氣相色譜儀在蔬菜有機(jī)磷農(nóng)藥殘留檢測中的應(yīng)用

康文靖

（婁底市農(nóng)業(yè)局，湖南 婁底 417000）

農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全監(jiān)管是當(dāng)前各級農(nóng)業(yè)行政主管部門的一項重要工作職責(zé)，蔬菜有機(jī)磷農(nóng)藥殘留監(jiān)測又是農(nóng)產(chǎn)品監(jiān)測中的重點。有機(jī)磷農(nóng)藥殘留檢測技術(shù)的研究主要采用進(jìn)口氣相色譜[1-9]，使用國產(chǎn)儀器的報道很少。筆者在使用國產(chǎn)氣相色譜開展蔬菜農(nóng)藥殘留檢測取得良好效果的基礎(chǔ)上，針對基層農(nóng)技部門經(jīng)費緊張，購買進(jìn)口氣相色譜難度大的實際情況，進(jìn)行了蔬菜農(nóng)藥殘留試驗樣品的儀器比對檢測和檢測方法試驗研究，為基層農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全監(jiān)測提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 試驗時間與地點 田間試驗于2009年7~8月在婁底市婁星區(qū)大科鄉(xiāng)大屋居委賀新輝菜地上進(jìn)行。室內(nèi)檢測試驗于2009年9月由婁底市農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全監(jiān)督檢驗檢測中心和湖南省農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢驗檢測中心進(jìn)行。

1.1.2 供試材料 商品農(nóng)藥購自婁底城區(qū)農(nóng)資門市部。毒死蜱，為上海悅聯(lián)化工有限公司生產(chǎn)，標(biāo)明含量為30%；乙酰甲胺磷，為廣東某農(nóng)藥有限公司生產(chǎn)，標(biāo)明含量為30%；三唑磷，為湖南南天實業(yè)股份有限公司生產(chǎn)，標(biāo)明含量為20%；丙溴磷與辛硫磷復(fù)配劑為江蘇通維生化有限公司生產(chǎn)，標(biāo)明含丙溴磷6%，含辛硫磷19%；丙溴磷單劑為山東青島東生藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，標(biāo)明含量為40%。農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)樣品由湖南省農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢驗檢測中心用農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品稀釋而成。

1.2 方法

1.2.1 試驗設(shè)計 田間試驗供試作物為蕹菜、豆角、辣椒，設(shè)噴施乙酰甲胺磷、毒死蜱、三唑磷和丙溴磷與辛硫磷的復(fù)配劑以及清水5個處理，小區(qū)面積4 m2，重復(fù)2次，按農(nóng)藥標(biāo)明用量稀釋后噴施，施藥后定期取樣。農(nóng)藥殘毒檢測由婁底市農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全監(jiān)督檢驗檢測中心按NY/T481-2002標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行檢測，農(nóng)藥殘留檢測由婁底市農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全監(jiān)督檢驗檢測中心按NY/T761-2008標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行前處理，由湖南省農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢驗檢測中心和婁底市農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全監(jiān)督檢驗檢測驗中心分別用進(jìn)口氣相色譜和國產(chǎn)氣相色譜進(jìn)行比對檢測。

室內(nèi)試驗共進(jìn)行了3組試驗。（1）農(nóng)藥成分檢測比對試驗：分別用萬分之一天平稱取少量毒死蜱、乙酰甲胺磷、三唑磷、丙溴磷復(fù)配劑，用乙酸乙酯稀釋成一定濃度后，分別進(jìn)行儀器比對檢測；（2）重現(xiàn)性比對試驗：進(jìn)口氣相色譜使用0.1 mg/L混標(biāo)，每檢10個樣品進(jìn)一針混標(biāo)，國產(chǎn)儀品使用0.5 mg/L混標(biāo)，在每天檢測前進(jìn)一針混標(biāo)，中途不定期進(jìn)0~2次混標(biāo)；（3）線性試驗：設(shè)5個處理，處理1至處理5設(shè)進(jìn)樣量分別為1.0、2.5、5.0 μL 1.0 mg/L混標(biāo)3個處理和進(jìn)樣量為5.0 μL 0.1、10.0 mg/L混標(biāo)2個處理，每個處理重復(fù)檢測3次。

1.2.2 儀器條件 國產(chǎn)氣相色譜：所用儀器為北京東西電子生產(chǎn)的GC4024A（帶FPD檢測器），色譜柱為DB 1701，柱箱溫度：150℃保持2 min，再以8℃/min升至250℃，保持5 min。柱前壓為0.28 MPa，空氣壓力為0.2 MPa，氫氣壓為 0.125 MPa，汽化室溫度為220℃，檢測器溫度為250℃，不分流進(jìn)樣。進(jìn)口氣相色譜儀：所用儀器為美國Varian CP-3800氣相色譜儀（帶PFPD檢測器）。色譜柱：DB 1701P（∮0.32 mm×30 m×0.25μm）。柱溫：柱初溫70℃保持1 min以20℃/min升至190℃，再以 10℃/min升至 230℃，再以 20℃/min升至260℃，保持 7.5 min。載氣（N2）：2.0 mL/min，氫氣：14.0 mL/min，空氣：17.0 mL/min，8.0 mL/min。進(jìn)樣量：1μL，不分流進(jìn)樣。

2 結(jié)果與分析

2.1 農(nóng)殘試驗樣品氣相色譜比對檢驗

參加比對試驗檢測樣品共有110個，將湖南省農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢驗檢測中心使用進(jìn)口氣相色譜的檢測結(jié)果簡寫為省檢，將婁底市農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全監(jiān)督檢驗檢測中心使用國產(chǎn)氣相色譜的檢驗結(jié)果簡寫為市檢。省檢結(jié)果分為5個濃度組，分別為≤0.1、0.11~0.50、0.51~2.50、2.51~12.50、12.51~62.5 mg/kg ，組內(nèi)樣品檢測結(jié)果的平均值見表1。從平均檢測結(jié)果中可以看出，不同農(nóng)藥的比對檢測結(jié)果有差別，毒死蜱、三唑磷、丙溴磷等出峰時間較長的農(nóng)藥差別要小，乙酰甲胺磷和甲胺磷等出峰時間早的檢測結(jié)果相差較大。從不同濃度來看，以0.1~2.5 mg/kg濃度范圍內(nèi)差別較小，檢測結(jié)果大于2.5 mg/kg的相差較大。

表1 農(nóng)殘試驗樣品有機(jī)磷比對檢測結(jié)果平均值（mg/kg）

2.2 商品農(nóng)藥比對檢測

將商品農(nóng)藥用萬分之一天平稱取一定藥液，用乙酸乙酯稀釋，根據(jù)農(nóng)藥標(biāo)明量計算所得的濃度簡寫為計算結(jié)果。檢測結(jié)果見表2，省檢結(jié)果與計算結(jié)果比較，丙溴磷復(fù)配劑、三唑磷基本一致，但毒死蜱、丙溴磷單劑的檢測結(jié)果明顯高于計算結(jié)果，與計算結(jié)果的相對相差分別為89.3%和32.7%，主要是因為標(biāo)樣濃度只有0.1 mg/L，一點法計算造成的誤差。市檢結(jié)果和計算結(jié)果比較，毒死蜱、三唑磷，丙溴磷復(fù)配劑、丙溴磷單劑的相對相差為1.6%~20.6%，具有較好的符合性。

表2 供試農(nóng)藥氣相色譜檢測結(jié)果 （mg/L）

2.3 不同儀器檢測結(jié)果的變異系數(shù)與靈敏度比較

進(jìn)口氣相色譜是全自動進(jìn)樣不間斷檢測，混標(biāo)濃度為0.1 mg/L，每針樣品量為1 μL，進(jìn)樣前后各進(jìn)一針混標(biāo)，中途每檢10個樣品進(jìn)一針混標(biāo)，共進(jìn)混標(biāo)13針。國產(chǎn)氣相色譜是手工進(jìn)樣，混標(biāo)濃度為0.5 mg/L，每針樣品量為5μL，每天檢樣前進(jìn)一針混標(biāo)，中途不定時進(jìn)混標(biāo)檢查，共進(jìn)7針，統(tǒng)計結(jié)果見表3。進(jìn)口氣相色譜的組份峰面積變異系數(shù)較大，為0.14~0.50；國產(chǎn)儀器變異系數(shù)為0.04~0.27，復(fù)現(xiàn)性較好。從峰面積來看，進(jìn)口儀器的峰面積顯著大于國產(chǎn)儀器，進(jìn)口儀器所用標(biāo)樣濃度和進(jìn)樣量都只有國產(chǎn)儀器的1/5，峰面積為國產(chǎn)儀器的116%~230%，平均為188%，相當(dāng)于靈敏度高29~58倍，平均為47倍。

表3 標(biāo)樣峰面積統(tǒng)計結(jié)果

2.4 國產(chǎn)儀器線性關(guān)系試驗

一點法計算結(jié)果要求有很好的線性關(guān)系，采用不同進(jìn)樣量和不同濃度進(jìn)行線性關(guān)系試驗。檢測前以進(jìn)樣5 μL1.0 mg/L混標(biāo)建立組分表，即進(jìn)5 μL出峰面積的對應(yīng)濃度為1 mg/L。每處理連續(xù)重復(fù)進(jìn)3針，結(jié)果見表4。不同農(nóng)藥的線性關(guān)系差別較大，毒死蜱、丙溴磷在進(jìn)樣5 μL濃度0.1~10.0 mg/L時，表現(xiàn)較好的線性關(guān)系；乙酰甲胺磷在1~10 mg/L時，線性關(guān)系較好；甲胺磷線性關(guān)系不太好，在較高濃度時，檢測結(jié)果偏高；三唑磷在進(jìn)樣5 μL時，低濃度時檢測結(jié)果偏高，高濃度時檢測結(jié)果偏低，進(jìn)樣量小時又基本吻合；甲胺磷、乙酰甲胺磷在小于0.2 mg/L時,較難檢出。

表4 不同進(jìn)樣量和不同標(biāo)樣濃度檢測結(jié)果 （mg/L）

2.5 農(nóng)殘速測與氣相色譜檢測結(jié)果比對

2009年進(jìn)行了110個試驗樣品的農(nóng)殘速測，進(jìn)口儀器、國產(chǎn)儀器的檢測比對。為便于比較，只列出3種代表性農(nóng)藥連續(xù)2次取樣的檢測結(jié)果（見表5）。從表5中看出，農(nóng)藥殘毒檢測結(jié)果因農(nóng)藥和蔬菜種類的不同相差很大，農(nóng)藥對丁酰膽堿酯酶的抑制敏感性是丙溴磷＞三唑磷＞毒死蜱，其中丙溴磷特別敏感，蕹菜丙溴磷含量達(dá)0.02 mg/kg時，農(nóng)殘抑制率大于70%，即農(nóng)藥殘毒檢測結(jié)果為陽性。在相同農(nóng)藥殘留情況下，農(nóng)殘抑制率是蕹菜＞豆角＞辣椒。農(nóng)殘抑制率大于70%的樣品，GC4024A氣相色譜具有良好的檢出效果。三唑磷、丙溴磷檢出限可達(dá)0.05 mg/kg以下。

表5 農(nóng)殘速測與氣相色譜檢測結(jié)果比對

3 小結(jié)

由試驗可知，GC4024氣相色譜蔬菜農(nóng)藥殘留檢測結(jié)果和進(jìn)口氣相色譜檢測結(jié)果的符合性因不同農(nóng)藥和不同濃度而有較大差別，其中毒死蜱、丙溴磷、三唑磷等出峰時間較遲的組份差別較小；甲胺磷、乙酰甲胺磷等出峰較早的相差較大。殘留濃度大于2.5 mg/kg時差別較大，殘留濃度為0.1~2.5 mg/kg時差別較小。GC4024氣相色譜與農(nóng)藥殘毒檢測符合性較好，速測不合格樣品，GC4024氣相色譜一般能檢出有機(jī)磷的種類和含量。GC4024氣相色譜噪聲較大，峰面積小，靈敏度較低，穩(wěn)定性好，進(jìn)樣量增加至5 uL，可以提高檢出效果；農(nóng)藥峰面積線性關(guān)系因農(nóng)藥和濃度而發(fā)生差異，檢測高濃度樣品時，需要有相應(yīng)高濃度標(biāo)樣進(jìn)行較對。

國產(chǎn)氣相色譜儀由于噪聲大，靈敏度受到較大影響，因而在農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥殘留檢測方面應(yīng)用較少。但對農(nóng)藥殘留量較高的蔬菜來說，國產(chǎn)氣相色譜也有其優(yōu)勢，主要表現(xiàn)在價格便宜，操作簡便，維護(hù)費用少。并且經(jīng)過近幾年的發(fā)展，氣相色譜廠家對產(chǎn)品進(jìn)行了改進(jìn)，提高了檢測性能，具有一定的推廣應(yīng)用價值，可以在基層農(nóng)產(chǎn)品檢測機(jī)構(gòu)推廣使用。

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