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    神經(jīng)元特異性烯醇化酶(NSE)在肺癌中的表達(dá)及其價(jià)值

    2010-10-26 01:44:32牛繼國(guó)呼永華趙瑞萍包曉玲曾賢伍李文燕
    衛(wèi)生職業(yè)教育 2010年4期
    關(guān)鍵詞:肺癌血清檢測(cè)

    牛繼國(guó),董 峰,呼永華,梅 澍,趙瑞萍,包曉玲,曾賢伍,李文燕

    (1.甘肅省醫(yī)學(xué)科學(xué)研究院,甘肅 蘭州 730000;2.甘肅醫(yī)藥編輯部,甘肅 蘭州 730000)

    神經(jīng)元特異性烯醇化酶(NSE)在肺癌中的表達(dá)及其價(jià)值

    牛繼國(guó)1,董 峰1,呼永華1,梅 澍1,趙瑞萍1,包曉玲2,曾賢伍1,李文燕1

    (1.甘肅省醫(yī)學(xué)科學(xué)研究院,甘肅 蘭州 730000;2.甘肅醫(yī)藥編輯部,甘肅 蘭州 730000)

    目的探討腫瘤標(biāo)志物神經(jīng)元特異性烯醇化酶(NSE)在肺癌中的表達(dá)及其在肺癌診療過(guò)程中的臨床應(yīng)用價(jià)值。方法采用電化學(xué)發(fā)光免疫(ECLIA)技術(shù)分別對(duì)39例體檢健康者(對(duì)照組)和196例肺癌患者(肺癌組)的血清標(biāo)本進(jìn)行NSE的含量檢測(cè),分析其在肺癌中的表達(dá)及與其相關(guān)因素的關(guān)系。結(jié)果對(duì)照組血清中的NSE水平均在正常參考值范圍內(nèi),肺癌組與對(duì)照組相比NSE水平明顯升高,且對(duì)比有顯著性差異(P<0.01);NSE診斷效能的ROC分析顯示曲線下面積為0.810,P<0.001,95%可信區(qū)間為0.745~0.874。NSE在3種病理類型肺癌中的陽(yáng)性率情況為:最高為小細(xì)胞肺癌56.6%,其次是鱗癌43.8%和腺癌27.0%,經(jīng)比較其有顯著性差異(P<0.05及P<0.01)。表達(dá)水平與變量相關(guān)因素的逐步直線回歸分析顯示NSE只與小細(xì)胞肺癌有直線相關(guān)關(guān)系。結(jié)論對(duì)肺癌患者進(jìn)行血清NSE檢測(cè)有助于對(duì)不同病理類型肺癌的鑒別,尤其對(duì)小細(xì)胞肺癌的確診及對(duì)肺癌病程的推斷和預(yù)后等具有一定的臨床價(jià)值,對(duì)于臨床治療方案的制訂與調(diào)整具有指導(dǎo)意義。

    肺癌;NSE;表達(dá);ROC;相關(guān)因素

    1 材料與方法

    1.1 儀器與試劑

    1.1.1 儀器與材料 瑞士羅氏公司的2010型電化學(xué)發(fā)光檢測(cè)儀;安徽中佳公司生產(chǎn)的KDC-2046低速冷凍離心機(jī)。

    1.1.2 試劑 為瑞士羅氏公司2010型電化學(xué)發(fā)光檢測(cè)儀專用試劑,包括NSE檢測(cè)藥盒、清洗液(ISE Cleaning Solution);系統(tǒng)試劑(PROCELL);定標(biāo)夜;質(zhì)控試劑(PreciControl Tumor Marker)。

    1.2 研究對(duì)象

    1.2.1 對(duì)照組 采用電化學(xué)發(fā)光免疫(ECLIA)技術(shù)檢測(cè)已排除腫瘤的體檢健康者39例,其中男性19例,女性20例,平均年齡為(46.7±6.6)歲。

    1.2.2 肺癌組 196例肺癌患者均為我院2005年12月~2008年5月期間的住院患者,有明確的病理學(xué)診斷,其中男性130例,女性 66 例,平均年齡為(56.5±9.5)歲。其均為初診患者,未經(jīng)手術(shù)、化療等任何治療,后經(jīng)CT及支氣管鏡等檢查確診并經(jīng)病理學(xué)分析證實(shí)為腺癌63例(Ⅱa期3例、Ⅱb期4例、Ⅲa期13例、Ⅲb期19例、Ⅳ期24例),鱗癌80例(Ⅱa期13例、Ⅱb期11例、Ⅲa期12例、Ⅲb期26例、Ⅳ期18例),小細(xì)胞肺癌53例(Ⅱa期5例、Ⅱb期9例、Ⅲa期6例、Ⅲb期14例、Ⅳ期19例)。

    1.3 檢測(cè)方法

    (1)取被檢查者清晨空腹靜脈血4 ml,待凝固后以3000轉(zhuǎn)/分離心分離血清,2 h內(nèi)測(cè)定其NSE水平值,嚴(yán)格按照瑞士羅氏公司2010型電化學(xué)發(fā)光檢測(cè)儀及試劑盒說(shuō)明書(shū)操作規(guī)程進(jìn)行檢測(cè)。

    (2)測(cè)定方法。由瑞士羅氏公司生產(chǎn)的2010型電化學(xué)發(fā)光檢測(cè)儀(Elecsys 2010)全自動(dòng)完成。

    (3)檢測(cè)值判斷標(biāo)準(zhǔn)。檢驗(yàn)正常值判斷標(biāo)準(zhǔn)為0~16.3 ng/ml,若超出上述臨界值或正常范圍則為陽(yáng)性。

    1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

    所有數(shù)據(jù)均采用SPSS13.0軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。NSE在肺癌組與對(duì)照組中含量的比較因其數(shù)據(jù)為偏態(tài)分布,故運(yùn)用百分位數(shù)及秩和檢驗(yàn);其在不同病理類型肺癌中的陽(yáng)性率表達(dá)與分布采用卡方檢驗(yàn);對(duì)影響其檢測(cè)水平的相關(guān)因素分析通過(guò)數(shù)據(jù)的標(biāo)準(zhǔn)化后滿足回歸的前提條件線性、獨(dú)立、正態(tài)、等方差,以納入標(biāo)準(zhǔn)0.05,移除標(biāo)準(zhǔn)0.10選進(jìn)自變量,采用多元線性逐步回歸分析,以NSE作為因變量,將臨床中可能影響其檢測(cè)水平的11個(gè)因素,即性別X1,年齡X2;病理類型:肺腺癌X3、肺鱗癌X4、小細(xì)胞肺癌 X5、TX6、NX7;轉(zhuǎn)移部位:肺轉(zhuǎn)移 X8、骨轉(zhuǎn)移 X9、肝轉(zhuǎn)移X10、腦轉(zhuǎn)移X11作為自變量,進(jìn)行多元線性逐步回歸分析。

    2 結(jié)果

    2.1 肺癌組與對(duì)照組血清中NSE的檢測(cè)結(jié)果比較(見(jiàn)表1)

    表1結(jié)果表明,對(duì)照組血清中的NSE水平均在正常范圍內(nèi),肺癌組血清中NSE在3個(gè)百分位數(shù)的值均明顯高于對(duì)照組,且比較有顯著性差異(P<0.01)。

    2.2 NSE診斷效能的ROC分析(見(jiàn)圖1)

    表1 肺癌組和對(duì)照組血清中NSE檢測(cè)結(jié)果的比較

    圖1 NSE診斷效能的ROC分析

    NSE診斷效能的ROC分析如圖1所示,曲線下面積為0.810,P<0.001,95%可信區(qū)間為 0.745~0.874。

    2.3 不同病理類型中NSE檢測(cè)陽(yáng)性率的比較(見(jiàn)表2)

    表2 不同病理類型中NSE檢測(cè)陽(yáng)性率的比較

    將表2結(jié)果用更直觀的柱狀圖標(biāo)示(見(jiàn)圖2)。

    圖2 不同病理類型中NSE檢測(cè)陽(yáng)性率比較的柱狀圖

    從圖2可以直觀地看出NSE在這3種病理類型肺癌中的陽(yáng)性率,其比較具有顯著性差異(P<0.05 及 P<0.01)。

    2.4 影響肺癌腫瘤標(biāo)志物表達(dá)的相關(guān)因素分析(見(jiàn)表3)

    各項(xiàng)指標(biāo)影響因素的多元線性逐步回歸分析結(jié)果如表3所示。

    表3 各項(xiàng)指標(biāo)影響因素的多元線性逐步回歸分析結(jié)果

    各項(xiàng)指標(biāo)影響因素的多元線性逐步回歸分析結(jié)果顯示:NSE當(dāng)選進(jìn)和剔除變量,復(fù)相關(guān)系數(shù)R=0.642,認(rèn)為NSE的檢測(cè)水平與小細(xì)胞肺癌之間有直線相關(guān)關(guān)系。其他變量如年齡;肺腺癌、肺鱗癌;分期因素T、N;肺轉(zhuǎn)移、骨轉(zhuǎn)移、肝轉(zhuǎn)移、腦轉(zhuǎn)移均未能進(jìn)入變量方程,說(shuō)明其對(duì)NSE檢測(cè)水平表達(dá)的影響不具有相關(guān)性。

    3 討論

    腫瘤標(biāo)志物在肺癌的輔助診斷、病理分型、分期、轉(zhuǎn)移、復(fù)發(fā)及預(yù)后等方面的作用日益被人們認(rèn)識(shí),在肺癌的輔助診斷中,血清 CEA、NSE、CYFRA21-1、SCC-Ag、TPA、SF、CA125 和降鈣素等的檢測(cè)均被逐漸應(yīng)用到臨床研究中[3]。腫瘤標(biāo)志物在腫瘤臨床診斷中的作用及意義逐漸被人們揭示,已成為腫瘤臨床診斷的重要參考指標(biāo)之一。通過(guò)多年的研究和醫(yī)學(xué)實(shí)踐,認(rèn)為目前臨床使用腫瘤標(biāo)志物診斷腫瘤的關(guān)鍵在于合理應(yīng)用及正確評(píng)價(jià)[4]。

    神經(jīng)元特異性烯醇化酶(NSE)是由2個(gè)r亞單位組成的糖酵解酶,存在于正常神經(jīng)細(xì)胞和神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞內(nèi),神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞和神經(jīng)源性腫瘤中含有大量的NSE,其含量是正常肺組織中的3~35倍。小細(xì)胞肺癌(SCLC)是一種起源于神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞的腫瘤,具有明顯的神經(jīng)內(nèi)分泌(neuroendocrine,NE)分化特征。多數(shù)研究現(xiàn)已證實(shí),部分NSCLC亦伴有NE分化,同時(shí)在生物學(xué)行為上與其他NSCLC有很大差別,具有類似SCLC的生物學(xué)特性,對(duì)化療比較敏感,具有更強(qiáng)的腫瘤侵襲特性[5],這可能是NSE在NSCLC中為何異常表達(dá)的重要原因。NSE不僅在SCLC中明顯升高,在一些NSCLC中也有明顯升高,總陽(yáng)性率達(dá)50%左右[6],因此NSE是肺癌的重要標(biāo)志物。有研究顯示,NSE敏感性為55.0%~57.7%,被確認(rèn)為是SCLC的首選標(biāo)記物[7]。本研究也顯示NSE在肺癌中有較高的表達(dá),肺癌組在3個(gè)百分位數(shù)的值均明顯高于對(duì)照組,且越是晚期其含量越高,有些患者竟高于370 ng/ml以上,且比較有顯著性差異。NSE在肺癌中的陽(yáng)性率為41.8%,其中在SCLC中的陽(yáng)性率為56.6%,明顯高于鱗癌組(43.8%)與腺癌組(27.0%),故認(rèn)為 NSE 具有較明顯的病理傾向性,因此,有效地檢測(cè)NSE在肺癌患者血清中的表達(dá)有助于對(duì)SCLC的診斷及其與NSCLC的鑒別,并且對(duì)SCLC有較大的診斷價(jià)值。

    ROC曲線是一種全面、準(zhǔn)確評(píng)價(jià)診斷試劑的非常有效的方法[2]。通過(guò)計(jì)算ROC曲線下面積,可判斷腫瘤標(biāo)志物的診斷效率。本研究中 NSE 的 ROC 曲線下面積為 0.810,P<0.001,95%可信區(qū)間為0.745~0.874。說(shuō)明NSE對(duì)肺癌的診斷效能較好,完全可以作為肺癌,尤其是小細(xì)胞肺癌的腫瘤標(biāo)志物來(lái)運(yùn)用于臨床。

    通過(guò)進(jìn)一步引入不同變量做多元線性逐步回歸分析,證實(shí)NSE的表達(dá)與肺癌病理類型中小細(xì)胞肺癌有較好的直線相關(guān)關(guān)系,說(shuō)明患者血清中NSE表達(dá)越高,患小細(xì)胞肺癌的可能性越大,是診斷小細(xì)胞肺癌的重要標(biāo)志物。NSE在血清中的高表達(dá),有助于對(duì)小細(xì)胞肺癌的確診,且對(duì)不明病理類型肺癌的病理分型估計(jì)及治療方案的制訂也都具有重要的意義。而其他一些因素如肺轉(zhuǎn)移、骨轉(zhuǎn)移、肝轉(zhuǎn)移、腦轉(zhuǎn)移等按納入標(biāo)準(zhǔn)均未能進(jìn)入變量方程,也可能與這些病例較少有一定的關(guān)系,今后需更進(jìn)一步積累病例,做更深入的研究。

    [1]鄒小農(nóng).中國(guó)肺癌流行病學(xué)[J].中華腫瘤防治雜志,2007,14(12):881~883.

    [2]李春海.加強(qiáng)腫瘤生物學(xué)標(biāo)志的研究和評(píng)價(jià)[J].中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2000,23:6~8.

    [3]Ando S,Kimura H,Lwai N,et al.The significance of tumour markers as indieation for mediastinoscopy in non-small cell lung cancer[J].Respirolo-gy,2003,8:163~167.

    [4]萬(wàn)文徽.腫瘤標(biāo)志的研究進(jìn)展及臨床應(yīng)用[M].全國(guó)腫瘤標(biāo)志研究進(jìn)展及臨床應(yīng)用研討班教材,2002.

    [5]王國(guó)洪,萬(wàn)文徽,劉波,等.四種腫瘤標(biāo)志檢測(cè)非小細(xì)胞肺癌的臨床應(yīng)用研究[J].中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2003,26(8):491~494.

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    [7]陳飛鵬,鄔勇堅(jiān).34例肺癌患者胸腔積液神經(jīng)元特異性烯醇化酶測(cè)定[J].新醫(yī)學(xué),2001,32(6):3452~3461.

    R195

    B

    1671-1246(2010)04-0122-03肺癌是當(dāng)今世界各國(guó)常見(jiàn)的惡性腫瘤之一,并已成為絕大多數(shù)國(guó)家因癌癥死亡的主要類型,被認(rèn)為是目前對(duì)人類健康和生命威脅最大的惡性腫瘤之一[1]。在對(duì)腫瘤的研究和臨床實(shí)踐中,腫瘤標(biāo)記物在肺癌診斷及治療過(guò)程中的價(jià)值正日益受到關(guān)注,且已成為腫瘤患者的重要檢查指標(biāo)[2]。本文就神經(jīng)元特異性烯醇化酶(NSE)在肺癌患者血清中的表達(dá)及其臨床應(yīng)用價(jià)值進(jìn)行探討。

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