隱孢子蟲病的中藥防治研究進(jìn)展

陳 靜，沈克飛

(重慶市畜牧科學(xué)院，重慶 400015)

隱孢子蟲病(Cryptosporidiosis)是由隱孢子蟲(Cryptosporidium)引起的一種呈世界性分布的機(jī)會(huì)致病性人獸共患原蟲病，主要臨床癥狀表現(xiàn)為腹瀉，在免疫正常的個(gè)體引起自限性腹瀉，在免疫功能低下或缺陷的個(gè)體則引起漸進(jìn)性致死性腹瀉。自Tyzzer于1907年首次發(fā)現(xiàn)小鼠隱孢子蟲(Cryptosporidium muris)以來(lái)，相繼在人、哺乳動(dòng)物、禽類、爬行類和魚類等體內(nèi)發(fā)現(xiàn)隱孢子蟲病原。目前隱孢子蟲病已被列為引起人類最常見(jiàn)的6種腹瀉病之一，美國(guó)疾病預(yù)防控制中心將其列為B類病原［1-2］。

對(duì)于隱孢子蟲病的治療藥物，國(guó)內(nèi)外學(xué)者做了大量的篩選研究，但到目前為止，該病仍無(wú)特效治療藥物［1］。由于化學(xué)藥物在治療隱孢子蟲病時(shí)療效不顯著或療效有限，我國(guó)科研人員致力于中草藥抗隱孢子蟲病方面的研究，并取得了一定的成績(jī)。以下對(duì)中藥抗隱孢子蟲病方面的研究做簡(jiǎn)單介紹，以期對(duì)防治有所幫助。

1 單味中藥提取物

1.1 大蒜素 大蒜素(Allicin)是大蒜鱗莖中的主要功能成分，是多種烯丙基有機(jī)硫化物復(fù)合體，具有多種生物學(xué)功能。藥理和臨床研究表明，大蒜素具有廣譜抗菌、增強(qiáng)機(jī)體免疫系統(tǒng)功能、抗癌、防治心腦血管疾病、抗氧化、保肝、抗原蟲等作用［3］。近年研究發(fā)現(xiàn)其對(duì)隱孢子蟲病具有較好的治療作用。

張珍等［4］研究表明，大蒜素能減少免疫抑制合并隱孢子蟲感染小鼠糞便排出卵囊的數(shù)量，可以提高地塞米松磷酸鈉注射液(DEX)致免疫功能低下小鼠的CD+4T細(xì)胞水平，提高機(jī)體CD+4/CD8比值，促進(jìn)腸道粘膜sIgA的產(chǎn)生，降低外周血sIL-2R水平。劉錦華等［5］在對(duì)大蒜素抗隱孢子蟲的免疫機(jī)制觀察研究中發(fā)現(xiàn)大蒜素膠囊50 mg/kg灌胃給藥4次，或注射液腹腔注射給藥4次，均明顯提高小鼠吞噬細(xì)胞對(duì)雞紅細(xì)胞的吞噬率和吞噬指數(shù)，使小鼠巨噬細(xì)胞吞噬功能具有增強(qiáng)作用，說(shuō)明大蒜素能夠增強(qiáng)患病小鼠的免疫功能。沈玲君等［6］、楊碩平等［7］分別用大蒜素治療嬰幼兒隱孢子蟲感染性腹瀉，取得滿意療效。吳位珩等［8］研究結(jié)果表明大蒜素與恩諾沙星合并用藥治療山羊隱孢子蟲病，治愈率較單用大蒜素治愈率高。

1.2 苦參堿 苦參堿(Matrine)是苦參的主要有效成分，還存在于苦豆子(Sophora alopecuroides L.)、廣豆根(S.subprostrata Chun et T.Chen)中［9］。研究發(fā)現(xiàn)苦參堿具有抗心律失常、抗炎、抗腫瘤、抗纖維化、升高白細(xì)胞等多種藥理活性，其制劑已被廣泛應(yīng)用于臨床。章剛等［10］研究了苦參堿對(duì)隱孢子蟲體內(nèi)外感染的抑制作用，體外藥效試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)0.3 mg/mL的苦參堿無(wú)細(xì)胞毒性且體外抑蟲率為56.64%，體內(nèi)藥效試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)50(mg·kg-1)/d的苦參堿顯著降低了小鼠的排隱孢子卵囊數(shù)，結(jié)果證明苦參堿對(duì)微小隱孢子蟲有明顯的治療作用。

1.3 黃芪 黃芪味甘，性微溫，可生用或炙用，為常用的補(bǔ)虛中藥，具有補(bǔ)氣固表，利尿排毒、提高機(jī)體免疫力，抵御疾病，增強(qiáng)體質(zhì)，抗氧化延緩衰老，改善心功能狀態(tài)，抗病毒，抗癌等功能［11］。高庚渠等［12］探討了黃芪對(duì)雛雞隱孢子病的治療作用，研究發(fā)現(xiàn)黃芪煎液0.1 mL/只(1 mL黃芪煎液中含1 g黃芪原藥)減輕了雛雞隱孢子蟲病的臨床癥狀，

降低了隱孢子蟲病的發(fā)病率和死亡率，使總排卵囊量減少及顯露期縮短;可以促進(jìn)雛雞法氏囊和脾臟發(fā)育，提高雛雞的免疫力，對(duì)雛雞隱孢子蟲病有一定防治作用。

1.4 銀杏酸 銀杏酸(Ginkgolic acids，GAs)是從銀杏外種皮中提取的天然化合物，前期研究已證明其具有抗菌、抗蟲、抗腫瘤的功效。吳亮［1］采用Real-time PCR技術(shù)和透射電子顯微鏡研究GAs體外抗隱孢子蟲增殖效果，發(fā)現(xiàn)GAs抗隱孢子蟲體外增殖效果顯著。蟲體經(jīng)5 μg/mL GAs作用48h后，蟲體數(shù)僅為未加藥對(duì)照組的0.66%，并且多數(shù)蟲體已趨于萎縮，HCT-8細(xì)胞形態(tài)未見(jiàn)明顯改變。并且GAs與硝唑尼特(Nitazoxanide，NTZ—美國(guó)FDA唯一批準(zhǔn)的口服抗隱孢子蟲藥物)抗隱孢子蟲增殖效果相似。

2 復(fù)合制劑

2.1 苦參合劑 苦參合劑主藥均為苦參，但組方不一。史長(zhǎng)松等［13］研究報(bào)道一定劑量的苦參合劑(組方:苦參、秦皮、黃柏、麥芽)對(duì)大鼠隱孢子蟲感染有預(yù)防作用?？瓜x機(jī)制可能為:①苦參合劑直接作用于蟲體。研究報(bào)道，苦參合劑能進(jìn)入隱孢子蟲卵囊內(nèi)，可能對(duì)隱孢子蟲卵囊內(nèi)的子孢子具有一定殺滅作用。②苦參總堿抑制隱孢子蟲DNA合成，使宿主細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)和功能得以恢復(fù)，細(xì)胞膜的通透性降低，細(xì)胞膜代謝功能改善。③提高機(jī)體免疫力。崔巍等［14］用苦參合劑(組方:苦參、黃芪、百部、檳榔和葛根等)治療兒童隱孢子蟲病患者，用藥后發(fā)現(xiàn)患者臨床腹瀉癥狀消失，排蟲轉(zhuǎn)陰，CD3、CD4淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化值顯著升高。研究說(shuō)明該合劑對(duì)隱孢子蟲的感染有較好的驅(qū)蟲效果，并能增強(qiáng)細(xì)胞免疫力。

2.2 補(bǔ)骨脂與雙氫青蒿素合劑 雙氫青蒿素為青蒿素的衍生物，能治療瘧疾、弓形蟲病、血吸蟲病等，也能調(diào)節(jié)機(jī)體免疫力［15］。陳玉鳳等［15］用補(bǔ)骨脂與雙氫青蒿素合劑治療小鼠隱孢子蟲病，發(fā)現(xiàn)該合劑可通過(guò)調(diào)節(jié)血清IFN-γ、全血CD+4、CD+3T細(xì)胞比例，以及提高腸組織NO濃度，參與宿主免疫應(yīng)答和炎癥反應(yīng)過(guò)程，抑殺蟲體，治療小鼠隱孢子蟲病。車頔等［16］觀察補(bǔ)骨脂及雙氫青蒿素殺滅隱孢子蟲的效果，發(fā)現(xiàn)中藥補(bǔ)骨脂和雙氫青蒿素對(duì)隱孢子蟲均有抑殺作用，后者殺蟲效果明顯，但合劑療效明顯優(yōu)于單劑療效，二者協(xié)同作用，共同參與宿主的免疫調(diào)節(jié)和炎癥修復(fù)過(guò)程。潘微［2］研究了補(bǔ)骨脂及雙氫青蒿素對(duì)隱孢子蟲感染小鼠抗原呈遞細(xì)胞功能調(diào)節(jié)作用，結(jié)果發(fā)現(xiàn)其單用和二者配伍均可通過(guò)提高抗原呈遞細(xì)胞的活性，使MHC-Ⅱ類抗原的表達(dá)增強(qiáng)，提高血清中IL-12p70的含量，進(jìn)而增強(qiáng)機(jī)體對(duì)隱孢子蟲感染的免疫應(yīng)答反應(yīng)，清除隱孢子蟲感染，以達(dá)到治療目的。并且試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)雙氫青蒿素抑殺蟲體效果最好。

2.3 當(dāng)歸補(bǔ)血湯 當(dāng)歸補(bǔ)血湯是金元時(shí)代李東恒所創(chuàng)的益氣補(bǔ)血方劑，由黃芪和當(dāng)歸兩味藥以5∶1比分組成，多用于治勞倦內(nèi)傷，氣血虛，陽(yáng)浮于外之虛熱證?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究發(fā)現(xiàn)其具有促進(jìn)造血、調(diào)節(jié)免疫功能、保護(hù)心腦血管等作用。姬云麗等［17］研究發(fā)現(xiàn)當(dāng)歸補(bǔ)血湯及其多糖能不同程度促進(jìn)隱孢子蟲感染小鼠腸道粘膜 IL-2、IFN-γ、IL-4及sIgA的分泌;腸道粘膜病理改變明顯好轉(zhuǎn)。證明當(dāng)歸補(bǔ)血湯及其多糖可調(diào)節(jié)小鼠腸道局部免疫并抑制隱孢子蟲感染。張曉莉等［18］研究報(bào)道該方劑使實(shí)驗(yàn)小鼠糞便卵囊排出數(shù)量明顯減少，腸粘膜損傷較模型組輕，提高小鼠CD+4T細(xì)胞水平，同樣促進(jìn)腸道粘膜sIgA的分泌，降低外周血sIL-2R水平。同樣得出結(jié)論該方劑對(duì)免疫抑制合并隱孢子蟲感染的小鼠的治療作用是通過(guò)提高機(jī)體免疫功能發(fā)揮的。

3 結(jié)語(yǔ)

隱孢子蟲病在多個(gè)國(guó)家的大范圍暴發(fā)，造成巨大的恐慌，而隱孢子蟲病的治療一直是世界性難題。目前公認(rèn)最佳的抗隱孢子蟲藥物硝唑尼特是美國(guó)FDA唯一批準(zhǔn)的口服抗隱孢子蟲藥物，可以用于治療1歲以上免疫功能正常的隱孢子蟲病患者［1］。但現(xiàn)有抗隱孢子蟲藥物仍存在毒副作用大，對(duì)免疫功能缺陷患者并發(fā)的嚴(yán)重隱孢子蟲病無(wú)治療效果等不足。我國(guó)使用中藥治療感染性疾病歷史悠久，許多中草藥中的活性成分都具有不錯(cuò)的抗菌和抗蟲效果，在抗隱孢子蟲病方面也表現(xiàn)出相當(dāng)?shù)膽?yīng)用潛力，通過(guò)深入全面的研究，可望開(kāi)發(fā)出新型抗隱孢子蟲病有效產(chǎn)品。

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