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    堆放垃圾滲濾液水溶性有機(jī)物的熒光特性

    2010-12-26 02:49:52何小松席北斗魏自民李鳴曉耿春茂胡春明東北農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院黑龍江哈爾濱50030中國環(huán)境科學(xué)研究院水環(huán)境系統(tǒng)工程研究室北京000東北農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)院黑龍江哈爾濱50030
    中國環(huán)境科學(xué) 2010年6期
    關(guān)鍵詞:腐殖質(zhì)色氨酸酪氨酸

    何小松,席北斗,魏自民,李鳴曉,3,蘇 婧,耿春茂,王 威,胡春明 (.東北農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,黑龍江 哈爾濱 50030;.中國環(huán)境科學(xué)研究院水環(huán)境系統(tǒng)工程研究室,北京 000;3.東北農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)院,黑龍江 哈爾濱 50030)

    堆放垃圾滲濾液水溶性有機(jī)物的熒光特性

    何小松1,2,席北斗2,魏自民1*,李鳴曉2,3,蘇 婧2,耿春茂1,2,王 威1,胡春明1,2(1.東北農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,黑龍江 哈爾濱 150030;2.中國環(huán)境科學(xué)研究院水環(huán)境系統(tǒng)工程研究室,北京 100012;3.東北農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)院,黑龍江 哈爾濱 150030)

    為揭示堆放垃圾滲濾液物質(zhì)組成特性及其變化規(guī)律,采用三維熒光光譜,對(duì) 4個(gè)不同垃圾堆場(chǎng)滲濾液水溶性有機(jī)物(DOM)進(jìn)行了研究.結(jié)果顯示,堆放垃圾滲濾液樣品S1中含有2類蛋白熒光峰:類酪氨酸熒光峰和類色氨酸熒光峰,其他3個(gè)樣品(S2、S3及S4)只含有類色氨酸熒光峰,此外還出現(xiàn)了類腐殖質(zhì)熒光峰,且不同樣品中該峰的數(shù)目、類型及位置均存在差異,顯示滲濾液樣品 S1只含有類蛋白類物質(zhì),而其他3個(gè)樣品除此之外還含有類腐殖質(zhì)物質(zhì),且腐殖化程度各異.類蛋白類物質(zhì)-Hg(II)配位研究顯示,與類色氨酸熒光峰相比,類酪氨酸熒光峰更易受介質(zhì)微環(huán)境改變影響;室溫培養(yǎng)模擬研究顯示,與類腐殖質(zhì)物質(zhì)相比,類蛋白類物質(zhì)更易發(fā)生降解.三維熒光光譜可以有效表征堆場(chǎng)滲濾液DOM物質(zhì)組成及其變化規(guī)律.

    堆放垃圾;滲濾液;水溶性有機(jī)物;三維熒光光譜

    由于經(jīng)濟(jì)、技術(shù)等原因,我國有相當(dāng)一部分城鎮(zhèn)生活垃圾露天堆放處理.據(jù)朱青山等[1]的調(diào)查顯示,在三峽工程淹沒區(qū),堆放垃圾總量已達(dá)330萬t,分布在140多個(gè)堆放點(diǎn).李霖濱等[2]的統(tǒng)計(jì)表明,截止2005年底,我國非衛(wèi)生填埋及堆放處理垃圾量已達(dá)60億t.垃圾堆放不僅占據(jù)大量土地,而且產(chǎn)生大量的滲濾液.垃圾滲濾液中含有多種污染成分,水溶性有機(jī)物(DOM)是其中很重要的一類污染物,其含量占滲濾液總有機(jī)碳的80%以上[3].因此,對(duì)滲濾液DOM物質(zhì)組成的研究,可以有效表征不同垃圾堆場(chǎng)的物質(zhì)組成及污染特性,為堆放垃圾的管理及滲濾液處理提供借鑒.

    滲濾液DOM組成復(fù)雜,含有揮發(fā)性有機(jī)酸、多聚糖、腐殖質(zhì)等多種有機(jī)成分,目前對(duì)滲濾液DOM 物質(zhì)組成特性的分析,應(yīng)用較多的有GC-MS聯(lián)用、紅外光譜和核磁共振等技術(shù)[4-7]. GC-MS聯(lián)用可確定滲濾液DOM物質(zhì)種類,紅外光譜法可以辨別化合物的特征官能團(tuán),核磁共振法可提供有機(jī)分子骨架的信息,敏感地反映碳核所處化學(xué)環(huán)境的細(xì)微差別.不足的是,采用上述技術(shù)研究滲濾液 DOM時(shí),樣品前處理復(fù)雜,不利于連續(xù)快速分析.熒光光譜是基于分析物質(zhì)中含有大量帶有各種低能量 π-π*躍遷的芳香結(jié)構(gòu)或共軛生色團(tuán)以及未飽和脂肪鏈分析有機(jī)物的,它具有樣品前處理簡(jiǎn)單、分析快捷(約1min)、靈敏度高(10-9數(shù)量級(jí))、用量少(1~2mL)和不破壞樣品結(jié)構(gòu)等優(yōu)點(diǎn)[8],自從1949年Kalle開創(chuàng)性地將其應(yīng)用于有機(jī)質(zhì)結(jié)構(gòu)特征研究后,熒光光譜便廣泛應(yīng)用于不同來源DOM物質(zhì)組成特性的分析[9-12].三維熒光光譜能夠獲得激發(fā)波長(zhǎng)和發(fā)射波長(zhǎng)同時(shí)改變的光譜信息,反映出化合物完整的熒光信息,可以將DOM中各種類型的熒光物質(zhì)一一地表征出來,如類蛋白類物質(zhì)、類腐殖質(zhì)物質(zhì).本研究以 4個(gè)不同堆放垃圾滲濾液DOM為研究對(duì)象,分析了其三維熒光光譜特性及其變化規(guī)律,以期為堆放垃圾的管理及環(huán)境風(fēng)險(xiǎn)評(píng)價(jià)提供依據(jù).

    1 材料與方法

    1.1 樣品采集與預(yù)處理

    供試滲濾液于2007年6月取自4個(gè)不同的垃圾堆放地,分別編號(hào)為S1、S2、S3及S4. S1取自某小區(qū)臨時(shí)垃圾堆存點(diǎn),基本上為新鮮生活垃圾所產(chǎn)生;S2、S3分別取自2個(gè)不同的街道角落堆存垃圾,由混合在一起的新舊垃圾共同產(chǎn)生;S4取自一廢棄的垃圾堆場(chǎng),為陳腐垃圾所產(chǎn)生.樣品采集后,于12000r/min離心20min,并將上清液過 0.45μm的濾膜,濾液中有機(jī)物即為滲濾液DOM.

    1.2 類蛋白物質(zhì)-Hg(II)配位反應(yīng)實(shí)驗(yàn)

    為了分析類蛋白物質(zhì)與 Hg(II)的配位作用,取7個(gè)50mL的錐形瓶,每個(gè)瓶中均加入樣品S1溶液 20mL,然后分別滴加濃度為 0.01mol/L或0.001mol/L的Hg(NO3)2溶液,使7個(gè)錐形瓶中的Hg(II)濃度依次為0, 1, 2, 3, 4, 5, 6μmol/L,使用2種濃度(0.1mol/L和0.01mol/L)的HClO4和NaOH溶液調(diào)各樣品pH8.0±05,加入的酸堿試劑總量不超過 100μmol,忽略濃度稀釋效應(yīng),在恒溫震蕩器中30℃、180r/min避光震蕩24h,相同溫度下再避光靜止4h,待反應(yīng)平衡后,進(jìn)行光譜測(cè)定[13].

    1.3 水溶性有機(jī)物恒溫培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)

    將所采集的滲濾液樣品S3置于30℃恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)30d,然后進(jìn)行熒光測(cè)試.

    1.4 熒光光譜測(cè)定

    熒光光譜測(cè)定采用儀器為Perkin Elmer Luminescence Spectrometer LS50B.該儀器的主要性能參數(shù)如下,激發(fā)光源:150W 氙弧燈;PMT電壓 :700V;信噪比>110;帶通(Bandpass):Ex= 10nm;Em=10nm;響應(yīng)時(shí)間:自動(dòng);掃描光譜進(jìn)行儀器自動(dòng)校正.三維熒光光譜測(cè)定時(shí)激發(fā)波長(zhǎng)Eex=200~450nm,發(fā)射波長(zhǎng) Eem=300~550nm,掃描速度:1200nm/min.

    2 結(jié)果與討論

    2.1 不同垃圾堆場(chǎng)滲濾液DOM熒光特性

    由圖1可見,樣品S1的三維熒光光譜圖出現(xiàn)了4個(gè)熒光峰:Peak 1、Peak 2、Peak 3和Peak 4,其最大熒光峰位置所對(duì)應(yīng)激發(fā)/發(fā)射波長(zhǎng)依次為275/315nm、220/315nm、275/350nm及220/348nm.根據(jù)Clobe等[8-9,12]的報(bào)道可知,上述4個(gè)熒光峰均為類蛋白熒光峰,其中Peak1、Peak 2為類酪氨酸熒光峰,與酪氨酸及其代謝產(chǎn)物有關(guān);Peak 3、Peak 4為類色氨酸峰,peak 4與色氨酸及其代謝物有關(guān),Peak 3除了與色氨酸有關(guān)外,一些可溶性微生物代謝副產(chǎn)物和苯酚類物質(zhì)也在該處出現(xiàn)熒光峰[14].Hudson等[15]認(rèn)為,當(dāng)色氨酸在 Peak 3和Peak 4位置處出現(xiàn)熒光峰時(shí),與其存在形態(tài)無關(guān),即色氨酸無論是游離態(tài),還是以結(jié)合態(tài)形式存在多肽、蛋白質(zhì)或腐殖質(zhì)類物質(zhì)中,均會(huì)在Peak 3和Peak 4的位置處出現(xiàn)熒光峰,由于在樣品S1的三維熒光光譜圖中未出現(xiàn)與腐殖質(zhì)有關(guān)的熒光峰——類腐殖質(zhì)峰,因此,Peak 3、Peak 4中的色氨酸只能為游離態(tài)或結(jié)合在非腐殖質(zhì)物質(zhì)上.此外,已有研究表明[14],三維熒光光譜中類蛋白熒光峰的出現(xiàn)與微生物活動(dòng)有關(guān),可以通過環(huán)境中微生物的活動(dòng)形成,因此,樣品S1中Peak 1、 Peak 2、Peak 3和Peak 4 4個(gè)熒光峰的出現(xiàn),表明在堆放垃圾滲濾液中微生物活躍,其水溶性有機(jī)物中含有大量的垃圾降解產(chǎn)物.

    與樣品S1相比,樣品S2三維熒光光譜圖中類酪氨酸熒光峰Peak1、Peak 2消失了,同時(shí)在激發(fā)/發(fā)射波長(zhǎng)為310/435nm處新出現(xiàn)了Peak 5(圖1),Antīzar-Ladislao等[16]指出,該峰的出現(xiàn)預(yù)示著堆肥過程中胡敏酸的形成.因此,這表明在樣品S2中,除了類蛋白類物質(zhì)外,還含有胡敏酸物質(zhì),樣品S2所在堆場(chǎng)垃圾進(jìn)行了腐殖化過程.

    圖1 不同堆放垃圾滲濾液DOM三維熒光譜Fig.1 Three-dimensional excitation emission matrix fluorescence spectroscopy of DOM of leachate from different dumped waste

    Baker等[9]研究表明,藥劑、殺蟲劑、致癌物等異質(zhì)性有機(jī)物(XOM),如萘、菲等的熒光峰常常出現(xiàn)在類色氨酸峰附近,并伴隨著微環(huán)境的改變最大激發(fā)/發(fā)射波長(zhǎng)發(fā)生移動(dòng).圖 1顯示,樣品S3中類色氨酸熒光峰Peak 3、Peak 4的最大峰位置均發(fā)生了紅移,由樣品S1中的275/350nm和220/348nm紅移至樣品 S3中的 280/373nm和 220/375nm,說明該樣品中可能含有大量的異質(zhì)性有機(jī)物質(zhì).此外,圖1還顯示,樣品S3中新出現(xiàn)了 Peak 6,該峰的最大峰位置難以確定,據(jù) Chen等[15]的報(bào)道可知,Peak 6為類富里酸峰,與腐殖質(zhì)中的富里酸物質(zhì)有關(guān).Jouraiphy等[17]認(rèn)為,隨著垃圾堆放時(shí)間的延長(zhǎng),富里酸會(huì)被降解,通過生物氧化作用合成更為復(fù)雜的腐殖質(zhì),致使該峰隨著垃圾堆放時(shí)間的延長(zhǎng)逐漸減弱直至消失.

    從樣品S2和S3的三維熒光光譜圖中可以發(fā)現(xiàn),垃圾堆放過程中首先出現(xiàn)的是類胡敏酸熒光峰,而后才是類富里酸熒光峰,即在堆放垃圾的腐殖化過程中,首先形成的是胡敏酸物質(zhì),隨后才是富里酸物質(zhì),表明堆放垃圾中的物質(zhì)轉(zhuǎn)化不僅可以由富里酸生物合成胡敏酸,也可能由胡敏酸生物降解成富里酸.

    樣品 S4取自一陳腐垃圾堆場(chǎng),其滲濾液DOM 的三維熒光光譜中除了觀察到樣品 S1、S2、S3所出現(xiàn)的6個(gè)熒光峰外,還出現(xiàn)了Peak 7,其最大熒光強(qiáng)度對(duì)應(yīng)的激發(fā)/發(fā)射波長(zhǎng)為290/423nm,據(jù)Shao等[12]的報(bào)道可知,該峰也為類腐殖質(zhì)熒光峰,可能為Peak 5和Peak 6之間過渡類型的熒光峰,來源于富里酸降解生成更為復(fù)雜的腐殖質(zhì)的過程.樣品S4中Peak 5最大熒光峰對(duì)應(yīng)的激發(fā)/發(fā)射波長(zhǎng)為335/420nm,而樣品S2、S3該峰分別為310/435nm和330/406nm,Shao等[12]認(rèn)為,有機(jī)質(zhì)腐殖化程度越大,苯環(huán)結(jié)構(gòu)含量越多,芳烴類化合物縮合度越高,其對(duì)應(yīng)腐殖質(zhì)熒光峰的激發(fā)波長(zhǎng)越長(zhǎng),因此,上述3個(gè)樣品Peak 5熒光峰位置的不同表明它們的腐殖化程度存在較大差別,其大小依次為:S4>S3>S2.從圖1還可發(fā)現(xiàn),樣品S4中類色氨酸峰相對(duì)較弱,而3個(gè)與腐殖質(zhì)有關(guān)的熒光峰均較強(qiáng),致使臨近的類色氨酸熒光峰側(cè)翼被掩蓋,表明在陳腐垃圾樣品 S4中,類蛋白類物質(zhì)較少,主要成分為垃圾腐殖化過程形成的腐殖質(zhì)類物質(zhì).

    圖2 Hg(Ⅱ)對(duì)樣品S1三維熒光光譜的影響Fig.2 Effect of Hg(Ⅱ) on 3DEEM spectra of sample S1

    2.2 類蛋白物質(zhì)-Hg(Ⅱ)配位特性

    Hudson等[15]認(rèn)為,類蛋白熒光峰與微生物活性有關(guān),可以通過微生物活動(dòng)形成.另一方面,相對(duì)于腐殖質(zhì)而言,類蛋白熒光峰所代表的類蛋白物質(zhì)由于結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單,更易被微生物作為能源或合成其他物質(zhì)的材料而利用.重金屬是環(huán)境中的一類危害性較大的毒性物質(zhì),常常與蛋白質(zhì)結(jié)合而影響微生物活性,導(dǎo)致堆體垃圾降解緩慢.此外,Hg、 Cu、Fe等順磁性金屬離子還能產(chǎn)生熒光猝滅效應(yīng),當(dāng)把它們加入含有類蛋白物質(zhì)的 DOM溶液后,會(huì)使類蛋白熒光強(qiáng)度急劇下降,除此之外是否會(huì)產(chǎn)生其他效應(yīng),目前研究較少[13].基于此,本研究選擇對(duì)環(huán)境危害較大的重金屬Hg和類蛋白熒光峰含有數(shù)目最多的滲濾液樣品S1,研究不同Hg(Ⅱ)濃度下樣品S1中4個(gè)類蛋白熒光峰的變化,以探討不同類蛋白物質(zhì)與Hg(Ⅱ)的配位特性.

    圖2顯示,當(dāng)樣品S1中未加入Hg(Ⅱ)時(shí),類酪氨酸峰和類色氨酸峰均存在,當(dāng)樣品 S1中的Hg(Ⅱ)濃度為 1μmol/L時(shí),類酪氨酸熒光峰消失了,而類色氨酸熒光峰的熒光強(qiáng)度卻發(fā)生了增強(qiáng),這可能是在該Hg(Ⅱ)濃度下,酪氨酸殘基的熒光發(fā)射譜與色氨酸殘基熒光激發(fā)譜重疊,通過偶極-偶極的共振偶合作用使能量從酪氨酸殘基轉(zhuǎn)移到色氨酸殘基上造成的,然而,當(dāng)溶液中的Hg(Ⅱ)濃度上升為 2μmol/L時(shí),類色氨酸熒光峰由于Hg(Ⅱ)的熒光猝滅效應(yīng),熒光強(qiáng)度降低了,而類酪氨酸熒光峰又出現(xiàn)了,并且此時(shí)的熒光強(qiáng)度強(qiáng)于沒加Hg(Ⅱ)的原液,這可能是當(dāng)溶液中的Hg(Ⅱ)濃度為2μmol/L時(shí),類酪氨酸物質(zhì)與Hg(Ⅱ)形成的復(fù)合物致使前者剛性結(jié)構(gòu)增強(qiáng),隨后隨著溶液中Hg(Ⅱ)濃度的進(jìn)一步增加,Peak 2和Peak 4緩慢下降,Peak 1和Peak3趨于穩(wěn)定,但峰形均變化不大(圖2,圖3)

    由于類酪氨酸熒光峰位置易受介質(zhì)微環(huán)境的影響,再加上酪氨酸代謝物的熒光效率一般很低,并且結(jié)合在腐殖質(zhì)上的類酪氨酸常發(fā)生能量轉(zhuǎn)移現(xiàn)象,因此,它對(duì)滲濾液DOM熒光強(qiáng)度的貢獻(xiàn)并不大,在許多堆場(chǎng)滲濾液DOM中,常常觀察不到該峰(圖1).

    圖3 Hg(Ⅱ)對(duì)樣品S1三維熒光光譜中各峰強(qiáng)度的影響Fig.3 Effect of Hg(Ⅱ) on the intensity of each peak in 3DEEM spectra of sample S1

    2.3 滲濾液水溶性有機(jī)物降解的熒光特性

    圖4 樣品S3培養(yǎng)30d后三維熒光光譜的改變Fig.4 3DEEM of sample S3 before and after 30days

    堆場(chǎng)滲濾液組成復(fù)雜,其中除了含有大量有機(jī)物外還含有種類繁多的微生物,致使 DOM在堆體垃圾中極易發(fā)生改變.以樣品 S3為例,研究了滲濾液DOM在30℃恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)時(shí)三維熒光光譜中各峰的改變,以模擬垃圾堆放過程中滲濾液中不同熒光物質(zhì)的變化.圖4顯示,當(dāng)樣品S3在30℃恒溫培養(yǎng)30d時(shí),DOM中的熒光峰發(fā)生了較大變化,Peak 3、Peak 4均發(fā)生了藍(lán)移:280/373nm處的熒光峰移至 280/348nm處220/375nm處的熒光峰也移至220/348nm處.藍(lán)移現(xiàn)象的發(fā)生,可能是滲濾液芳香環(huán)減少、長(zhǎng)鏈結(jié)構(gòu)中對(duì)位鍵減少、線性環(huán)狀結(jié)構(gòu)向非線性環(huán)狀結(jié)構(gòu)轉(zhuǎn)化或微生物活動(dòng)所致[8],即滲濾液中有機(jī)質(zhì)的降解所引起.圖4還顯示,Peak 5和Peak 6在培養(yǎng)過程中未發(fā)生明顯改變,這可能是類腐殖質(zhì)物質(zhì)結(jié)構(gòu)復(fù)雜,難以降解或氧化造成的.

    3 結(jié)論

    3.1 三維熒光光譜能有效表征堆場(chǎng)滲濾液DOM 的物質(zhì)組成,通過不同類型熒光峰的分析可知滲濾液中微生物活躍,其水溶性有機(jī)物中含有大量的微生物降解產(chǎn)物及不同腐殖化程度的腐殖質(zhì)類物質(zhì).

    3.2 在介質(zhì)金屬離子Hg(II)濃度改變的過程中,類蛋白熒光峰的熒光強(qiáng)度發(fā)生明顯改變,與類色氨酸相比,類酪氨酸熒光峰位置更易受 Hg(II)濃度改變影響.

    3.3 滲濾液水溶性有機(jī)物中類蛋白物質(zhì)容易發(fā)生開環(huán)降解,而腐殖質(zhì)類物質(zhì)相對(duì)穩(wěn)定,短期室溫環(huán)境下變化不大.

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    Fluorescence characteristics of dissolved organic matter from dumped waste leachate.

    HE Xiao-song1,2, XI Bei-dou2, WEI Zi-min1*, LI Ming-xiao1,3, Su Jing2, GENG Chun-mao1,2, WANG Wei1, HU Chun-ming1,2(1.College of Life Science, Northeast Agricultural University, Harbin 150030, China;2.Laboratory of Water Environmental System Engineering, Chinese Research Academy of Environmental Science, Beijing 100012, China;3.College of Agriculture, Northeast Agricultural University, Harbin 150030, China). China Environmental Science, 2010,30(6):752~757

    In order to reveal the characteristics of composition of leachates from dumped waste and their variations, three-dimensional excitation-emission matrix fluorescence spectroscopy (3DEEM) were applied for dissolved organic matter (DOM) of leachates extracted from four different dumped waste. Leachate sample S1 contained two different kinds of protein-like fluorescence peak, i.e., tyrosine-like and tryptophan-like fluorescence peaks. The other three samples (S2, S3 and S4), however, in addition to tryptophan-like fluorescence, contained humus-like fluorescence peaks as well, and the number, type and location of the peaks were different in according to samples. Leachate samples S1 contained only protein-like matter, while the other three samples contained both humus-like matter and protein-like matter, and the degree of humification of humus-like matter varied in different samples. The complexation between the protein-like matter in sample S1 and Hg (II) indicated that, compared with tryptophan-like fluorescence peak, tyrosine-like fluorescence peak could be more easily impacted by the micro-environmental change; the results of culture experiments at room temperature demonstrated that, protein-like substance could be easily broken, while humus-like substance shown strong resistance to microbe. 3DEEM could be effectively characterized the composition of DOM of leachates from dumped waste and their variations.

    dumped waste;leachate;dissolved organic matter;three-dimensional excitation-emission matrix fluorescence spectroscopy

    2009-10-14

    國家“973”項(xiàng)目(2005CB724203);國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(50878201);黑龍江省自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(C200901)

    * 責(zé)任作者, 教授, weizimin691120@126.com

    X705

    A

    1000-6923(2010)06-0752-06

    何小松(1982-),男,湖南道縣人,東北農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院碩士研究生,主要從事固體廢物處理處置研究.發(fā)表論文5篇.

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