紅毛七化學(xué)成分的研究

但飛君， 蔡正軍， 田 瑛， 郭志勇， 褚立軍

(1.三峽大學(xué)天然產(chǎn)物研究與利用湖北省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室湖北宜昌 443002;2.軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院放射與輻射醫(yī)學(xué)研究所北京 100085)

紅毛七Caulophyllum robustumMaxim.為小檗科紅毛七屬植物類(lèi)葉牡丹的根及根莖［1－2］?！吨兴幋筠o典》中記載其性溫，味苦辛，具有理氣止痛、祛風(fēng)活血的功效，在民間主要用于風(fēng)濕疼痛、胃腹疼痛、跌打損傷、月經(jīng)不調(diào)等病的治療［2－5］。近年研究表明，紅毛七具有抑菌、抗炎、鎮(zhèn)痛、抗腫瘤、抗真菌、利尿降壓、抗病毒、抗心肌缺血、抗動(dòng)脈粥樣硬化、驅(qū)蟲(chóng)、殺軟體動(dòng)物、止癢、抗誘變、抗糖尿病、止痙攣、抗雄激素等作用。臨床主要用于風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、跌打損傷、月經(jīng)不調(diào)、痛經(jīng)、腹痛、引產(chǎn)、胃腹疼痛、胃病、軟組織損傷、痛風(fēng)等的治療［6－8］。作者對(duì)其化學(xué)成分進(jìn)行研究，分離得到7個(gè)化合物，經(jīng)鑒定其結(jié)構(gòu)分別為:刺囊酸－α-L－吡喃阿拉伯糖苷(1)、常春藤皂苷元－3－O-α-L－阿拉伯吡喃糖苷(2)、葳嚴(yán)仙皂苷元－3－O-α-L－阿拉伯吡喃糖苷(3)、常春藤皂苷元－3－O-β-D－葡萄吡喃－(1→2)－α-L－阿拉伯吡喃糖苷(4)、β－豆甾醇(5)、羽扇豆醇(6)、膽甾醇(7)?；衔?為首次從本屬植物中分離得到，化合物5，6，7為首次從紅毛七中分離得到。

1 材料

Bruker AVANCE 400 MHz核磁共振波譜儀;Finnigin電噴霧質(zhì)譜儀;低溫冷凍干燥儀(LABCONCO);X－4數(shù)字顯示顯微熔點(diǎn)儀(溫度未校正)(北京泰克儀器有限公司);AL204電子天平(METTLWR TOLEDO);柱層析硅膠、薄層層析硅膠(青島海洋化工廠(chǎng));凝膠 Sephadex LH－20(北京歐亞新技術(shù)公司)。

藥材紅毛七于2007年7月采自湖北宜昌市長(zhǎng)陽(yáng)土家族自治縣，經(jīng)三峽大學(xué)生物技術(shù)研究中心王玉兵老師鑒定為小檗科紅毛七屬植物紅毛七Caulophyllum robustumMaxim.的根，植物標(biāo)本保存于三峽大學(xué)天然產(chǎn)物研究與利用湖北省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室。

2 提取分離

紅毛七干燥粉末3.6 kg，95%乙醇回流提取3次，每次2 h，減壓濃縮得浸膏1 347.8 g。浸膏以1∶1懸浮于水中，依次用石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇萃取，減壓回收溶劑，得石油醚萃取物50.3 g、三氯甲烷萃取物 29.8 g、乙酸乙酯萃取物33.2 g、正丁醇萃取物 489.4 g、水溶液浸膏 350.2 g。正丁醇萃取物(225 g)經(jīng)硅膠柱層析，三氯甲烷－甲醇(10 ∶1→5 ∶1)，三氯甲烷－甲醇－水(4 ∶1 ∶0.1→1 ∶1 ∶0.3)梯度洗脫，合并含有化合物 1、2、3、4的流分。經(jīng)反復(fù)硅膠柱層析和Sephadex LH－20柱層析得到化合物1(752.1 mg)、化合物2(152.1 mg)、化合物3(269.3 mg)、化合物 4(1586.1 mg)。乙酸乙酯萃取物(29.8 g)經(jīng)硅膠柱層析，石油醚－乙酸乙酯(50∶1→1∶1)，三氯甲烷－甲醇(20∶1→1∶2)，合并含有化合物5、6、7的流分。經(jīng)反復(fù)硅膠柱層析和重結(jié)晶，得化合物5(65.4 mg)、化合物6(57.6 mg)、化合物7(583.9 mg)。

3 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1 白色粉末，Liebermann－burchard和Molish反應(yīng)均呈陽(yáng)性，經(jīng)薄層酸水解，僅檢出L－阿拉伯糖，可能為三萜皂苷。正性ESI－MS在m/z627.3可見(jiàn)［M+Na］+離子峰，負(fù)性 ESI－MS 在m/z603.2可見(jiàn)［M－H］+離子峰，確定相對(duì)分子質(zhì)量為604。綜合1H－NMR、13C－NMR、ESI－MS 等數(shù)據(jù)推斷化合物的分子式為 C35H56O8。1H－NMR(MeOD)δ:5.33(1H，s，H－12)，5.23(1H，s，H－16)，4.94(1H，d，J=5.6 Hz，H－1′)，3.61(1H，dd，J1=4.4Hz，J2=13.7Hz，H－18)，1.82(3H，s，H－27)，1.19(3H，s，H－23)，1.17(3H，s，H－30)，1.05(3H，s，H－29)，1.02(3H，s，H－24)，1.00(3H，s，H－26)，0.86(3H，s，H－25);13CNMR(MeOH)δ:38.9(C－1)，26.5(C－2)，88.5(C－3)，39.6(C－4)，55.6(C－5)，18.5(C－6)，33.5(C－7)，39.9(C－8)，47.2(C－9)，37.0(C－10)，23.8(C－11)，125.1(C－12)，146.7(C－13)，42.1(C－14)，36.3(C－15)，75.1(C－16)，48.0(C－17)，41.3(C－18)，47.9(C－19)，31.8(C－20)，36.3(C－21)，32.9(C－22)，28.2(C－23)，17.9(C－24)，18.7(C－25)，19.4(C－26)，27.3(C－27)，182.8(C－28)，33.4(C－29)，24.6(C－30)，108.9(C－1′)，73.9(C－2′)，74.5(C－3′)，68.2(C－4′)，64.2(C－5′)。以上數(shù)據(jù)經(jīng)與文獻(xiàn)［9］報(bào)道的刺囊酸－α－L－吡喃阿拉伯糖苷波譜數(shù)據(jù)比較一致，故鑒定化合物1為刺囊酸－α－L－吡喃阿拉伯糖苷。

化合物2 白色粉末，Liebermann－burchard和Molish反應(yīng)均為陽(yáng)性，經(jīng)薄層酸水解，檢出L－阿拉伯糖和D－葡萄糖，可能為三萜皂苷。正性ESI－MS在m/z789.4 可見(jiàn)［M+Na］+離子峰，負(fù)性 ESI－MS 在m/z765.3可見(jiàn)［M－H］+離子峰，確定相對(duì)分子質(zhì)量為766。綜合1H－NMR、13C－NMR 等數(shù)據(jù)可推斷出化合物的分子式為 C41H66O13。1H－NMR(MeOD)δ:5.38(1H，s，H－12)，5.21(1H，d，J=7.2Hz，H－1′′)，5.19(1H，d，J=5.6Hz，H－1′)，3.30(1H，dd，J1=3.6 Hz，J2=13.2Hz，H－18)，1.12(3H，s，H－27)，0.92(3H，s，H－26)，0.88(3H，s，H－30)，0.85(3H，s，H－29)，0.76(3H，s，H－25)，0.66(3H，s，H－24);13CNMR(MeOH)δ:38.7(C－1)，26.1(C－2)，82.2(C－3)，43.5(C－4)，47.9(C－5)，18.5(C－6)，33.2(C－7)，39.8(C－8)，48.5(C－9)，36.9(C－10)，23.8(C－11)，122.9(C－12)，144.8(C－13)，42.2(C－14)，28.4(C－15)，23.6(C－16)，46.6(C－17)，41.9(C－18)，46.4(C－19)，30.9(C－20)，34.2(C－21)，32.9(C－22)，64.9(C－23)，13.4(C－24)，16.1(C－25)，17.4(C－26)，26.1(C－27)，180.2(C－28)，33.2(C－29)，23.7(C－30)，105.2(C－1′)，74.5(C－2′)，73.7(C－3′)，68.3(C－4′)，65.1(C－5′)，106.0(C－1′′)，76.3(C－2′′)，78.3(C－3′′)，71.4(C－4′′)，78.2(C－5′′)，62.5(C－6′′)。以上數(shù)據(jù)經(jīng)與文獻(xiàn)［10］報(bào)道的常春藤皂苷元－3－O-β-D－葡萄吡喃－(1→2)－α-L－阿拉伯吡喃糖苷波譜數(shù)據(jù)比較，故鑒定化合物2為常春藤皂苷元－3－O-β-D－葡萄吡喃－(1→2)－α-L－阿拉伯吡喃糖苷。

化合物3 白色粉末，Liebermann－burchard和Molish反應(yīng)均呈陽(yáng)性，經(jīng)薄層酸水解，僅檢出L－阿拉伯糖，可能為三萜皂苷。正性ESI－MS在m/z627.3可見(jiàn)［M+Na］+離子峰，負(fù)性 ESI－MS 在m/z603.2可見(jiàn)［M－H］+離子峰，確定相對(duì)分子質(zhì)量為604。綜合1H－NMR、13C－NMR和 DEPT 等數(shù)據(jù)推斷出化合物的分子式為 C35H56O8。1H－NMR(MeOD)δ:5.42(1H，s，H－12)，4.99(1H，d，J=7.2Hz，H－1′)，3.28(1H，dd，J1=3.6Hz，J2=13.2Hz，H－18)，1.24(3H，s，H－27)，1.03(3H，s，H－26)，1.01(3H，s，H－30)，0.95(3H，s，H－25)，0.94(3H，s，H－29)，0.93(3H，s，H－24);13C－NMR(MeOH)δ:39.0(C－1)，26.4(C－2)，83.2(C－3)，43.7(C－4)，47.8(C－5)，18.4(C－6)，33.1(C－7)，39.9(C－8)，48.4(C－9)，37.2(C－10)，24.1(C－11)，123.5(C－12)，145.3(C－13)，42.4(C－14)，28.6(C－15)，23.9(C－16)，46.8(C－17)，42.2(C－18)，46.6(C－19)，31.2(C－20)，34.4(C－21)，33.1(C－22)，64.7(C－23)，13.4(C－24)，16.4(C－25)，17.8(C－26)，26.4(C－27)，182.1(C－28)，33.5(C－29)，24.0(C－30)，106.3(C－1′)，72.9(C－2′)，74.5(C－3′)，69.7(C－4′)，66.8(C－5′)。以上數(shù)據(jù)經(jīng)與文獻(xiàn)［11］報(bào)道的常春藤皂苷元－3－O－α-L－阿拉伯吡喃糖苷波譜數(shù)據(jù)比較一致，故鑒定化合物3為常春藤皂苷元－3－O－α-L－阿拉伯吡喃糖苷。

化合物4 白色粉末，Liebermann－burchard和Molish反應(yīng)均呈陽(yáng)性，經(jīng)薄層酸水解，僅檢出L－阿拉伯糖，可能為三萜皂苷。正性ESI－MS在m/z643.4可見(jiàn)［M+Na］+離子峰，負(fù)性 ESI－MS 在m/z619.2可見(jiàn)［M－H］+離子峰，確定相對(duì)分子質(zhì)量為620。綜合1H－NMR、13C－NMR和DEPT等數(shù)據(jù)推斷化合物的分子式為 C35H56O9。1H－NMR(MeOD)δ:5.45(1H，s，H－12)，5.24(1H，s，H－16)，4.79(1H，d，J=6.8 Hz，H－1′)，3.62(1H，dd，J1=3.2Hz，J2=10.4Hz，H－18)，1.33(3H，s，H－27)，0.95(3H，s，H－30)，0.92(3H，s，H－29)，0.81(3H，s，H－26)，0.73(3H，s，H－25)，0.65(3H，s，H－24)，13C－NMR(MeOH)δ:38.8(C－1)，26.1(C－2)，83.3(C－3)，43.4(C－4)，47.6(C－5)，18.2(C－6)，33.1(C－7)，39.9(C－8)，47.2(C－9)，36.9(C－10)，24.9(C－11)，123.3(C－12)，145.1(C－13)，42.1(C－14)，36.2(C－15)，75.2(C－16)，48.7(C－17)，41.3(C－18)，47.5(C－19)，30.9(C－20)，36.2(C－21)，32.6(C－22)，64.9(C－23)，13.4(C－24)，16.5(C－25)，17.8(C－26)，27.6(C－27)，181.1(C－28)，33.2(C－29)，24.4(C－30)，106.3(C－1′)，72.6(C－2′)，74.9(C－3′)，69.4(C－4′)，65.9(C－5′)。以上數(shù)據(jù)經(jīng)與文獻(xiàn)［12］報(bào)道的葳嚴(yán)仙皂苷元－3－O－α-L－阿拉伯吡喃糖苷波譜數(shù)據(jù)比較，故鑒定化合物 4 為葳嚴(yán)仙皂苷元－3－O－α－L－阿拉伯吡喃糖苷。

化合物5 白色晶體，熔點(diǎn)147～149℃，Liehermann－Burcharcl反應(yīng)呈陽(yáng)性，Molish反應(yīng)呈陰性，可能為三萜或甾體類(lèi)化合物。EI－MS在m/z386可見(jiàn)分子離子峰［M］+，綜合1H－NMR、13C－NMR 等數(shù)據(jù)推斷出化合物的分子式為C27H46O。1H－NMR譜中，在 δ 0.68，0.83，0.87，0.95 和1.03 處出現(xiàn)5 個(gè)甲基信號(hào)峰，同時(shí)在δ5.33處有一個(gè)三重峰的烯質(zhì)子信號(hào)，δ3.51處有1個(gè)連氧的次甲基氫質(zhì)子信號(hào)。將化合物的氫譜、碳譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［14］中膽甾醇的波譜數(shù)據(jù)進(jìn)行比較，發(fā)現(xiàn)兩者基本一致。進(jìn)行薄層色譜對(duì)照，發(fā)現(xiàn)Rf值一致，故確定該化合物為膽甾醇。

化合物6 白色針狀晶體，熔點(diǎn)133～136℃，Liehermann－Burcharcl反應(yīng)呈陽(yáng)性，Molish 反應(yīng)呈陰性，可能為三萜或甾體類(lèi)化合物。綜合1H－NMR、13C－NMR、質(zhì)譜等數(shù)據(jù)推斷出化合物的分子式為C29H48O。1H－NMR 中，在 δ 0.55，0.80，0.80，0.82，0.85和1.03處出現(xiàn)6個(gè)甲基信號(hào)峰，其中兩組單峰，三組兩重峰和一組三重峰，同時(shí)在δ5.03處可見(jiàn)一個(gè)三重峰的烯質(zhì)子信號(hào)，在δ5.18(1H，dd，J=8.2)和δ 5.16(1H，dd，J=8.2)處有一對(duì)烯氫質(zhì)子，δ 3.62處有1個(gè)連氧的次甲基氫質(zhì)子信號(hào)。14CNMR 中，δ 117.4 和 139.5，129.4 和 138.1 處也出現(xiàn)兩對(duì)烯碳信號(hào)。將化合物的氫譜、碳譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［14］中β－豆甾醇的波譜數(shù)據(jù)進(jìn)行比較，發(fā)現(xiàn)兩者基本一致。進(jìn)行薄層色譜對(duì)照，發(fā)現(xiàn)Rf值一致，故確定該化合物為β－豆甾醇。

化合物7 白色針狀晶體，熔點(diǎn)176～178℃，Liehermann－Burcharcl反應(yīng)呈陽(yáng)性，Molish 反應(yīng)呈陰性，可能為三萜或甾體類(lèi)化合物。綜合1H－NMR、13C－NMR、質(zhì)譜等數(shù)據(jù)可推斷出化合物的分子式為C30H50O。1H－NMR 中，在 δ 0.73，0.79，0.83，0.95，097，1.03和1.68處出現(xiàn)7個(gè)甲基單峰信號(hào)峰，同時(shí)在 δ 4.57，4.69 處可見(jiàn)有一對(duì)的烯質(zhì)子信號(hào)，δ 3.17處有1個(gè)連氧的次甲基氫質(zhì)子信號(hào)。13C－NMR中，δ 109.6和150.9處也出現(xiàn)一對(duì)烯碳信號(hào)。將化合物的氫譜、碳譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［15］中羽扇豆醇的波譜數(shù)據(jù)進(jìn)行比較，發(fā)現(xiàn)兩者基本一致。進(jìn)行薄層色譜對(duì)照，發(fā)現(xiàn)Rf值一致，故確定該化合物為羽扇豆醇。

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