AT1受體在腦膽堿能刺激引起的延髓腹外側(cè)部 TH-IR變化中的作用

王 敏,姚齊穎,夏滿莉,周新妹,姜春玲

AT1受體在腦膽堿能刺激引起的延髓腹外側(cè)部 TH-IR變化中的作用

王 敏1,姚齊穎2,夏滿莉1,周新妹1,姜春玲2

(1.浙江嘉興學(xué)院醫(yī)學(xué)院生理學(xué)教研室,浙江嘉興 314001;2.大連醫(yī)科大學(xué)生理學(xué)教研室,遼寧大連 116027)

目的：探討大鼠側(cè)腦室注射膽堿能激動劑氨甲酰膽堿 (carbachol,CBC)后引起的腎排鈉量、腎小球?yàn)V過率、腎血漿流量的改變和延髓腹外側(cè)部酪氨酸羥化酶免疫反應(yīng)活性 (thyrosine hydroxylase-immunoreactivity,TH-IR)的變化,以及氯沙坦 (losartan,Los)阻斷腦血管緊張素能 AT1受體后對上述變化的影響。方法：選用 SD雄性大鼠,隨機(jī)分成 4組：NS+CBC組、Los+CBC組、Los+NS組、NS+NS組,側(cè)腦室注射氨甲酰膽堿 (0.5μg)和 /或氯沙坦 (20μg)后,利用整體實(shí)驗(yàn)方法測定腎排鈉量、腎小球?yàn)V過率、腎血漿流量;采用免疫組織化學(xué)方法觀察大鼠延髓腹外側(cè)部酪氨酸羥化酶免疫反應(yīng)活性的變化。結(jié)果：與 NS+NS組比,大鼠側(cè)腦室注射氨甲酰膽堿 (0.5μg)后 40 min,腎排鈉量顯著增加,延髓腹外側(cè)部酪氨酸羥化酶免疫反應(yīng)陽性神經(jīng)元數(shù)目明顯增多,免疫染色強(qiáng)度明顯增加 (P＜0.05);與 NS+CBC組比,氯沙坦預(yù)處理后大鼠腎排鈉量顯著下降,延髓腹外側(cè)部酪氨酸羥化酶免疫反應(yīng)陽性神經(jīng)元數(shù)目明顯下降,免疫染色強(qiáng)度明顯降低 (P＜0.05)。此外,實(shí)驗(yàn)還觀察到,側(cè)腦室注射氨甲酰膽堿或氯沙坦對腎小球?yàn)V過率和腎血漿流量無明顯影響 (P＞0.05)。結(jié)論：大鼠側(cè)腦室給予氨甲酰膽堿后,可顯著引起促鈉排泄反應(yīng),對延髓腹外側(cè)部的兒茶酚胺能神經(jīng)元有興奮作用;阻斷腦血管緊張素能 AT1受體可下調(diào)氨甲酰膽堿誘導(dǎo)的上述變化。

卡巴膽堿 /藥理學(xué);受體,血管緊張素,1型 /藥理學(xué);延髓 /藥物作用;氯沙坦 /藥理學(xué)

[J Zhejiang Univ(Medical Sci),2011,40(1)：71-77.]

延髓腹外側(cè)部是中樞參與循環(huán)血量調(diào)節(jié)的重要部位。血量擴(kuò)張可引起清醒家兔延髓腹外側(cè)部 c-fos基因表達(dá)增加及促鈉排泄反應(yīng)[1],但延髓腹外側(cè)部何種神經(jīng)元參與血量擴(kuò)張引起的促鈉排泄反應(yīng)尚未見報(bào)道。有文獻(xiàn)報(bào)道,側(cè)腦室、內(nèi)側(cè)隔區(qū)、藍(lán)斑給予膽堿能刺激或腎上腺素能刺激均能引起促鈉排泄反應(yīng)[2];而α-腎上腺素能受體阻斷劑酚妥拉明可阻斷上述效應(yīng)[3],提示腦膽堿能系統(tǒng)和腦兒茶酚胺能系統(tǒng)在促鈉排泄反應(yīng)中有某種聯(lián)系。我們以往的工作證實(shí),下丘腦內(nèi)兒茶酚胺能神經(jīng)元參與腦膽堿能刺激引起的促鈉排泄和利尿反應(yīng)[4]。神經(jīng)解剖學(xué)證實(shí),延髓腹外側(cè)部有豐富的兒茶酚胺能神經(jīng)元,并接受來自下丘腦、藍(lán)斑、孤束核等與水鈉平衡相關(guān)腦區(qū)的纖維投射[5]。但延髓腹外側(cè)部的兒茶酚胺能神經(jīng)元是否參與腦膽堿能刺激引起的促鈉排泄反應(yīng),迄今為止尚未見報(bào)道。

另有文獻(xiàn)報(bào)道,中樞給予血管緊張素Ⅱ可引起升壓、飲水及促鈉排泄反應(yīng)[6-7];腦血管緊張素能AT1受體參與大鼠腦室高張刺激引起的腎排鈉量、排鉀量、尿量增加和平均動脈壓升高的效應(yīng)[6,8],但腦血管緊張素能 AT1受體是否參與側(cè)腦室給予氨甲酰膽堿引起的延髓腹外側(cè)部兒茶酚胺能神經(jīng)元活性變化的反應(yīng)目前尚未見報(bào)道。酪氨酸羥化酶 (thyrosine hydroxylase,TH)是兒茶酚胺合成的限速酶,可作為兒茶酚胺能神經(jīng)元活性的標(biāo)志[5]。本研究應(yīng)用整體實(shí)驗(yàn)和免疫組織化學(xué)的方法,觀察側(cè)腦室注射膽堿能激動劑氨甲酰膽堿 0.5μg后對腎排鈉量、腎小球?yàn)V過率 (glomerular filtratior rate,GFR)和腎血漿流量 (renal plasma flow,RPF)的影響,延髓腹外側(cè)部酪氨酸羥化酶免疫反應(yīng)活性的變化,以及用氯沙坦 (20μg)阻斷腦血管緊張素能 AT1受體后對上述變化的影響;探討中樞兒茶酚胺能神經(jīng)元和血管緊張素能神經(jīng)元在腦膽堿能刺激引起的促鈉排泄反應(yīng)中的作用機(jī)制及可能的相互關(guān)系,為進(jìn)一步研究腎排鈉障礙的中樞機(jī)制,揭示其在高血壓發(fā)生發(fā)展中的可能影響提供理論依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 藥品、試劑和儀器 氯沙坦 (losartan,Los)、氨甲酰膽堿 (carbachol,CBC)、TH一抗、二氨基聯(lián)苯胺、菊粉、對氨基馬尿酸為美國Sigma公司產(chǎn)品,其他免疫組化試劑為武漢博士德公司產(chǎn)品或國產(chǎn)分析醇。XY-86型振動切片機(jī) (浙江象山科學(xué)精密儀器廠),Easylyte plus Na/K/Cl分析儀 (美國 Medica公司 ),Olympus A.H-B-L萬用顯微鏡 (日本),754型分光光度計(jì) (日本),M IAS-GOODJJ.BMP圖像分析儀 (美國)。

1.2 動物分組 36只健康雄性 SD大鼠于一側(cè)腦室埋置導(dǎo)管,1周后將動物隨機(jī)均分為 4組 (n=9),①NS+NS組：側(cè)腦室先注射 0.85%NaCl 5μl,20 min后再注射 0.85%NaCl 5μl;②NS+CBC組：側(cè)腦室先注射 0.85%NaCl 5 μl,20 min后再注射 0.5μg氨甲酰膽堿 5μl;③Los+CBC組：側(cè)腦室先注射 20μg氯沙坦 5 μl,20 min后再注射 0.5μg氨甲酰膽堿 5μl;④Los+NS組：側(cè)腦室先注射 20μg氯沙坦 5 μl,20 min后再注射 0.85%NaCl 5μl。所有動物均由大連醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心提供。

1.3 整體實(shí)驗(yàn) 實(shí)驗(yàn)時(shí)各組大鼠麻醉后固定,行氣管插管、膀胱插管,分離頸外靜脈供輸液,分離頸總動脈供取血、監(jiān)測血壓。每 20 min收集尿樣本 1次,用 Easylyte p lus Na/K/Cl分析儀測定尿鈉濃度。

1.3.1 腎小球?yàn)V過率 (GFR)的測定 頸外靜脈輸注菊粉后,分別于側(cè)腦室注射前 30 min,注射后 30 min和 50 min取血、尿樣本。用分光光度計(jì)測定腎菊粉的清除率。

1.3.2 腎血漿流量 (RPF)的測定 頸外靜脈輸注對氨基馬尿酸后,分別于側(cè)腦室注射前 30 min,注射后 30 min和 50 min取血、尿樣本。用分光光度計(jì)測定腎對氨基馬尿酸的清除率。

1.4 免疫組織化學(xué)實(shí)驗(yàn) 側(cè)腦室注藥后 40 min,麻醉經(jīng)心臟灌流,取腦后固定。用振動切片機(jī)切取 50μm厚冠狀腦片,按 George Paxinos&Charles Watson腦立體定位圖譜[8],用中性紅染色在低倍鏡下挑選前囟后 11.3～14.08 mm(Bregma：-11.3 mm～ -4.08 mm)部位的腦片即為延髓腹外側(cè)部所在部位,進(jìn)行免疫組織化學(xué)實(shí)驗(yàn)。①2%Triton孵育 5 min,PBS振蕩漂洗;②2%BSA孵育 40 min;③小鼠抗大鼠酪氨酸羥化酶一抗 (1∶2 000)4℃孵育過夜;④PBS漂洗,2%的 BSA孵育 30 min;⑤生物素化的二抗室溫孵育 1 h,PBS漂洗;⑥ SABC室溫孵育 30 min,PBS漂洗;⑦二氨基聯(lián)苯胺顯色;⑧二甲苯透明,中性樹膠封片;⑨光鏡下觀察酪氨酸羥化酶免疫反應(yīng)陽性神經(jīng)元的數(shù)目及免疫染色強(qiáng)度并拍片。

1.5 圖像分析和統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 選取 NS+NS組、NS+CBC組、Los+CBC組和 Los+NS組大鼠各 6只,用 M IAS-GOODJJ.BMP圖像分析系統(tǒng)對延髓腹外側(cè)部酪氨酸羥化酶免疫反應(yīng)陽性神經(jīng)元的個數(shù)和平均光密度進(jìn)行測定。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用 SPSS 13.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,實(shí)驗(yàn)指標(biāo)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(ˉx±s)表示,4組間進(jìn)行單因素方差分析,并進(jìn)行SNK兩兩比較,以 P＜0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 氯沙坦對側(cè)腦室注射氨甲酰膽堿引起的促鈉排泄作用的影響 各組間腎排鈉量指標(biāo)經(jīng)方差分析有顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)差異 (F=10.194,P＜0.05)。圖 1顯示：NS+NS組大鼠注藥后120 min排鈉量基本穩(wěn)定于注藥前水平。NS+CBC組大鼠注藥后排鈉量明顯增加,40 min達(dá)到高峰,與 NS+NS組相比,兩組注射前排鈉量無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異 (P＞0.05);注射后 21～40 min排鈉量明顯高于 NS+NS組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (P＜0.05)。Los+CBC組注射后排鈉量也顯著增加,但與 NS+CBC組相比,兩組注射前排鈉量無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異 (P＞0.05);注射后 21～40min內(nèi)排鈉量明顯低于 NS+CBC組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (P＜0.05)。Los+CBC組與 NS+NS組相比,注射前排鈉量無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異 (P＞0.05);注射后 21～40min內(nèi)排鈉量仍高于 NS+NS組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (P＜0.05)。

圖1 氯沙坦對側(cè)腦室注射氨甲酰膽堿引起的促鈉排泄的影響Fig.1 Effect of losartan pretreatment on carbachol-induced natriuresis

2.2 側(cè)腦室注射氨甲酰膽堿和/或氯沙坦對腎小球?yàn)V過率和腎血漿流量的影響 各組間腎小球?yàn)V過率指標(biāo)經(jīng)方差分析無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異 (F=1.157,P＞0.05)。表 1顯示：NS+NS組大鼠注藥后 30min和 50minGFR基本穩(wěn)定于注藥前水平。NS+CBC組大鼠 GFR注藥后與注藥前相比無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異 (P＞0.05),與 NS+NS組相比,注藥后 30min和 50minGFR也無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異 (P＞0.05)。Los+CBC組大鼠注藥后 30min和 50minGFR,與 NS+CBC組及 NS+NS組相比均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異 (P＞0.05)。Los+NS組大鼠注藥后 GFR基本穩(wěn)定于注藥前水平,與 NS+NS組相比也無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異 (P＞0.05)。

4組腎血漿流量指標(biāo)經(jīng)方差分析無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異 (F=1.96,P＞0.05,表 2)。而且 RPF的變化規(guī)律與 GFR的相似。

表1 側(cè)腦室注射氨甲酰膽堿及氯沙坦對腎小球?yàn)V過率的影響Table1 Effect of carbachol and /or losartan on glomerular filtration rate(ˉx±s)

表2 側(cè)腦室注射氨甲酰膽堿及氯沙坦對腎血漿流量的影響Table2 Effect of carbacol and /or losartan on renal plasma flow(ˉx±s)

2.3 氯沙坦對側(cè)腦室注射氨甲酰膽堿引起的延髓腹外側(cè)部酪氨酸羥化酶免疫反應(yīng)活性變化的影響 本研究以延髓腹外側(cè)部酪氨酸羥化酶免疫反應(yīng)陽性神經(jīng)元的數(shù)目和平均光密度作為酪氨酸羥化酶免疫反應(yīng)強(qiáng)度的評價(jià)指標(biāo)。側(cè)腦室注藥后各組間陽性神經(jīng)元的數(shù)目經(jīng)方差分析有顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)差異 (F=3.924,P=0.024),陽性神經(jīng)元平均光密度指標(biāo)經(jīng)方差分析也有顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)差異 (F=4.596,P=0.013)。NS+NS組大鼠延髓腹外側(cè)部酪氨酸羥化酶免疫反應(yīng)陽性神經(jīng)元散在分布,細(xì)胞形態(tài)不清晰,染色較淺 (圖 2C)。與 NS+NS組相比,NS+CBC組大鼠延髓腹外側(cè)部酪氨酸羥化酶免疫反應(yīng)陽性神經(jīng)元密集分布,胞漿深染,細(xì)胞輪廓清晰(圖 2A),免疫染色強(qiáng)度明顯增強(qiáng) (表 3,P＜0.05)。與 NS+CBC組相比,Los+CBC組大鼠延髓腹外側(cè)部酪氨酸羥化酶免疫反應(yīng)陽性神經(jīng)元數(shù)目明顯減少,散在分布,胞漿染色較淺,但細(xì)胞形態(tài)清晰 (圖 2B),免疫染色強(qiáng)度明顯降低(表 3,P ＜0.05)。Los+NS組與 NS+NS組相比免疫反應(yīng)陽性顆粒數(shù)目和免疫染色強(qiáng)度無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異 (圖 2、表 3,P ＞0.05)。

圖2 氯沙坦對側(cè)腦室注射氨甲酰膽堿引起的延髓腹外側(cè)部酪氨酸羥化酶免疫陽性反應(yīng)變化的影響Fig.2 Effect of losartan on the changes of TH-IR in RVL induced by ICV injection of carbachol

3 討 論

研究表明,腦中樞參與腎鈉水排出的調(diào)節(jié),下丘腦、藍(lán)斑 (locus coeruleus,LC)給予膽堿能刺激可引起動物攝水、平均動脈壓升高和腎的鈉排泄反應(yīng)增加[2-3]。本研究結(jié)果顯示：大鼠側(cè)腦室注射氨甲酰膽堿 (0.1、0.2、0.5μg)也可引起腎排鈉增加,并且呈現(xiàn)明顯的量效關(guān)系。這表明腎的鈉排泄直接受到中樞膽堿能系統(tǒng)的調(diào)節(jié)。注射 0.5μg氨甲酰膽堿后動脈血壓迅速升高,20 min后基本恢復(fù),而腎排鈉量增加持續(xù) 100 min,這表明血壓升高不是側(cè)腦室注射氨甲酰膽堿引起持續(xù)性促鈉排泄反應(yīng)的主要因素,可能有其他神經(jīng)體液因素參與這種促鈉排泄反應(yīng)。有研究報(bào)道[9],用正常犬血量擴(kuò)張后的血液,灌流游離腎,尿鈉排出量顯著增加;而用去頭犬血量擴(kuò)張后的血液,灌流游離腎,則不引起尿鈉排出量增加的反應(yīng)。這提示腦中樞在調(diào)控腎促鈉排泄反應(yīng)中是重要的參與者。

本實(shí)驗(yàn)還發(fā)現(xiàn),側(cè)腦室注射氨甲酰膽堿和 /或氯沙坦后,大鼠的腎小球?yàn)V過率和腎血漿流量均無明顯改變,進(jìn)一步表明,腦膽堿能刺激引起的促鈉排泄反應(yīng)不是通過改變腎血流動力學(xué)來實(shí)現(xiàn)的,可能是中樞通過神經(jīng)體液機(jī)制作用于腎小管引起的。有研究發(fā)現(xiàn),膽堿能刺激大鼠下丘腦外側(cè)區(qū)等核團(tuán)引起的促鈉排泄反應(yīng)與腎神經(jīng)活動改變無關(guān),與血壓升高、腎小球?yàn)V過率和腎血漿流量的改變也無關(guān),可能與某些體液因子有關(guān)[10]。Baldissera[10-11]發(fā)現(xiàn),膽堿能刺激第三腦室前腹部在引起腎鈉鉀水排出增加的同時(shí)伴有血漿心房鈉尿肽水平的升高,垂體和下丘腦內(nèi)側(cè)區(qū)的心房鈉尿肽也有增高;損毀第三腦室前腹部后上述腦區(qū)心房鈉尿肽水平降低,并且血漿心房鈉尿肽含量明顯降低。上述研究提示,腦區(qū)的心房鈉尿肽能神經(jīng)元參與了腦膽堿能刺激引起的血漿心房鈉尿肽升高的反應(yīng),腦膽堿能刺激引起的促鈉排泄反應(yīng)與中樞的心房鈉尿肽的釋放有關(guān)。

另研究發(fā)現(xiàn),側(cè)腦室給予腎上腺素可引起與上述相似的促鈉排泄反應(yīng)[3],提示腦膽堿能刺激和腦兒茶酚胺能刺激引起的促鈉排泄反應(yīng)很可能具有或部分具有共同的神經(jīng)傳導(dǎo)通路。本實(shí)驗(yàn)觀察到,側(cè)腦室注射氨甲酰膽堿后 40 min,延髓腹外側(cè)部酪氨酸羥化酶免疫反應(yīng)陽性神經(jīng)元數(shù)目明顯增多,免疫染色強(qiáng)度明顯增強(qiáng)。這表明延髓腹外側(cè)部不僅參與應(yīng)激、防御時(shí)交感緊張性沖動和心血管穩(wěn)態(tài)的調(diào)控,而且參與機(jī)體水鈉代謝的調(diào)節(jié)。飲食中鈉攝入增加可引起延髓腹外側(cè)部心血管反應(yīng)增強(qiáng)[12],提示延髓腹外側(cè)部通過調(diào)節(jié)水鈉代謝從而影響心血管活動。免疫組織化學(xué)證實(shí),血管緊張素能 AT1受體在許多腦區(qū)如藍(lán)斑、孤束核、延髓腹外側(cè)部的分布與兒茶酚胺能神經(jīng)元的分布有顯著的重疊性[13],提示腦血管緊張素能神經(jīng)通路與腦兒茶酚胺能神經(jīng)通路在功能上可能具有密切聯(lián)系。本實(shí)驗(yàn)還發(fā)現(xiàn)：選用腦血管緊張素能 AT1受體拮抗劑氯沙坦預(yù)處理后,可明顯減弱氨甲酰膽堿誘導(dǎo)的延髓腹外側(cè)部兒茶酚胺能神經(jīng)元活性的變化,表明內(nèi)源性的血管緊張素Ⅱ作用于AT1受體后,可能通過或部分通過影響兒茶酚胺能神經(jīng)元的活性,參與側(cè)腦室注射氨甲酰膽堿引起的促鈉排泄反應(yīng)。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果結(jié)合文獻(xiàn)報(bào)道[14],推測側(cè)腦室注射氨甲酰膽堿后,可能引起內(nèi)源性血管緊張素Ⅱ的釋放,作用于延髓腹外側(cè)部的 AT1受體,引起延髓腹外側(cè)部兒茶酚胺能神經(jīng)元興奮,釋放兒茶酚胺,后者作為神經(jīng)遞質(zhì),通過某種神經(jīng)液遞機(jī)制引起腎臟的促鈉排泄反應(yīng)。

近幾年的研究都在探討中樞血管緊張素Ⅱ增強(qiáng)兒茶酚胺能神經(jīng)元活性的機(jī)制,包括促進(jìn)兒茶酚胺類遞質(zhì)的合成、釋放以及轉(zhuǎn)運(yùn)體的活動。有文獻(xiàn)報(bào)道,腦兒茶酚胺能神經(jīng)元參與中樞給予血管緊張素Ⅱ引起的升壓和飲水反應(yīng),其作用機(jī)制可能是通過血管緊張素Ⅱ作用于α-腎上腺素能受體或血管緊張素能 AT1受體,引起下丘腦去甲腎上腺素釋放量明顯增多,并呈顯著的量效關(guān)系[15]。另研究發(fā)現(xiàn),血管緊張素Ⅱ可激活磷脂酶 C和蛋白激酶 C傳導(dǎo)通路,促進(jìn)腎上腺素轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)的活動[14]或增強(qiáng)酪氨酸羥化酶 mRNA、c-fos的表達(dá)[16],引起腎上腺素合成和釋放增加。

綜上所述,腦血管緊張素能通路和腦兒茶酚胺能神經(jīng)通路共同參與側(cè)腦室注射氨甲酰膽堿引起的腎促鈉排泄反應(yīng)。但其確切的細(xì)胞及分子生理機(jī)制還有待進(jìn)一步的研究。

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Effect of AT1receptor on changes of thyrosine hydroxylase-immunoreactivity in rostral ven trolateral medulla induced by bra in cholinergic stimuli in rats

WANGM in1,YAO Qi-ying2,XIA Man-li1,ZHOU Xin-mei1,JIANG Chun-ling2
(1.Department of Physiology,Jiaxing University,School of Medicine,Jiaxing 314001,China;2.Department of Physiology,Dalian Medical University,Dalian 116027,Chian)

Objective：To investigate the effect of AT1receptor on the changes of thyro sine hydroxylase-immunoreactivity(TH-IR)in rostral ventrolateral medulla(RVLM)induced by brain cholinergic stimuli in rats.Methods：Male SD rats were randomly divided into 4 groups：NS+CBCgroup,Los+CBC group,Los+NS group and NS+NS group.AT1was blocked by pretreatment of 20μg losartan in Los+CBC and Los+NS groups;intracerebroventricular injection of 0.5μgcarbachol was used for cholinergic stimuli in NS+CBC and Los+CBC groups;normal saline(NS)was used for control.The output amount of natrium in kidney,glomerular filtration rate(GFR)and renal plasma flow(PRF)were observed.The changes of TH-IR in the RVLM were observed by immunohistochemistry.Results：In NS+CBC group carbachol induced potent natriuresis,after pretreatment of losartan the natriuretic effectwas partially inhibited in Los+CBC group.Both the number and op tical density of THIR positive neurons in NS+CBC group were markedly increased than those in NS+NS group(P＜0.05);while those in Los+CBC group were significantly lower than those in NS+CBC group(P＜0.05).Intracerebroventricular injection of carbachol and losartan had no effect on GFR and RPF(P＞0.05).Conclusion：The results suggest that cholinergic stimuli can induce potent natriuresis and increase the activity of adrenergic neurons in the RVLM;the above effects can be down regulated by blockade of brain AT1recep tor.

Carbachol/pharmacol;Recep tor,angiotensin,Type 1/pharmacol;Medulla oblongata/drug eff;Losartan/pharmacol

R 334

A

1008-9292(2011)01-0071-07

http：∥www.journals.zju.edu.cn/med DO I：10.3785/j.issn.1008-9292.2011.01.013

2010-05-26

2010-11-24

浙江省嘉興市科技局項(xiàng)目 (2008AY2039-4).

王 敏 (1979-),女,碩士 ,講師;E-mail：wmwmwmtom@yahoo.com.cn

姜春玲 (1964-),女,教授,博導(dǎo);主要從事神經(jīng)和腎臟生理研究;E-mail：chunling_jiang2006@yahoo.com.cn

[責(zé)任編輯 黃曉花 ]