胃癌組織中端粒酶和PCNA的表達及臨床意義

何小兵 (長江大學醫(yī)學院，湖北 荊州 434023)

王衛(wèi)政 (長江大學附屬第一醫(yī)院 荊州市第一人民醫(yī)院消化內(nèi)科，湖北 荊州 434000)

胃癌組織中端粒酶和PCNA的表達及臨床意義

何小兵
(長江大學醫(yī)學院，湖北 荊州 434023)

王衛(wèi)政
(長江大學附屬第一醫(yī)院 荊州市第一人民醫(yī)院消化內(nèi)科，湖北 荊州 434000)

目的：探討端粒酶、增殖細胞核抗原(PCNA)在胃癌發(fā)生發(fā)展中的作用。方法：采用免疫組化SP法檢測胃癌60例和胃炎24例(其中慢性萎縮性胃炎伴腸化生14例, 慢性淺表性非典型增生胃炎10例)組織中端粒酶及PCNA活性。結(jié)果：端粒酶在胃癌中的陽性表達率為76.67%,胃炎組織為20.83%,兩者相比差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；PCNA分別為73.30%、25.00%,兩者差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。結(jié)論：端粒酶和PCNA參與了胃癌的發(fā)生發(fā)展過程，檢測端粒酶、PCNA活性對胃癌的早期診斷有一定的參考價值。

胃腫瘤；胃炎；端粒酶；增殖細胞核抗原

胃癌是嚴重威脅人類健康的一種疾病，目前對胃癌尚缺乏令人滿意的化學治療藥物。腫瘤化療最理想的靶點是腫瘤細胞特有而正常細胞中不存在的物質(zhì)。近年來發(fā)現(xiàn)，端粒酶在多種惡性腫瘤中都有較高的活性，是惡性腫瘤區(qū)別于正常細胞的重要物質(zhì)基礎。研究表明,端粒酶通過合成端粒DNA,阻止端粒消失,使細胞永生化而導致腫瘤的發(fā)生,是一種新的有望成為腫瘤早期診斷和治療的標志物[1]。增殖細胞核抗原(PCNA)是一種僅在增殖細胞中合成與表達的多肽,表示細胞正處于增殖狀態(tài),近年來已廣泛用于腫瘤細胞的動力學研究。筆者采用免疫組化法檢測胃癌和胃炎組織中的端粒酶、PCNA活性,探討兩者在胃癌發(fā)生、發(fā)展過程中的作用及其臨床意義。

1 對象與方法

1.1對象長江大學附屬第一人民醫(yī)院2008年3月至2010年2月收治的未經(jīng)放療、化療的胃癌患者60例,其中男36例,女24例,年齡25～65歲,均留取手術(shù)切除的胃癌標本。對照組為胃炎病例24例，其中慢性萎縮性胃炎伴腸化生14例, 慢性淺表性非典型增生胃炎10例；男16例,女8例,年齡22～60歲,均為胃鏡活檢標本。

1.2端粒酶、PCNA檢測方法采用免疫組化SP法。染色步驟按試劑盒說明書進行。PBS代替一抗作陰性對照。端粒酶以細胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)棕黃色顆粒、PCNA以細胞核出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽性。計數(shù)10個高倍視野(×400)下不少于1500個細胞中陽性細胞所占百分比: <6%為(-)、≥6%為()。

1.3統(tǒng)計學處理采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件。數(shù)據(jù)比較用χ2檢驗。P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié) 果

2.1胃癌組織中端粒酶、PCNA的表達胃癌組織中端粒酶陽性率為76.67% (46/60)，胃炎組織中為20.83% (5/24), 兩者相比差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。胃癌組織中PCNA陽性表達率為73.30% (44/60),胃炎組織中為25.00 % (6/24), 兩者差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。

2.2端粒酶、PCNA表達與胃癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系見表1。由表1可知端粒酶、PCNA表達與胃癌的分化程度、病理分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無關(guān)(P>0.05)。

表1 端粒酶、PCNA表達與胃癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系

2.3胃癌組織中端粒酶、PCNA表達的關(guān)系在胃癌60例中，端粒酶、PCNA均呈陽性表達者18例，均陰性表達6例，兩者的表達無明顯相關(guān)性。

3 討 論

端粒是真核細胞線形染色體末端的重復DNA序列，其功能是防止染色體DNA的降解及末端融合，具有防止染色體末端丟失和決定細胞壽命的作用[2]。正常細胞端粒序列會隨著細胞有絲分裂而逐漸縮短，最終導致細胞失去復制能力而衰老死亡。端粒酶是一種核糖核蛋白復合體，其本質(zhì)是RNA指導的DNA聚合酶，能以自身RNA成分為模板，以端粒3’端突出的單鏈為引物，由催化亞單位催化，逆轉(zhuǎn)錄合成端粒DNA重復序列并添加到染色體末端，從而維持端粒長度及染色體的穩(wěn)定性，細胞因此可逃脫衰老和死亡過程，獲得無限增殖的能力，成為永生化的細胞[3]，而“永生化”正是細胞惡變的特征。自20世紀80年代末Morin等在人宮頸癌細胞中發(fā)現(xiàn)端粒酶以來，針對端粒酶的研究成了腫瘤研究的熱點。本研究顯示,胃癌中端粒酶、PCNA陽性表達率分別為76.67%、73.30%,而胃炎組織中兩者陽性率僅為20.83%、25.00%。在胃炎組織中端粒酶、PCNA表達的可能機制有以下幾點：①研究表明化生是調(diào)控分化的基因重新編程,在轉(zhuǎn)型分化的基礎上細胞在形態(tài)和功能上即已發(fā)生改變,此時腸化生的上皮對致癌物的吸收增強,在某些致癌因素作用下,易發(fā)生染色體突變,出現(xiàn)端粒危機,端粒酶激活,若細胞得以生存,則增殖癌變。②胃黏膜的非典型增生表現(xiàn)為腺上皮細胞的異型、極向紊亂、層次增多。研究證實此階段可有癌基因激活和抑癌基因的失活?？梢姸肆Ｃ富罨?、PCNA表達發(fā)生在胃黏膜癌變之前,一旦癌變即表達升高。為此應對端粒酶、PCNA陽性的癌前病變患者進行監(jiān)測,以便早期發(fā)現(xiàn)胃癌。同時研究顯示胃癌伴淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者PCNA表達雖高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者,進展期胃癌中PCNA表達較早期胃癌有增高趨勢,但無統(tǒng)計學意義。不過也提示PCNA陽性的癌細胞增殖旺盛,侵襲能力強易發(fā)生轉(zhuǎn)移,應加強對這部分患者的化療及綜合治療,以提高手術(shù)治療效果。

[1]鄒雄.我們能在2020年前控制腫瘤嗎[J]? 國外醫(yī)學：臨床生物化學與檢驗學分冊，2003，24(4)：187-188.

[2]Shay JW, Wright WE.H allmarks of telomeres in ageing research[J].J Pathol,2007,211：114-123.

[3]朱芮,熊永炎,熊小紅,等.胃癌端粒酶表達的預后研究[J].中國臨床醫(yī)學, 2001, 8(5): 86-88.

[編輯] 一 凡

10.3969/j.issn.1673-1409(R).2010.03.010

R735.2；R573.3

A

1673-1409(2010)03-R023-02