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    清瘟敗毒飲對(duì)溫病暑熱證大鼠基本生命體征的影響*

    2010-10-02 13:07:20于征淼許慶文龐增園周信杰黎興鍵
    中國(guó)中醫(yī)急癥 2010年4期
    關(guān)鍵詞:生石膏脈壓小劑量

    于征淼 許慶文 龐增園 周信杰 黎興鍵

    靜脈注射脂多糖是一種常用的炎癥動(dòng)物模型制作方法,常用于制作全身炎癥反應(yīng)綜合征、內(nèi)毒素休克等重癥模型[1,2]。本研究采用高溫環(huán)境、醋酸鉛致敏和靜脈注射脂多糖制作大鼠溫病暑熱證模型。清瘟敗毒飲由清代溫疫學(xué)家余霖創(chuàng)立,具有清氣瀉火、泄熱保陰、涼血解毒之功,方中石膏用量極大。本研究觀察含有不同劑量生石膏的清瘟敗毒飲對(duì)暑熱證大鼠生命體征的影響?,F(xiàn)報(bào)告如下。

    1 材料與方法

    1.1 材料 (1)試驗(yàn)藥物:清瘟敗毒飲,組方為生石膏小劑量15g、大劑量 100g,生地黃 7.5g,水牛角 15g,黃連 2.5g,梔子 5g,桔梗 5g,黃芩 5g,知母 5g,赤芍 5g,玄參 5g,連翹 5g,甘草 5g,丹皮5g,竹葉5g。藥材均購(gòu)自廣州中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院藥房。生石膏、水牛角加入300mL水中,同時(shí)以250mL水浸泡余藥,先煎生石膏、水牛角,以武火將藥煮沸后再以文火煎40min,然后加入余藥及浸泡水,再次先武后文煎40min,約得75mL藥液(小劑量清瘟敗毒飲含生藥1.20g/mL,其中含生石膏0.20g/mL;大劑量清蘊(yùn)敗毒飲含生藥2.33g/mL,其中含生石膏1.33g/mL),置入4℃冰箱保存(≤3d),實(shí)驗(yàn)前加熱至40℃。(2)動(dòng)物:雄性SD大鼠86只(合格證號(hào):SCXK粵2008-0020,粵監(jiān)證字:2008A002),SPF級(jí),購(gòu)自廣州中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心,飼養(yǎng)于廣州中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院SPF動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室內(nèi),恒溫(26±2)℃。實(shí)驗(yàn)前2d,每日將動(dòng)物置于人工氣候箱內(nèi)6h,設(shè)定溫度(32±0.5)℃,濕度(80±5)%,每日其余18h置于室溫(30±2)℃,濕度(70±15)%的實(shí)驗(yàn)室中飼養(yǎng),實(shí)驗(yàn)前8h禁止動(dòng)物進(jìn)食,實(shí)驗(yàn)前動(dòng)物體質(zhì)量(325±31)g。(3)試劑:脂多糖O55:B5(Sigma公司),使用生理鹽水配置成 10mg/mL。(4)儀器:LRH-550-GSI智能型人工氣候箱(韶關(guān)市泰宏醫(yī)療器械公司),RM-6000型生理多導(dǎo)儀(日本光電公司)。

    1.2 方法 將86只大鼠隨機(jī)分為空白對(duì)照組、休克對(duì)照組、小劑量清瘟敗毒飲組各21只,大劑量清瘟敗毒飲組23只??瞻讓?duì)照組、休克對(duì)照組予以生理鹽水灌胃(13mL/kg),小劑量組、大劑量組分別予含有小、大劑量生石膏的清瘟敗毒飲灌胃(13mL/kg)。灌胃后15min腹腔注射10%水合氯醛(3.5mL/kg)麻醉,2h后追加1/3劑量以延長(zhǎng)麻醉效果。頸部正中切口,逐層分離暴露左側(cè)頸總動(dòng)脈,剝離迷走神經(jīng),左頸總動(dòng)脈插動(dòng)脈導(dǎo)管,接肝素帽,肝素鹽水(125U/mL)抗凝,連接壓力換能器與生理多導(dǎo)儀,監(jiān)測(cè)血壓、脈搏。動(dòng)物麻醉和插管操作完畢后,尾靜脈注射25mg/mL醋酸鉛1mL/kg(空白對(duì)照組為等量生理鹽水),靜置穩(wěn)定30min后,再由尾靜脈注射10mg/mL脂多糖15mg/kg(空白對(duì)照組為等量生理鹽水)。

    1.3 檢測(cè)指標(biāo) 注射脂多糖前35、5min和注射脂多糖后30min、1h分別測(cè)量大鼠的肛溫、脈搏、呼吸、收縮壓、舒張壓和脈壓差;注射脂多糖后5、10、20min分別測(cè)量大鼠的脈搏、收縮壓、舒張壓和脈壓差。實(shí)驗(yàn)完畢后處死動(dòng)物,取肺臟和肝臟標(biāo)本進(jìn)行病理檢查。

    1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件。計(jì)量資料以(±s)表示,采用方差分析。

    2 結(jié)果

    2.1 各組生命體征比較 見表1~表6。結(jié)果示不同組別之間肛溫差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),不同時(shí)點(diǎn)肛溫差別明顯(P<0.01)。不同組別之間脈搏相近(P>0.05),不同時(shí)點(diǎn)脈搏的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。不同組別之間呼吸頻率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),其中大劑量清瘟敗毒飲組與其余3組在不同時(shí)點(diǎn)間呼吸頻率差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,且以與休克對(duì)照組之間為著(P<0.05)。不同組別之間收縮壓、舒張壓相近(P>0.05),不同時(shí)點(diǎn)間收縮壓、舒張壓的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。不同組別之間脈壓差相近(P>0.05);不同時(shí)點(diǎn)間脈壓差的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。

    表1 各組肛溫比較(℃± s)

    表1 各組肛溫比較(℃± s)

    與注射脂多糖前35min相比,*P<0.01;與注射脂多糖前5min相比,△P<0.01;與注射脂多糖后30min相比,▲P<0.01。下同

    組 別空白對(duì)照組休克對(duì)照組小劑量清瘟敗毒飲組大劑量清瘟敗毒飲組n 21 21 21 23-35min 36.6±0.5 36.7±0.6 36.6±0.6 37.1±0.7-5min 35.7±0.6*35.9±0.6*35.8±0.7*36.3±0.9*▲30min 35.3±0.7*35.5±1.1*35.1±0.8*△35.7±0.9*1h 35.1±0.7*△35.2±0.8*△35.1±0.8*△35.6±1.0*△▲

    2.2 各組病理檢查結(jié)果比較 休克對(duì)照組動(dòng)物可見肺急性炎癥反應(yīng),肺泡間隔增厚,血管充血,炎細(xì)胞及紅細(xì)胞滲出,部分肺泡擴(kuò)張,肝細(xì)胞輕度水腫,見較多脂肪空泡,肝竇及肝索結(jié)構(gòu)基本清晰;小劑量清瘟敗毒飲組可見肺泡間隔增厚,血管充血,見炎細(xì)胞及紅細(xì)胞滲出,肝組織結(jié)構(gòu)基本正常,肝竇及肝索結(jié)構(gòu)清晰,未見細(xì)胞水腫、脂肪變及壞死;大劑量清瘟敗毒飲組的肺泡大小一致,間隔均勻,肺組織結(jié)構(gòu)基本正常,肝竇及肝索結(jié)構(gòu)清晰,未見細(xì)胞水腫、脂肪變及壞死。

    表2 各組脈搏比較(次/min,±s)

    表2 各組脈搏比較(次/min,±s)

    與注射脂多糖后5min相比,○P<0.01;與注射脂多糖后10min相比,●P<0.01;與注射脂多糖后20min相比,□P <0.01。下同

    組 別空白對(duì)照組休克對(duì)照組小劑量清瘟敗毒飲組大劑量清瘟敗毒飲組n 21 21 21 23-35min 421±50 418±47 425±74 433±54-5min 411±49*421±40*420±56*435±45 5min 430±50*△432±29*△413±34*△439±35*△10min 420±39△○426±23*△○413±35*△439±36*△20min 417±43*△○●424±24*△○●415±37*△○●435±35*○●30min 420±38△○●425±30*△○415±39*△○●440±38*△□1h 424±40*△○●□▲455±19*△○●□▲433±30*△○●□▲456±32*△○●□▲

    3 討論

    清瘟敗毒飲是氣血兩清法的代表方劑。余霖用其治療瘟疫,“每每投之,百發(fā)百中”。該方在歷史上為王孟英、張錫純等多位醫(yī)家所推崇。近年臨床研究證明該方治療流行性出血熱、流行性腦脊髓膜炎、重癥流感及傳染性非典型肺炎等疾病效果良好[3~6]。清瘟敗毒飲可以通過(guò)拮抗血小板降低及高黏綜合征,調(diào)整cAMP、cGMP的比值,減輕臟器組織病理?yè)p害等途徑治療內(nèi)毒素所誘發(fā)的家兔氣血兩燔證[7]。

    為了探明清瘟敗毒飲的作用機(jī)制,本研究對(duì)動(dòng)物模型進(jìn)行改良,通過(guò)高溫環(huán)境、醋酸鉛致敏和靜脈注射脂多糖的綜合方法制作了溫病暑熱證模型,通過(guò)頸總動(dòng)脈置入導(dǎo)管,全面系統(tǒng)地觀察了清瘟敗毒飲對(duì)模型大鼠基本生命體征的動(dòng)態(tài)影響。結(jié)果表明,大劑量清瘟敗毒飲能夠增快溫病暑熱證大鼠模型的呼吸頻率,但對(duì)肛溫、脈搏、收縮壓、舒張壓和脈壓差影響不大。各組模型大鼠不同時(shí)點(diǎn)生命體征之間差異顯著,隨著時(shí)間的推移,肛溫逐漸下降,注射脂多糖1h時(shí)脈搏較初始值增快,空白對(duì)照組的呼吸逐漸減慢,其他3組的呼吸則趨于增快,收縮壓、舒張壓和脈壓差在注射醋酸鉛(空白對(duì)照組為等量生理鹽水)后多呈增高趨勢(shì),而在注射脂多糖(空白對(duì)照組為等量生理鹽水)后多進(jìn)一步增高。對(duì)于所有的生命體征來(lái)說(shuō),組別與時(shí)間之間均無(wú)交互效應(yīng)。

    表6 各組脈壓差比較(mmHg,± s)

    表6 各組脈壓差比較(mmHg,± s)

    組 別空白對(duì)照組休克對(duì)照組小劑量清瘟敗毒飲組大劑量清瘟敗毒飲組n 21 21 21 23 35min 20±7 22±7 24±11 21±7-5min 22±7*25±10*27±13*23±7*5min 23±7*24±8*27±15*21±7△10min 22±6*25±10*27±14*22±7 20min 24±6*△●25±10*26±12*24±8*○●30min 24±6*△●24±6*28±11*□25±8*△○●1h 26±6*△○●□▲27±8*△○●□▲28±10*□28±8*△○●□▲

    表5 各組舒張壓的動(dòng)態(tài)影響(mmHg,±s)

    表5 各組舒張壓的動(dòng)態(tài)影響(mmHg,±s)

    組 別空白對(duì)照組休克對(duì)照組小劑量清瘟敗毒飲組大劑量清瘟敗毒飲組n 21 21 21 23-35min 76±19 73±14 70±12 76±15-5min 74±15*75±16*71±15 77±15 5min 77±16△78±17*△69±16△78±16*10min 78±16*△80±13*△○71±14○79±17*△20min 75±15○●77±15*△●70±12 75±17△○●30min 74±14*○●74±14○●□68±13*△●□75±16△○●1h 76±13△●▲79±15*△□▲72±14*○□▲75±15△○●

    表4 各組收縮壓的動(dòng)態(tài)影響(mmHg,± s)

    表4 各組收縮壓的動(dòng)態(tài)影響(mmHg,± s)

    組 別空白對(duì)照組休克對(duì)照組小劑量清瘟敗毒飲組大劑量清瘟敗毒飲組n 21 21 21 23-35min 96±17 95±14 94±12 97±15-5min 96±14 101±15*98±13*100±16*5min 100±15*△102±16*96±18*△○100±15*10min 101±17*△105±15*△○99±14*100±17*20min 99±16*△○102±17*●95±12△○●99±17*30min 98±14*△○●□98±15*△○●□96±10*△○●100±16*1h 102±14*△○□▲105±20*△○□▲100±15*△○□▲103±15*△○●□▲

    表3 各組呼吸頻率比較(次/min,±s)

    表3 各組呼吸頻率比較(次/min,±s)

    與大劑量清瘟敗毒飲組相比,◇P<0.05,◆P<0.01

    組別空白對(duì)照組休克對(duì)照組小劑量清瘟敗毒飲組大劑量清瘟敗毒飲組n 21 21 21 23-35min 77±10◇71±10◆73±11◇79±12-5min 76±8◇72±11◆78±15*◇85±15*30min 74±7*△◇70±9△◆76±14*△◇80±11△1h 74±9*△◆74±9*△▲◆77±13*◇85±15*▲

    [1]楊光田,王進(jìn).醒腦靜對(duì)內(nèi)毒素致大鼠全身炎癥反應(yīng)綜合征的影響[J]. 中國(guó)藥學(xué)雜志,2006,41(15):1142 ~1144.

    [2]馬宏博,姜良鐸,朱陵群.扶正排毒液治療內(nèi)毒素休克實(shí)驗(yàn)研究[J]. 中國(guó)中醫(yī)急癥,2006,15(3):283 ~ 284.

    [3]郝向春,馬素娟.清瘟敗毒飲治療流行性出血熱120例臨床觀察[J]. 中國(guó)中西醫(yī)急救雜志,2003,8(1):45 ~46.

    [4]覃小蘭,韓凡,龐嶷.中西醫(yī)結(jié)合治療流腦5例總結(jié)[J].四川中醫(yī),2006,24(2):51 ~ 52.

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    [7]謝恬,凌一揆.清瘟敗毒飲對(duì)內(nèi)毒素誘發(fā)家兔氣血兩燔證的療效和機(jī)理[J]. 中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合雜志,1993,13(2):94 ~97.

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