抗微生物避孕凝膠劑的制備及質量控制Δ

沈麗琳，劉苗苗，邵長風，張 穎，陳 堅（天津市計劃生育研究所，天津市 300191）

抗微生物避孕凝膠劑的制備及質量控制Δ

沈麗琳＊，劉苗苗，邵長風，張 穎，陳 堅（天津市計劃生育研究所，天津市 300191）

目的：制備抗微生物避孕凝膠劑，并建立其質量控制方法。方法：以辛苯聚醇、聚甲酚磺醛為主藥，羥丙甲纖維素等為基質制備凝膠。采用高效液相色譜法測定辛苯聚醇的含量，滴定法測定聚甲酚磺醛的含量。結果：所制制劑質地均勻、細膩、黏稠度適中，鑒別、檢查項均符合相關規(guī)定。辛苯聚醇檢測濃度的線性范圍為250～1500mg·L－1（r＝0.9996），平均回收率為100.84%（RSD＝0.74%，n＝9）；聚甲酚磺醛平均標示量106.64%（n＝3）。結論：該制劑制備工藝可行，質量穩(wěn)定，質控方法簡單、結果準確。

辛苯聚醇；聚甲酚磺醛；凝膠劑；質量控制

隨著性傳播疾病的流行，具有避孕作用的殺微生物劑正成為研究熱點[1]。辛苯聚醇作為殺精子劑早已被《美國藥典》收載；聚甲酚磺醛對多種病原體，包括革蘭陰性菌、革蘭陽性菌、真菌、支原體、衣原體、病毒等均有很強的殺滅作用。筆者即采用辛苯聚醇和聚甲酚磺醛研制了一種新型抗微生物避孕凝膠，并建立了質量標準，報道如下。

1 儀器與試藥

LC-6A型高效液相色譜（HPLC）儀、SPD-6AV紫外檢測器（日本島津公司）；NDJ-8S型黏度計（上海精密科學儀器有限公司）。

抗微生物避孕凝膠（簡稱避孕凝膠劑，自制，批號：071114、071120、071123，規(guī)格：每支5g，含2%辛苯聚醇和1.8%聚甲酚磺醛）；辛苯聚醇對照品（美國Alfa Aesar公司，批號：47750，純度：＞99.9%）；辛苯聚醇原料藥（北京先通國際技術有限公司，批號：93-2570-5812，純度：99.96%）；聚甲酚磺醛原料藥（山東誠創(chuàng)醫(yī)藥技術開發(fā)有限公司提供，批號：050802，純度：47.5%）；甲醇為色譜純，其余試劑均為分析純。

2 處方與制備

根據預試驗結果，確定基質處方為羥丙甲纖維素3.0g，丙二醇10g，甘油10g。在此基礎上確定處方為辛苯聚醇2.0g，聚甲酚磺醛1.8g，羥丙甲纖維素3.0g，甘油10g，丙二醇10g，純化水加至100g。

稱取甘油和丙二醇混合均勻，加入羥丙甲纖維素后攪拌均勻，將處方量的辛苯聚醇加入上述混合液中攪拌均勻。聚甲酚磺醛中加入定量純化水混和均勻后，分次加入上述混合液中，邊加邊攪拌直至均勻，靜置，脫氣泡，分裝于密閉避光的容器中，備用。

3 質量控制

3.1 性狀

本品為紅棕色、透明、質地均勻的半固體凝膠制劑。

3.2 鑒別

辛苯聚醇：“含量測定”項下，所得色譜圖中其主峰的保留時間應與對照品一致。聚甲酚磺醛：取本品適量，加水稀釋成每1mL中含1mg的聚甲酚磺醛溶液，搖勻，取5mL，加三氯化鐵試液3～5滴，即顯藍紫色。

3.3 黏度[2]

取本品100mL置于燒杯中進行黏度測定，3批樣品測定結果分別為26.95、28.17、27.84Pa·S ，平均黏度為27.65Pa·S，符合凝膠劑的有關規(guī)定。

3.4 衛(wèi)生學檢查[2]

取3批樣品，按《中國藥典》附錄項下有關規(guī)定進行微生物限度檢查，結果符合規(guī)定。

3.5 聚甲酚磺醛含量測定

取樣品約0.5g，精密稱定，置于150mL容量瓶中，加蒸餾水30mL，振搖使其溶解后，加甲基橙指示劑2～3滴，用氫氧化鈉滴定液（0.1mol·L－1）滴定至黃色，每1mL的氫氧化鈉滴定液（0.1mol·L－1）相當于20mg的聚甲酚磺醛。根據氫氧化鈉滴定液消耗的毫升數，求出聚甲酚磺醛的含量。結果，3批樣品中聚甲酚磺醛標示量分別為106.66%、106.72%、106.55%，平均標示量為106.64%（n＝3）。

3.6 辛苯聚醇含量測定

3.6.1 對照品溶液的制備。精密稱取辛苯聚醇對照品500mg置于50mL容量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，即得濃度為10mg·mL－1對照品溶液。

3.6.2 樣品溶液的制備。精密稱取樣品約0.5g，置于10mL容量瓶中，加流動相適量待溶解后，稀釋至刻度，搖勻。取適量溶液于離心管中，在10000r·min－1離心5min，放至室溫后取上清液待測。

3.6.3 空白樣品溶液的制備。取適量空白凝膠劑（不含辛苯聚醇）置于50mL容量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，作為空白樣品溶液。

3.6.4 色譜條件。色譜柱：Agilent TC-C18（250mm×4.6mm，5μm）；流動相：甲醇-1%乙酸銨溶液（90∶10）；流速：1.0mL·min－1；檢測波長：276nm；進樣量：20μL。分別取“3.6.1～3.6.3”項下對照品溶液、空白樣品溶液和樣品溶液各20μL，在上述色譜條件下進行測定，結果辛苯聚醇與其它組分分離良好，見圖1。

圖1 高效液相色譜圖A.對照品；B.空白樣品；C.樣品；1.辛苯聚醇Fig 1HPLC chromatographyA.substance control；B.blank sample；C.sample；1.octoxynol

3.6.5 線性關系考察。精密稱取辛苯聚醇對照品適量置于容量瓶中，用流動相制成10mg·mL－1的對照溶液，搖勻、備用。取適量空白凝膠劑于容量瓶中，用蒸餾水稀釋至刻度，搖勻，作為稀釋液。精密吸取對照溶液，用稀釋液配制成250、500、750、1000、1500mg·L－1系列對照溶液，在上述色譜條件下進樣20μL，以辛苯聚醇的濃度為橫坐標（X），峰面積為縱坐標（Y），制備標準曲線并進行回歸處理，求得回歸方程為Y＝2×103X+11.2（r＝0.9996）。結果表明，辛苯聚醇檢測濃度在250～1500mg·L－1范圍內線性關系良好。

3.6.6 回收率試驗。取辛苯聚醇對照品適量，精密稱定，置于25mL容量瓶中，加稀釋液溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為樣品溶液，濃度為10.52mg·mL－1。取樣品溶液按濃度的80%、100%、120%配制溶液，各3份。在上述色譜條件下分別進樣20μL，記錄色譜，計算回收率，結果見表1。

3.6.7 精密度試驗。精密吸取同一濃度對照品溶液，在上述色譜條件下重復進樣6次，測得峰面積的RSD＝0.64%。結果表明，儀器精密度良好。

3.6.8 專屬性試驗。取空白樣品，按“含量測定”項下方法處理并進樣分析。結果，聚甲酚磺醛和輔料對辛苯聚醇的測定無影響。

3.6.9 含量測定。精密稱取3批樣品各約0.5g，分別置于容量瓶中，加流動相溶解并稀釋至刻度。取適量溶液于2mL離心管中，離心（10000r·min－1）5min，取上清液20μL，在上述色譜條件下進樣分析，記錄色譜。結果3批樣品辛苯聚醇平均標示量（n＝3）分別為101.3%、102.54%、102.70%。

3.7 穩(wěn)定性試驗

為了考察該凝膠劑的穩(wěn)定性，參考《中國藥典》，分別對其進行了3個月加速、室溫放置1年、光照和離心條件下的穩(wěn)定性考察試驗。

3.7.1 加速試驗。將3批樣品于（30±2）℃、相對濕度（65±5）%恒溫箱中放置3個月進行加速試驗，并分別于第0、1、2、3個月時取樣，考察性狀和含量等質量指標。

3.7.2 室溫放置1年。取3批樣品在室溫自然條件下放置，并定期分別于第0、3、6、9、12個月時取樣，考察性狀和含量等質量指標。

3.7.3 光照試驗。取3批樣品放于玻璃樣品瓶中，置于（4000±500）Lx照度下放置，分別于第1、3、5、7、10d取樣，考察性狀和含量等質量指標。

3.7.4 離心試驗。取3批樣品各10g，置于離心管中，2500r·min－1離心30min，觀察凝膠劑分層情況。

結果，在上述各試驗條件下，凝膠劑的性狀、含量等與初始狀態(tài)比較未見改變；辛苯聚醇的標示量均在90%～110%范圍內，聚甲酚磺醛的標示量均在85%～115%范圍內，表明該制劑具有較好的穩(wěn)定性。

表1 辛苯聚醇回收率試驗結果（n＝9）Tab 1Results of recovery test of octoxynol（n＝9）

4 討論

制備凝膠劑有多種基質可供選擇。由于聚甲酚磺醛是酸性物質，根據預試驗結果，選用對酸堿比較穩(wěn)定的羥丙甲纖維素為凝膠劑的基質。經優(yōu)化配方制備的凝膠劑，呈透明紅棕色，均勻細膩。制備工藝簡單、易行，藥物與陰道黏膜有良好的生物相容性，黏附時間長，不易流失，刺激性小[3]。穩(wěn)定性試驗結果表明，研制的凝膠劑具有良好的穩(wěn)定性。

將辛苯聚醇對照品溶液在200～400nm波長范圍內進行掃描，結果發(fā)現在276nm波長處有明顯的特征吸收，因此選用276nm作為檢測波長。本試驗建立HPLC法測定辛苯聚醇的含量，結果，該凝膠劑中的辛苯聚醇在高效液相色譜中，能與其它組分完全分離，方法簡便、快速、準確，可以滿足制劑的質控要求。聚甲酚磺醛是聚合物，酸性較強，故選用酸堿滴定法測定其含量。

聚甲酚磺醛可以殺滅多種微生物，臨床上用其治療宮頸糜爛、宮頸炎等陰道感染取得很好的療效；辛苯聚醇是殺精劑。采用二者為主藥研制的避孕凝膠劑在先期進行的體外試驗表明，該制劑具有明顯的抗微生物和殺精避孕作用[4]。因此，該制劑有望成為一種新型的外用抗微生物避孕凝膠劑。

[1] 王睿睿，葛爭鳴，馬 麗，等.具有避孕作用的殺微生物劑[J].中國新藥雜志，2005，14（3）：274.

[2] 國家藥典委員會編.中華人民共和國藥典（二部）[S].2005年版.北京：化學工業(yè)出版社，2005：176.

[3] 王 江，沈麗琳，陳 綺，等.復方辛苯聚醇凝膠的急性毒性及陰道刺激性研究[J].中國藥房，2007，18（22）：1693.

[4] 沈麗琳，侯慶昌，陳 綺，等.殺微生物避孕凝膠劑的抗生育和抗菌作用研究[J].中國計劃生育學雜志，2008，16（9）：533.

Preparation and Quality Control of Anti-Microbicide Contraceptive Gel

SHEN Li-lin，LIU Miao-miao，SHAO Chang-feng，ZHANG Ying，CHEN Jian（Tianjin Municipal Research Institute for Family Planning，Tianjin 300191，China）

OBJECTIVE：To prepare anti-microbicide contraceptive gel and establish its quality control method.METHODS：The gel was prepared with octoxynol and policresulen as main ingredients and HPMC as matrix.The content of octoxynol in the gel was determined by HPLC，and the content of policresulen in the gel was determined by titration method.RESULTS：Prepared gel was well-proportioned and of good viscidity and its identification and test were up to the standard.The linear rang of octoxynol was 250～1500mg·L－1（r＝0.9996）with an average recovery of 100.84%（RSD＝0.74%，n＝9）.The average labeled amount of policresulen was 106.64%（n＝3）.CONCLUSION：This preparation is feasible and stable in quality，and the quality control method is simple and accurate.

Octoxynol；Policresulen；Gel；Quality control

R927.11；R979.2+1

A

1001-0408（2010）09-0828-03

2009-04-10

2009-06-04）