吲哚拉明和延胡索鎮(zhèn)痛作用的比較醫(yī)學實驗研究

青島市市立醫(yī)院（266071）莊安士 丁虹

α受體頡頏劑的經(jīng)典作用是通過阻斷α1、α2受體產(chǎn)生血管擴張、血壓降低、興奮心功能以及擬膽堿和組胺樣作用。其興奮心功能作用是通過阻斷α2受體促進去甲腎上腺素釋放，進而加強了β1作用，使心臟興奮。近幾年研究發(fā)現(xiàn)，α2受體不僅與促去甲腎上腺素釋放有關，還與其他參與痛覺過程的物質(zhì)如前列腺素等的釋放有關。研究還發(fā)現(xiàn)，疼痛的發(fā)生與痛覺傳遞與交感神經(jīng)有密切關系。但是以上結(jié)論還沒有得到臨床的證實。吲哚拉明是α受體頡頏劑，它能阻斷α1、α2受體，能夠?qū)桓猩窠?jīng)產(chǎn)生阻滯作用。現(xiàn)在對其是否具有鎮(zhèn)痛作用尚無定論，也沒有臨床確切的鎮(zhèn)痛效果。筆者采用小鼠扭體實驗和熱板法，以小鼠扭體反應次數(shù)和小鼠神經(jīng)模型縮爪反應潛伏期（HWL）為痛閾指標，對吲哚拉明在內(nèi)臟痛和神經(jīng)源性痛的鎮(zhèn)痛作用進行了研究。

1材料與方法

1.1 材料 體重18～24g的小鼠75只，均為雄性，由青島大學實驗動物中心提供。所有小鼠都按HWL<3s或>5s和扭體次數(shù)15min內(nèi)小于40或大于20為標準進行了篩選，去除了對刺激反應遲鈍和過于敏感的小鼠。實驗期間都正常自由取食和飲水，光暗周期12h/12h。實驗藥品是吲哚拉明和0.55%冰醋酸溶液。以上藥品在進行注射時均用生理鹽水配置成對應的濃度。

1.2 方法 實驗分為兩個部分，熱板實驗和扭體實驗。熱板法：取18只小鼠隨機分為三組，每組6只，分別為正常組、對照組（生理鹽水組）和實驗給藥組（吲哚拉明組）。首先，對實驗小鼠進行4天的熱板刺激適應性訓練，使小鼠的對熱刺激反應較為平穩(wěn)。實驗用熱板溫度為55攝氏度并維持。其次，制備神經(jīng)痛模型，將對照組和吲哚拉明組的小鼠進行外周神經(jīng)損傷的神經(jīng)痛模型。對小鼠腹腔內(nèi)注射魯米那（35mg/kg）麻醉，而后分離左側(cè)坐骨神經(jīng)，在坐骨神經(jīng)的中段2mm處用4號羊線疏松結(jié)扎5線，縫合好皮膚。然后飼養(yǎng)6天后進行熱刺激實驗。實驗組腹腔注射吲哚拉明3mg/kg，對照組同樣腹腔注射同體積生理鹽水。分別在給藥的第1、2、3、4天測試小鼠對熱刺激的縮爪反應潛伏期（HWL）。

醋酸扭體法：取48只小鼠隨機分為8組，每組6只。8組小鼠再隨機分為2大組，每大組有4小組。兩大組分別為對照醋酸組和吲哚拉明組。吲哚拉明組腹腔注射3.5mg/kg吲哚拉明，對照醋酸組腹腔注射同體積的生理鹽水。然后所有兩大組中的4小組又隨機分別在吲哚拉明組注射吲哚拉明后的第1d、2d、3d、4d接受腹腔注射0.55%冰醋酸溶液0.2ml，產(chǎn)生扭體反應，記錄小鼠15min內(nèi)扭體次數(shù)。

1.3 統(tǒng)計學處理 研究和處理只選取實驗中的第1、2、3、4天的數(shù)據(jù)，所有數(shù)據(jù)均為均數(shù)±標準差（±s）表示，統(tǒng)計分析用完全隨機的方差分析（單因素方差分析），各組均數(shù)間比較用Student-Newman-Keuls法。所有統(tǒng)計分析H0均為沒有差別，H1為有差別，均以P<0.01為有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 吲哚拉明明顯增加小鼠對熱刺激的縮爪反應潛伏期（HWL）在1～4天的熱刺激實驗中，坐骨神經(jīng)結(jié)扎的對照組（生理鹽水組）和吲哚拉明組的HWL都明顯低于正常未被結(jié)扎小鼠的HWL值，P<0.01。對照組與吲哚拉明組的HWL值明顯具有統(tǒng)計學意義的差別，表現(xiàn)為在1～4天的熱板實驗中，吲哚拉明組HWL都顯高于對照組的HWL，P<0.01。熱板實驗數(shù)據(jù)見附表1。

2.2 吲哚拉明明顯抑制小鼠的扭體反應次數(shù) 在1～4天的腹腔內(nèi)注射0.55%冰醋酸溶液0.2ml后，吲哚拉明組和對照醋酸組的扭體反應次數(shù)具有明顯的統(tǒng)計學意義，表現(xiàn)為每天的吲哚拉明組小鼠明顯扭體反應次數(shù)都明顯低于醋酸對照組，P<0.01。扭體實驗數(shù)據(jù)見附表2。

3 討論

交感神經(jīng)的功能障礙、神經(jīng)節(jié)的受損等與交感神經(jīng)性疼痛有關。這種疼痛的神經(jīng)病理學的主要表現(xiàn)為交感神經(jīng)介導性[1]。目前在臨床中所遇到的部分急性疼痛和多數(shù)慢性疼痛，大都是混合性疼痛。其疼痛機理復雜，有多種化學物質(zhì)、遞質(zhì)、受體、神經(jīng)纖維、激素等參與其中。痛因不同而有不同的臨床表現(xiàn)[2]。本實驗觀察到，在注射吲哚拉明后，外創(chuàng)性慢性神經(jīng)痛模型的小鼠在熱板法中明顯產(chǎn)生了HWL延長的現(xiàn)象；而在醋酸法中，注射了吲哚拉明的小鼠明顯較少了扭體次數(shù)。這些都說明作為α受體阻斷劑的吲哚拉明有明顯的鎮(zhèn)痛作用。

神經(jīng)損傷后，交感神經(jīng)在后根神經(jīng)節(jié)或末梢神經(jīng)水平上，對感覺神經(jīng)系統(tǒng)給予影響；交感神經(jīng)節(jié)后纖維、兒茶酚胺局部或全身用藥時即可引起反應；其機制是由于交感神經(jīng)纖維內(nèi)存在的兒茶酚胺、神經(jīng)肽Y分別作用于α1、α2受體或Y1、Y2受體的結(jié)果。痛過用羊腸線疏松結(jié)扎坐骨神經(jīng)的方法，建立的外創(chuàng)性慢性神經(jīng)痛小鼠模型已廣泛應用各類疼痛研究實驗中[3]。臨床上類似的疼痛病例表現(xiàn)為灼痛等難耐性疼痛。這種疼痛與交感神經(jīng)有密切關系，往往采用物理或藥物破壞神經(jīng)節(jié)的方法。但現(xiàn)在發(fā)現(xiàn)這一方法有著不可忽視的不良反應，且效果還有待進一步地探討。因此，對于采用藥物阻滯交感神經(jīng)及其遞質(zhì)和受體的方法，已越來越得到重視。本實驗就觀察到α受體阻斷劑的吲哚拉明對慢性神經(jīng)痛模型小鼠有著明顯鎮(zhèn)痛作用,給人們已啟示。

附表1 外周神經(jīng)損傷慢性神經(jīng)痛模型小鼠腹腔注射吲哚拉明對熱刺激的縮爪反應潛伏期作用（HWL）(sec,±s,n=6)

附表1 外周神經(jīng)損傷慢性神經(jīng)痛模型小鼠腹腔注射吲哚拉明對熱刺激的縮爪反應潛伏期作用（HWL）(sec,±s,n=6)

注：①與正常組的HWL值比較，P＜0.01；②與生理鹽水（對照組）的HWL值比較，P＜0.01

組別 例數(shù) 腹腔注射吲哚拉明后的時間(天)1 2 3 4正常組 6 6.53±0.16 6.45±0.24 6.14±0.15 6.12±0.06生理鹽水組 6 4.43±0.17① 4.23±0.35① 4.16±0.28① 4.27±0.43①吲哚拉明組 6 5.57±0.14①② 5.95±0.36①② 5.56±0.17①② 5.34±0.43①②

附表2 小鼠腹腔注射吲哚拉明對0.55%冰醋酸的扭體作用（扭體次數(shù)）( ±s,n=6)

附表2 小鼠腹腔注射吲哚拉明對0.55%冰醋酸的扭體作用（扭體次數(shù)）( ±s,n=6)

注：① 與對照醋酸組扭體次數(shù)比較，P＜0.01

組別 例數(shù) 腹腔注射吲哚拉明后的時間(天)1 2 3 4對照醋酸組 6 25.73±1.17 26.25±2.34 25.55±2.17 26.46±1.85吲哚拉明組 6 8.24±1.16① 12.92±1.16① 15.57±2.11① 22.36±1.98①

總之，本實驗觀察到，建立慢性神經(jīng)痛模型的小鼠比正常小鼠在熱板法中表現(xiàn)出了極大的疼痛反應，其HWL值明顯縮短，表明這一疼痛的難耐性。在腹腔注射了吲哚拉明后，該模型的小鼠HWL值明顯比生理鹽水對照組延長，表明吲哚拉明有著明顯的鎮(zhèn)痛作用。但是筆者也觀察到其HWL值并沒有接近正常小鼠值，這說明吲哚拉明的鎮(zhèn)痛作用是否理想，可否應用于臨床治療，還有待于進一步研究。在醋酸法的實驗中，筆者觀察到注射吲哚拉明的小鼠其扭體次數(shù)明顯減少，這說明吲哚拉明對冰醋酸引起的內(nèi)臟痛有明顯的鎮(zhèn)痛作用。本實驗對α受體阻斷劑吲哚拉明具有鎮(zhèn)痛作用提供了有效的動物實驗依據(jù)。