禽的神經(jīng)內(nèi)分泌調(diào)節(jié)。本試驗還表明，在玉米-豆粕型日糧中添加非淀粉多糖酶能不同程度地提高肉雞胰島素、生長激素、T3的水平，降低了T4水平，與劉長忠等研究結(jié)果相一致。

3.2 非淀粉多糖酶對肉仔雞十二指腸絨毛長度和隱窩深度的影響

動物機(jī)體對養(yǎng)分的吸收和轉(zhuǎn)運的主要部位是小腸，小腸的形態(tài)結(jié)構(gòu)，特別是小腸腸絨毛高度、隱窩深度是衡量小腸消化吸收功能強(qiáng)弱的重要指標(biāo)。絨毛的長短決定其含有的成熟的絨毛細(xì)胞的數(shù)量，從而決定其對養(yǎng)分的吸收能力。絨毛越長則含有的成熟絨毛細(xì)胞越多，吸收能力越強(qiáng)。本次試驗結(jié)果表明，正對照加酶組(試驗1組)絨毛長度比正對照組增加了47.13%（P＜0.05），負(fù)對照加酶組(試驗2組)絨毛長度比負(fù)對照組增加了38.57%，且顯著高于正對照組（P＜0.05）。隱窩，是由絨毛基部的上皮陷入固有層內(nèi)形成的管狀腺體，隱窩深度也是判定小腸吸收能力強(qiáng)弱的重要標(biāo)志，這是因為絨毛上皮細(xì)胞的再生主要來源于隱窩內(nèi)未分化細(xì)胞，未分化細(xì)胞自隱窩向絨毛頂端不斷移動，逐漸成熟，從而使絨毛頂端不斷脫落的細(xì)胞得以增生補(bǔ)充。如果隱窩較淺，則對頂端細(xì)胞的補(bǔ)充過程減慢，基部的細(xì)胞生成率降低，那么小腸對營養(yǎng)物質(zhì)的吸收減少。因而隱窩的深淺對保持腸絨毛的完整形態(tài)和正常機(jī)能有重要作用。非淀粉多糖與小腸上皮黏膜細(xì)胞上的糖蛋白相結(jié)合，形成一層加厚的不動水層，限制其吸收速度，同時能引起動物消化系統(tǒng)生理及形態(tài)上的改變，破壞小腸絨毛，造成小腸對營養(yǎng)物質(zhì)的吸收力下降。本次試驗結(jié)果表明，正對照加酶組隱窩深度比正對照組增加了27.62%（P＜0.05），負(fù)對照加酶組隱窩深度比負(fù)對照組增加了37.71%（P＜0.05），且顯著高于正對照組。試驗證明，非淀粉多糖酶顯著增加了肉仔雞十二指腸隱窩深度和絨毛高度，說明非淀粉多糖酶減輕或消除了非淀粉多糖的抗?fàn)I養(yǎng)因子，減輕食糜黏性，小腸絨毛受損減少。

若干篇，刊略，需者可函索）

（編輯：高 雁，snow yan78@163.com）

Q556+.2

A

1001-991X（2011）16-0031-03

呂秋鳳，沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)畜牧獸醫(yī)學(xué)院，博士，副教授，110866，沈陽市沈河區(qū)東陵路120號。

林樹梅、欒新紅、劉梅、安嬌陽、曹雙、曹敏建，單位及通訊地址同第一作者。

2011-06-28