乙腦患兒血清和腦脊液中NSE含量變化與臨床的關(guān)系

李洪智

鄭州市第六人民醫(yī)院傳染科 鄭州 450005

乙腦患兒血清和腦脊液中NSE含量變化與臨床的關(guān)系

李洪智

鄭州市第六人民醫(yī)院傳染科 鄭州 450005

目的研究乙腦患兒血清和腦脊液中NSE含量變化的臨床意義。方法檢測(cè)46例乙腦患兒極期、恢復(fù)期血清和腦脊液中NSE含量,檢測(cè)23例對(duì)照組兒童血清和腦脊液中NSE含量。結(jié)果乙腦患兒極期血清和腦脊液中NSE含量在普通型、重型、對(duì)照組三組之間兩兩比較差異均有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;恢復(fù)期普通型乙腦患兒血清和腦脊液中NSE含量與對(duì)照組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;恢復(fù)期重型乙腦患兒血清和腦脊液中NSE含量與普通型、對(duì)照組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;各型乙腦患兒血清和腦脊液中NSE含量極期與恢復(fù)期比較差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;極期乙腦患兒血清和腦脊液中NSE含量變化呈正相關(guān)。結(jié)論乙腦患兒血清和腦脊液中NSE含量隨乙腦的發(fā)生發(fā)展緩解而變化,其增高程度與病情的嚴(yán)重程度呈正相關(guān)。檢測(cè)NSE水平對(duì)判定乙腦患兒腦損傷程度及預(yù)后有重要參考價(jià)值。

book=13,ebook=111

流行性乙型腦炎;NSE;血清;腦脊液

流行性乙型腦炎(epidem ic encephalitis B)簡(jiǎn)稱乙腦,在國(guó)際上稱日本腦炎(Japaneseencephalitis)。是由乙型腦炎病毒引起的以腦實(shí)質(zhì)炎癥為主要病變的急性傳染病,主要分布在亞洲。臨床上以高熱、意識(shí)障礙、抽搐、病理反射及腦膜刺激征為特征。重癥者伴呼吸衰竭,病死率高達(dá)20%～50%,可有后遺癥。

神經(jīng)元特異性烯醇化酶(neuron-specific enolase,NSE)是存在于神經(jīng)細(xì)胞中的一種糖酵解酶,與細(xì)胞的分解成熟有關(guān),參與神經(jīng)細(xì)胞的能量代謝,神經(jīng)細(xì)胞受損后,NSE隨細(xì)胞的崩解而釋放入血液和腦脊液中,成為細(xì)胞受損的重要標(biāo)志。為研究NSE與乙腦患兒腦損傷程度的關(guān)系,本研究測(cè)定了乙腦患兒血清和腦脊液中NSE含量,并與對(duì)照組進(jìn)行比較與分析,探討NSE在乙腦發(fā)病機(jī)制中的作用。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象 (1)乙腦組：46例,均為 2009-07～2010-10在我院感染科住院的乙腦患兒,所有患兒血清乙腦特異性IgM抗體均為陽(yáng)性。臨床類型分為普通型、重型,其中普通型26例,重型 20例,臨床診斷和分型均符合《傳染病》診斷標(biāo)準(zhǔn)[1]。(2)對(duì)照組：血清及腦脊液取自 23例擬行外科手術(shù)治療的患兒,所有患兒排除神經(jīng)系統(tǒng)疾病、自身免疫性疾病、感染性疾病。2組患兒具體情況見(jiàn)表1。2組資料、性別、年齡比較無(wú)顯著性差異(P＞0.05)。

表1 2組患者基本情況

1.2 方法

1.2.1 標(biāo)本采集：分別于乙腦患兒極期、恢復(fù)期采集靜脈血3m L,當(dāng)日分離血清,分別于乙腦患兒極期、恢復(fù)期采集腦脊液2m L,分別裝于無(wú)菌EP管中,對(duì)照組患兒采集靜脈血3 m L和腦脊液2m L,當(dāng)日分離血清,分別裝于無(wú)菌EP管中,所有標(biāo)本均置于-70℃冰箱中保存,一次性檢測(cè)NSE的含量。

1.2.2 實(shí)驗(yàn)試劑和方法：ELISA檢測(cè)乙腦特異性IgM抗體試劑盒由上海傳染病醫(yī)院診斷試劑中心提供,NSE試劑盒由上海森雄科技實(shí)業(yè)有限公司提供,在有效期內(nèi)嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。EIA(IgM抗體捕獲法)檢測(cè)血清乙腦病毒特異性IgM抗體,采用雙抗體夾心法檢測(cè)NSE的含量。

2 結(jié)果

2.1 乙腦特異性IgM抗體檢測(cè)結(jié)果 乙腦組患者血清乙腦特異性IgM抗體陽(yáng)性率達(dá)100%,對(duì)照組陽(yáng)性率為0%(P＜0.01)。

2.2 NSE含量的變化

2.2.1 極期NSE含量的變化：見(jiàn)表2。極期各型乙腦患兒與對(duì)照組血清NSE含量比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,極期各型乙腦患兒血清NSE含量比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=28.296)。極期各型乙腦患兒與對(duì)照組腦脊液NSE含量比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,極期各型乙腦患兒腦脊液NSE含量比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=25.453)。

表2 極期各型乙腦患兒與對(duì)照組NSE測(cè)定結(jié)果 (ng/m L)

2.2.2 恢復(fù)期NSE含量的變化：見(jiàn)表3?；謴?fù)期普通型乙腦患兒與對(duì)照組血清NSE含量比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,恢復(fù)期重型乙腦患兒與對(duì)照組血清NSE含量比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=12.351)。恢復(fù)期普通型乙腦患兒與對(duì)照組腦脊液NSE含量比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義顯,恢復(fù)期重型乙腦患兒與對(duì)照組腦脊液NSE含量比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=13.204)。

表3 恢復(fù)期乙腦患兒與對(duì)照組NSE測(cè)定結(jié)果 (ng/m L)

2.2.3 各期乙腦患兒血淸NSE測(cè)定結(jié)果：見(jiàn)表4。普通型乙腦患兒血淸NSE含量極期與恢復(fù)期比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=4.506),重型乙腦患兒血淸NSE含量極期與恢復(fù)期比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=5.283)。

表4 乙腦患兒極期與恢復(fù)期血淸NSE測(cè)定結(jié)果 (ng/m L)

2.2.4 各期乙腦患兒腦脊液NSE測(cè)定結(jié)果：見(jiàn)表5。普通型乙腦患兒腦脊液NSE含量極期與恢復(fù)期比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=3.988),重型乙腦患兒腦脊液NSE含量極期與恢復(fù)期比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=4.395)。

表5 乙腦患兒極期與恢復(fù)期腦脊液NSE測(cè)定結(jié)果 (ng/mL)

2.2.5 乙腦患兒極期血漿和腦脊液中NSE含量變化相關(guān)分析：乙腦患兒極期血漿和腦脊液中NSE含量變化呈顯著正相關(guān)(r=0.683,P=0.001)。

3 討論

1965年科學(xué)家首次發(fā)現(xiàn)了一種大量存在于腦組織中但并不存在于非神經(jīng)組織中的可溶性酸性蛋白質(zhì),后來(lái)人們發(fā)現(xiàn)此種蛋白質(zhì)特異性存在于神經(jīng)元中,具有烯醇化酶活性,故將其命名為神經(jīng)元特異性烯醇化酶(neuron-specific enolase,NSE)[2]。

NSE是烯醇化酶基因超家族成員之一,是糖酵解的重要酶,主要參與糖酵解,可催化2-磷酸甘油裂解生成磷酸烯醇式丙酮酸和水,對(duì)體內(nèi)糖代謝和ATP的產(chǎn)生具有重要作用。烯醇化酶由α、β、γ三種亞基以二聚體的形式組成五種同工酶。其同工酶可分為 αα、ββ、γγ、αβ 、αγ。其中 γ亞基主要存在于神經(jīng)組織中,γγ、αγ組成的同工酶特異的存在于神經(jīng)元和神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞的胞漿中[3]。NSE占腦組織內(nèi)全部可溶性蛋白的1.5%,NSE含量有低到高依次為周圍神經(jīng)節(jié)、脊髓及腦。腦內(nèi)NSE含量遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于周圍神經(jīng)中,相差10～100倍。在低氧和一定濃度范圍內(nèi)NSE對(duì)神經(jīng)元有保護(hù)的作用,NSE可促進(jìn)多種神經(jīng)細(xì)胞的存活,是一個(gè)廣譜的神經(jīng)系統(tǒng)營(yíng)養(yǎng)因子。正常情況下,腦脊液和血漿中只含有微量NSE(4～10 ng/m L)[4]。但當(dāng)缺氧、缺血、中毒的情況下,神經(jīng)元細(xì)胞膜的完整性受到破壞,NSE不與細(xì)胞內(nèi)的肌動(dòng)蛋白結(jié)合,因此易從細(xì)胞內(nèi)釋放出來(lái),并迅速進(jìn)入細(xì)胞間隙,進(jìn)而釋放入腦脊液或通過(guò)血腦屏障進(jìn)入血管內(nèi),進(jìn)入外周循環(huán)。近年來(lái),NSE作為神經(jīng)元損傷的敏感性和特異性標(biāo)志,其與中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病的關(guān)系已引起國(guó)內(nèi)外學(xué)者的極大關(guān)注。多種神經(jīng)系統(tǒng)疾病,如腦腫瘤、腦外傷、細(xì)菌性腦膜炎、病毒性腦炎、結(jié)核性腦膜炎患者中都曾發(fā)現(xiàn)腦脊液和血液中NSE濃度升高,并且與腦損傷關(guān)系密切[5]。

本研究結(jié)果顯示：乙型腦炎患兒腦脊液和血清中NSE含量在極期顯著升高,腦脊液和血清中NSE含量在普通型、重型分別與對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;普通型與重型比較差異也有顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;乙型腦炎患兒腦脊液和血清中NSE含量在恢復(fù)期顯著下降,普通型、重型乙腦患兒極期與恢復(fù)期腦脊液和血清中NSE含量比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;恢復(fù)期普通型乙腦患兒腦脊液和血清中NSE含量與對(duì)照組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;恢復(fù)期重型乙腦患兒腦脊液和血清中NSE含量與對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;乙型腦炎患兒極期腦脊液與血清中NSE含量變化呈顯著正相關(guān)。上述結(jié)果提示腦脊液和血清中NSE含量隨乙腦的發(fā)生發(fā)展緩解變化,其增高程度與病情的嚴(yán)重程度呈正相關(guān)。

乙腦是一種以腦實(shí)質(zhì)炎癥為主要病變的急性傳染病,乙腦患兒大腦實(shí)質(zhì)受病毒的直接侵犯,引起神經(jīng)元細(xì)胞發(fā)生炎癥、水腫、壞死,進(jìn)而將胞漿內(nèi)的 NSE釋放入腦脊液,由于乙腦患兒血腦屏障通透性增高或破壞,從而進(jìn)入血清中的NSE含量就明顯增高[6]。

綜上所述,腦脊液和血清中NSE含量隨乙腦的發(fā)生發(fā)展緩解變化,其增高程度與病情的嚴(yán)重程度呈正相關(guān)。腦脊液和血清中NSE含量能夠敏感地作為乙腦患者腦損傷的標(biāo)志物,通過(guò)動(dòng)態(tài)檢測(cè)NSE的水平,對(duì)乙腦患兒腦損傷嚴(yán)重程度的評(píng)估,及時(shí)觀察病情發(fā)展變化,指導(dǎo)臨床有效的治療,均有一定的幫助。

[1]彭文偉.傳染病學(xué)[M].第6版.北京：人民衛(wèi)生出版社,2004：65-69.

[2]邱全曜,繆明永.神經(jīng)元特異性烯醇化酶[J].生命的化學(xué),2008,28(4)：439-442.

[3]Tracy M R.Neu ron-specific enolase is increased after non-convulsive status epilepticus[J].Mol Biol,2009,341(4)：1 015-1 021.

[4]Degiorgio CM,Gott PS,Robinowiez A L.Neuron-specific enolase,a marker of acu te neu ronal in jury[J].Epilepsia,2009,37(8)：506-509.

[5]Dalal I,Tzhhori S.Cytokine profile in celebrospinal fluid in children w ith epidem ic encephalitis B[J].Pediatr Neu rol,2010,38(3)：312-317.

[6]Grakie JA,Robertson SE.Interlrukin-18[J].Jou rnal of Leukocy te Biology,2009,79(4)：223-234.

Changes and clinica l significance of NSE in serum and celebrospinal fluid in children with epidem ic encephali- tis B

Li Hongzhi.Departmentof In fectious D iseases,Six th Peop le's Hospita l of Zhengzhou City,Zhengzhou450005,China

ObjectiveTo study the clinicalsignificance of the changes and clinical significance of NSE in serum and cerebrospinal fluid in child ren with epidemic encephalitis B.MethodsThe NSE content in serum and celebrospinal fluid w asmeasured in 46 child ren with epidem ic encephalitis B in the crisis phase and recovery phase.The NSE content in serum and celebrospinal fluid w asmeasured in 23 children as controlgroup.ResultsThere were significantdifferences in the serum and cerebrospinal fluid of NSE between any tw o of the general type group,severe type group and contro l group in the crisis phase;there was no significant difference in the serum and cerebrospinal fluid of NSE betw een the general type group and control group in the recovery phase.Therew as difference in the serum and cerebrospinal fluid of NSE betw een the severe typegroup and control group general type group in the recovery phase.There w as significant difference in the serum and cerebrospinal fluid of NSE betw een the crisis phase and recovery phase in children with epidem ic encephalitis B.In the crisis phase,the serum level of NSE w as positively related to the cerebrospinal fluid in child ren with epidem ic encephalitis B.ConclusionThe changes of NSE in serum and cerebrospina l fluid in child ren with epidemic encephalitis B along of the develop of disease.It is help fu l for the judgmentof the severity and prognosis of children w ith epidemic encephalitis B tomeasure the NSE.

Epidem ic encephalitis B;NSE;Serum;Cerebrospinal fluid

R512.32

A

1673-5110(2011)08-0012-04

(收稿2011-03-05)