王祎娟,余小領(lǐng),李學(xué)斌,馬漢軍,段虎,潘潤淑,馬精艷
1(河南科技學(xué)院食品學(xué)院,河南 新鄉(xiāng),453003) 2(河南科技學(xué)院動物科學(xué)學(xué)院,河南新鄉(xiāng),453003)
肌肉中的蛋白質(zhì)根據(jù)理化和功能特性,通常分為肌原纖維蛋白、肌漿蛋白、基質(zhì)蛋白。其中肌原纖維蛋白又稱為鹽溶蛋白,是肌肉中最重要的蛋白質(zhì),約占總蛋白含量的50% ~55%,它是由肌球蛋白、肌動蛋白、肌動球蛋白和調(diào)節(jié)蛋白等形成的復(fù)合體[1]。這些蛋白質(zhì)形成熱誘導(dǎo)凝膠的能力是肉制品加工中重要的功能特性之一,對肉制品的工藝特性和感官品質(zhì)具有極其重要的影響,在肉制品加工中起到極為重要的作用[2]。
國內(nèi)外許多學(xué)者對不同蛋白質(zhì)的提取條件、形成凝膠的機理及影響凝膠特性的因素進行了廣泛研究[3-15],發(fā)現(xiàn)只有肌原纖維蛋白有很好的凝膠能力,而肌原纖維蛋白中只有肌球蛋白可單獨形成良好的凝膠,肌動蛋白和肌動球蛋白對肌球蛋白凝膠有協(xié)同或拮抗效應(yīng),肌漿蛋白和可溶性膠原蛋白可能對凝膠的形成產(chǎn)生影響。然而,不同條件下勻漿物形成凝膠及其質(zhì)構(gòu)特性的研究鮮有報道,因此本試驗主要通過三元二次通用旋轉(zhuǎn)組合設(shè)計試驗,研究pH值、NaCl濃度及加熱溫度對豬后腿肉勻漿物熱誘導(dǎo)凝膠質(zhì)構(gòu)參數(shù)的影響,從而為豬肉凝膠類制品加工工藝的改進提供理論依據(jù)。
選擇品種和飼養(yǎng)管理相同、活重(97±5)kg的雜交豬(淮南豬×長白豬×約克夏)6頭,按照常規(guī)屠宰工藝屠宰,宰后45 min內(nèi)從胴體上分割2條豬后腿,剔除其可見脂肪和結(jié)締組織,每份分裝100 g,分別放入塑料包裝袋中并密封,在-40℃保存?zhèn)溆谩?/p>
氯化鈉、磷酸氫二鈉、磷酸二氫鈉、碘化鉀、無水硫酸銅、四水合酒石酸鉀鈉、氫氧化鈉、鹽酸(所有試劑均屬分析純,均購于天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司)。
TA XT-PLUS型質(zhì)構(gòu)分析儀,英國 Stable Micro System公司;3-18K型冷凍離心機,德國SIGMA公司;T25數(shù)顯型高速分散機,美國IKA公司;IF300-15型雪花型制冰機,德國SIM有限公司;WFJ 7200型分光光度計,尤尼科上海儀器有限公司;DELTA320型pH計,梅特勒-托利多儀器(上海)有限公司;BS223S型電子天平,上海天平儀器廠;79-1型磁力加熱攪拌器,常州國華儀器有限公司;HH-4型數(shù)顯恒溫水浴鍋,國華電器有限公司。
采用三因素二次通用旋轉(zhuǎn)設(shè)計進行試驗設(shè)計,其因素水平編碼表如表1所示,試驗設(shè)計表如表2所示。
表1 三元二次通用旋轉(zhuǎn)組合設(shè)計因素水平編碼表
表2 三元二次通用旋轉(zhuǎn)組合設(shè)計
1.4.1 肌肉勻漿物的制備
參照 Tomasz Lesiów 的方法[17]并稍加修改。首先取分裝好的肉樣在0~4℃冰箱中解凍20 h,然后將肉切成0.5 cm3的小塊,準確稱量并放入燒杯中,加入4倍體積的NaCl溶液,進行勻漿處理(8 000 r/min,每次20 s,3 次),用0.1 mol/L NaOH 和0.1 mol/L HCl調(diào)節(jié)勻漿液的pH值,然后將勻漿液分裝到50 mL離心管,最后將離心管置于0~4℃冰箱中靜置24 h。
1.4.2 凝膠的制備
取出離心管并置于水浴鍋中,從30℃緩慢升溫至試驗設(shè)計的溫度,并在此溫度保溫30 min,然后置于冰浴中迅速降溫30 min,將制備好的凝膠置于4℃冰箱中24 h然后保存?zhèn)溆?。測定時取出凝膠在室溫下放置30 min后再測定。
1.4.3 凝膠質(zhì)構(gòu)特性的測定
使用質(zhì)構(gòu)儀的TPA模式測定凝膠質(zhì)構(gòu)特性[18],單位為g。質(zhì)構(gòu)分析參數(shù)設(shè)定:探頭為P0.5,測試前探頭下降速度2.0 mm/s,測試速度1.0 mm/s,測試后探頭上升速度2.0 mm/s,穿刺測試距離60%,感應(yīng)力5 g。
運用SPSS 13.0統(tǒng)計分析軟件的廣義線性模型模塊對所測定的數(shù)據(jù)進行相關(guān)及回歸分析,用MATLAB 7.0軟件的繪圖功能對實驗分析結(jié)果進行反應(yīng)曲面的繪制。
以pH值(x1)、NaCl濃度(x2)和加熱溫度(x3)為自變量,勻漿物凝膠硬度為依變量,進行多元回歸分析后得到二次回歸方程(1)。
用Matlab 7.0軟件繪制方程(1)在不同加熱溫度條件下的響應(yīng)曲面直觀圖,如圖1所示。
由圖1可知,在所考察的加熱條件下,pH和NaCl濃度對凝膠硬度的影響趨勢總體上一致,因素間的交互作用顯著。這一結(jié)論與郭世良[19]的結(jié)論相似,即離子強度對凝膠硬度的影響受pH值的影響,且兩者存在明顯的交互作用。在pH較低時,隨著NaCl濃度的增加,凝膠的硬度增大;pH較高時,NaCl濃度對凝膠硬度的影響較小。NaCl濃度較低時,凝膠硬度隨pH的增加比較平緩;NaCl濃度較高時,凝膠硬度隨pH的增加而降低。加熱溫度為50℃形成的凝膠硬度比加熱溫度為58.1℃時的低,加熱溫度大于70℃時形成的凝膠硬度趨于穩(wěn)定。出現(xiàn)這種情況,可能是由于凝膠硬度主要取決于肌原纖維蛋白在加熱條件下相互交聯(lián)的種類和數(shù)量,形成凝膠時環(huán)境的pH值影響蛋白質(zhì)交聯(lián)的類別,而離子強度影響交聯(lián)的數(shù)量[20]。pH較低時,蛋白質(zhì)交聯(lián)的類別起主導(dǎo)作用,pH較高時,蛋白質(zhì)的溶解情況占主要地位。
圖1 不同加熱溫度下pH值和NaCl濃度對凝膠硬度的影響
以pH值(x1)、NaCl濃度(x2)和加熱溫度(x3)為自變量,勻漿物凝膠彈性為依變量,進行多元回歸分析后得到二次回歸方程(2)。
用Matlab 7.0軟件繪制方程(2)在不同加熱溫度條件下的響應(yīng)曲面直觀圖,如圖2所示。由圖2可知,在不同加熱條件下,pH值和 NaCl濃度對凝膠彈性的影響趨勢總體上一致,pH值和NaCl濃度對凝膠彈性的影響存在顯著的交互作用。pH值較低時,凝膠彈性隨著NaCl濃度的增加而增大,NaCl濃度較低時,凝膠彈性隨著 pH值的升高呈上升趨勢,而在較高的pH值和NaCl濃度下凝膠彈性變化較小。同時,溫度對凝膠彈性的影響也較小??赡艿脑蚴钱敿≡w維蛋白的溶解度達到一定值時,凝膠彈性不再隨蛋白質(zhì)溶解度的增大而增大。
圖2 不同加熱溫度下pH和NaCl濃度對凝膠彈性的影響
以pH值(x1)、NaCl濃度(x2)和加熱溫度(x3)為自變量,勻漿物凝膠內(nèi)聚性為依變量,進行多元回歸分析后得到二次回歸方程(3)。
用Matlab 7.0軟件繪制方程(3)在不同加熱溫度條件下的響應(yīng)曲面直觀圖,如圖3所示。由圖3可知,加熱溫度分別為50、58.1和70℃時,pH值和NaCl濃度對凝膠內(nèi)聚性的影響趨于總體上一致,而加熱溫度分別為81.9℃和90℃時,pH值和NaCl濃度對凝膠內(nèi)聚性的影響也基本一致。NaCl濃度較低時,隨著pH值的升高內(nèi)聚性增加;NaCl濃度較高時,凝膠的內(nèi)聚性變化較小。pH值較低時,隨著NaCl濃度增加內(nèi)聚性增加,較高pH值下則呈相反的趨勢。凝膠的內(nèi)聚性隨著加熱溫度的升高而呈下降趨勢。凝膠的內(nèi)聚性主要受pH值和離子強度交互作用的影響。二者都影響肌原纖維的溶解度、存在狀態(tài)和凝膠的形成。
圖3 不同加熱溫度下pH和NaCl濃度對凝膠內(nèi)聚性的影響
以pH值(x1)、NaCl濃度(x2)和加熱溫度(x3)為自變量,勻漿物凝膠膠粘性為依變量,進行多元回歸分析后得到二次回歸方程(4)。
用Matlab 7.0軟件繪制方程(4)在不同加熱溫度條件下的響應(yīng)曲面直觀圖,如圖4所示。由圖4可知,在所考察的加熱條件下,pH值和NaCl濃度對凝膠膠粘性的影響趨勢總體上一致,兩者間存在明顯的交互效應(yīng)。在低pH值下,隨著NaCl濃度的增加,凝膠的膠粘性顯著增加,當pH值為6.5左右時緩慢增加,而當pH值大于7時,膠粘性隨NaCl濃度的增加而減小。NaCl濃度較低時,膠粘性隨著pH值的升高而增加但高NaCl濃度下,膠粘性隨著pH值的升高而降低。溫度大于70℃時凝膠的膠粘性高于溫度小于70℃時的膠粘性。
以pH值(x1)、NaCl濃度(x2)和加熱溫度(x3)為自變量,勻漿物凝膠咀嚼性為依變量,進行多元回歸分析后得到二次回歸方程(5)。
圖4 不同加熱溫度下,pH值和NaCl濃度對凝膠膠粘性的影響
圖5 不同加熱溫度下,pH值和NaCl濃度對凝膠內(nèi)聚性的影響
用Matlab 7.0軟件繪制方程(5)在不同加熱溫度條件下的響應(yīng)曲面直觀圖,如圖5所示。由圖5可知,在不同加熱條件下,pH值和NaCl濃度對凝膠咀嚼性的影響趨勢總體上一致,且兩者間存在明顯的交互作用。pH值較低時,隨著NaCl濃度增加凝膠咀嚼性增大;pH值較高時,隨著NaCl濃度增加凝膠咀嚼性減小。NaCl濃度較低時,凝膠咀嚼性隨pH值的增加而增加;NaCl濃度較高時,凝膠咀嚼性隨pH值的增加而降低。加熱溫度小于70℃時凝膠的咀嚼性顯著高于加熱溫度大于70℃時凝膠的咀嚼性。
不同處理條件對豬后腿肉勻漿物凝膠質(zhì)構(gòu)參數(shù)的影響存在差異。不同加熱溫度下,pH值和NaCl濃度對凝膠硬度、彈性、內(nèi)聚性、膠粘性和咀嚼性影響的總體趨勢一致且兩者存在明顯的交互作用。pH值較低時,隨著NaCl濃度的增加,凝膠的硬度、彈性、內(nèi)聚性、膠粘性和咀嚼性均增大而回復(fù)性減小;pH值較高時,NaCl濃度對凝膠硬度、彈性和膠粘性影響較小,內(nèi)聚性和膠粘性隨著NaCl濃度增加而降低。NaCl濃度較低時,pH值對凝膠硬度影響較小,凝膠的彈性、內(nèi)聚性、膠粘性和咀嚼性隨著pH值的升高而增大;NaCl濃度較高時,凝膠的硬度、膠粘性和咀嚼性隨pH值的增加而降低,而pH值對凝膠的彈性和內(nèi)聚性影響較小。同時,隨著加熱溫度的升高,凝膠的硬度和膠粘性增大,內(nèi)聚性和咀嚼性減小,而凝膠彈性變化較小。
[1] 葛長榮,馬美湖主編.肉與肉制品工藝學(xué)[M].北京:中國輕工業(yè)出版社,2005.
[2] 彭增起,周光宏.肌肉鹽溶蛋白質(zhì)溶解性和凝膠特性研究[D].南京:南京農(nóng)業(yè)大學(xué),2005.
[3] 楊龍江,南慶賢.肌肉蛋白質(zhì)的熱誘導(dǎo)凝膠特性及影響因素[J].肉類工業(yè),2001(10):39-42.
[4] 徐幸蓮,周光宏.兔骨骼肌肌球蛋白熱誘導(dǎo)凝膠特性及成膠機制[D].南京:南京農(nóng)業(yè)大學(xué),2003.
[5] 李繼紅,彭增起.不同種類肉鹽溶蛋白凝膠特性的研究[D].保定:河北農(nóng)業(yè)大學(xué),2004:6.
[6] 郭世良,王玉芬.肌原纖維蛋白和豬肉的熱誘導(dǎo)凝膠影響因素及特性研究[D].鄭州:河南農(nóng)業(yè)大學(xué),2008,6.
[7] Sharp A,Offer G.The Mechanism of Formation of Gels from Myosin Molecules[J].Sci Food Agric,1992,58:63-73.
[8] Samejima K,Hashimoto Y.Heat gelling properties of myosin,actin,actomyosin and myosin-subunits in a saline model system[J].J Food Sci,1969,34:242 -250.
[9] Lavelle C L,E A Foegeding.Gelation of turkey breast and thigh myofibrils:effects of pH,salt and temperature[J].J Food Sci,1993,58(4):727-730.
[10] Boyer C,Joandel V,Roussilhes V,et al.Heat-induced gelation of myofibrillar proteins and myosin from fastand slow - twitch rabbit muscles[J].J Food Sci,1996,61(6):1 138-1 142.
[11] Kristisson H G,Hultin H O.Role of pH and ionic strength on water relationships in washed minced chicken– breast muscle gels[J].J Food Sci,2003,68(3):917-921.
[12] Westphalen A D,Briggs J L,Lonergan S M.Influence of pH on rheological properties of porcine myofibrillar protein during heat induced gelation [J].Meat Science,2005,70(2):293-299.
[13] Sarah Comfort,Nazlin K Howell.Gelation properties of salt soluble meat protein and soluble wheat protein mixtures[J].Food Hydrocolloids,2003,70(2):149 -159.
[14] Ru Liu,Siming Zhao,Shanbai Xiong,et al.Role of secondary structures in the gelation of porcine myosin at different pH values[J].Meat Science,2008,80(3):632-639.
[15] Camou J P,Sebranek J W,Olson D G.Effects of heating rate and protein concentration on gel strength and water loss of muscle protein gels[J].J Food Sci,1989,54:850-854
[16] 王欽德,楊堅主編.食品試驗設(shè)計與統(tǒng)計分析[M].北京:中國農(nóng)業(yè)大學(xué)出版社,2003.
[17] Tomasz Lesiów,Youling L Xiong.Chicken muscle homogenate gelation properties:effect of pH and muscle fiber type[J].Meat Science,2003,64(4):399-403.
[18] 林麗軍,徐幸蓮.肌球蛋白的ATPase活性及熱誘導(dǎo)凝膠特性研究[D].南京:南京農(nóng)業(yè)大學(xué),2004.
[19] 郭世良,趙改名,王玉芬,等.離子強度和pH值對肌原纖維蛋白熱誘導(dǎo)凝膠特性的影響[J].食品科技,2008,33(1):84-87.
[20] Xiong Y L,Brekke C J.Changes in protein solubility and gelation of chicken myofibrils during storage[J].J Food Sci,1989,54(5):1141- 1146.