胡蘿卜籽粗提物抗氧化性及穩(wěn)定性研究

李鋒，王偉

（1.新疆農(nóng)業(yè)大學化學工程學院，新疆烏魯木齊830052；2.新疆農(nóng)業(yè)大學食品科學學院，新疆烏魯木齊830052)

胡蘿卜籽粗提物抗氧化性及穩(wěn)定性研究

李鋒1，王偉2

（1.新疆農(nóng)業(yè)大學化學工程學院，新疆烏魯木齊830052；2.新疆農(nóng)業(yè)大學食品科學學院，新疆烏魯木齊830052)

用分光光度法對胡蘿卜籽粗提物的抗氧化性進行初步研究。考察胡蘿卜籽粗提物的總還原能力，對羥自由基（·OH）和過氧化氫（H2O2）的清除能力，以及在不同條件下胡蘿卜籽粗提物的穩(wěn)定性。結果表明：胡蘿卜籽粗提物有較強的還原能力，對·OH和H2O2均具有較好的清除作用。該粗提物的光穩(wěn)定性不好，在酸性溶液中能穩(wěn)定存在，在50℃以下有較好的熱穩(wěn)定性。

胡蘿卜籽；提取方法；抗氧化性；穩(wěn)定性

Abstract:The antioxidant activity of extracts from carrot seeds were studied with photometric method.The scavenging quality of hydroxyl free radical（·OH）and Hydrogen Peroxide（H2O2），the total reducing power and its stability in different conditions were studied.The results showed：the crude extract of carrot seeds have good reducing power and have good scavenging effect on·OH，H2O2.It can be stabled in aicd solution and under 50℃.The effect of light on stability is not very well.

Key words：carrot seeds;extract methods;antioxidant activity;stability

關于胡蘿卜籽的記載始于明代《本草綱目》，胡蘿卜籽為傘型科植物胡蘿卜的果實，含有黃酮類，脂肪油（11%～13%)，脂肪油中有油酸，亞油酸系的甘油酯，胡蘿卜甾醇等。胡蘿卜籽中的總黃酮具有解痙作用，擴張冠狀血管，對動脈粥樣硬化，心絞痛之冠狀動脈機能不足的患者有很好療效[1]。本文用分光光度法對胡蘿卜籽粗提物的抗氧化性及穩(wěn)定性進行了研究，以期為胡蘿卜籽的進一步開發(fā)利用提供試驗參考。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

胡蘿卜籽：購于新疆維吾爾醫(yī)醫(yī)院；95%乙醇、水楊酸、硫酸亞鐵、30%過氧化氫、鐵氰化鉀[K3Fe（CN）6]、三氯乙酸（TCA)、三氯化鐵（FeCl3)、抗壞血酸（VC)、磷酸鹽緩沖溶液（PBS）等均為分析純試劑。

TU-1810紫外可見分光光度計：北京普析通用儀器有限責任公司；PHS—25C數(shù)顯型酸度計：上海宇隆儀器有限公司。

1.2 方法

1.2.1 粗提物的提取[2]

稱取干燥粉碎的胡蘿卜籽粉末10 g，樣品用濾紙包好，裝入索氏提取器內(nèi)，加入95%乙醇100 mL，在90℃下回流提取24 h，然后將液體冷卻至室溫，過濾，棄去濾渣，濾液減壓濃縮，得粗提物。

1.2.2 胡蘿卜籽粗提物抗氧化活性的測定

1.2.2.1 還原能力的測定[3]

用95%乙醇配制1.0 g/L的胡蘿卜籽提取物溶液，向10 mL具塞試管中分別加入不同體積的胡蘿卜籽提取物溶液，然后每管加2.5 mL磷酸鹽緩沖溶液（0.2 mol/L，pH=6.6)和 2.5 mL 1%（質(zhì)量分數(shù)）的 K3Fe（CN）6混勻，50℃水浴加熱20 min。然后加入1 mL質(zhì)量分數(shù)為10%的三氯乙酸，2.5 mL蒸餾水，0.1%FeCl3溶液0.5 mL，充分混勻后，以試劑空白作參比溶液，于700 nm處測定溶液吸光度值。以不同濃度的VC溶液替代胡蘿卜籽提取物溶液，其它過程同上，測定溶液的吸光度。

1.2.2.2 清除H2O2能力的測定[4]

在10 mL具塞試管中，加入由50 mmol/L磷酸鹽緩沖溶液（pH=7.4)配制的0.5 mmol/L H2O2溶液2.8 mL后，再加入0.4 mL不同濃度的胡蘿卜籽提取物溶液，反應10 min后，于230 nm處測定吸光度值，以同濃度的胡蘿卜籽提取物溶液為對照，并計算清除率：

式中：A0為不含樣品吸光度值；Ai為含樣品的吸光度值。

1.2.2.3 清除羥自由基（·OH）能力的測定[5]

在10mL具塞試管中，加入2mLFeSO4（7.5mmol/L）溶液、2 mL水楊酸（6 mmol/L)，0.4 mL不同濃度的胡蘿卜籽提取物溶液。隨后加入2 mL H2O2（6 mmol/L）啟動反應，于37℃恒溫水浴中放置1 h，測定溶液在510 nm處的吸光度值，以同濃度的胡蘿卜籽提取物溶液為對照，并計算清除率：

式中：A0為不含樣品，但含有H2O2的吸光度值；Ax為含有樣品也含有H2O2的吸光度值。

1.2.3 粗提物的穩(wěn)定性試驗[6]

配制1.0 g/L的胡蘿卜籽提取物溶液，在不同波長下測定吸光度，確定最大吸收波長，測定該溶液在不同時間間隔內(nèi)、不同溫度（20、50、70、90 ℃)、不同 pH下在最大吸收波長處的吸光度。

2 結果與分析

2.1 粗提物抗氧化性的測定

2.1.1 還原能力的測定

測定不同濃度胡蘿卜籽提取物溶液與VC溶液在700 nm處的吸光度，所得結果如圖1。

由圖1可知，隨著胡蘿卜籽提取液和VC溶液濃度的增大，吸光度值逐漸升高，表明還原能力隨濃度的增大而增強，且通過和同濃度的VC作對比，胡蘿卜籽提取液的還原能力與VC相當。

2.1.2 清除H2O2能力的測定

根據(jù)1.2.2.2方法，試驗測定了不同濃度的胡蘿卜籽提取液對H2O2的清除能力，清除率與提取液濃度的關系如圖2所示。

從圖2可以看出，在試驗濃度范圍內(nèi)，隨著提取液濃度的增大，其對H2O2的清除率也增大，表明胡蘿卜籽提取液對H2O2的清除能力與其濃度呈明顯的正量效關系。

2.1.3 清除羥自由基（·OH）能力的測定

根據(jù)1.2.2.3的試驗方法，將不同濃度胡蘿卜籽提物液對羥自由基清除能力的結果繪制如圖3。

從圖3可看出，在試驗濃度范圍內(nèi)，隨著提取液濃度的增大，對羥自由基清除率也逐漸增大，當濃度達到0.07 g/L時，清除率為48.2%，再增大提取液濃度，清除率增長緩慢，說明用量接近飽和。

2.2 粗提物的穩(wěn)定性研究

2.2.1 最大吸收波長的測定

配制濃度為0.01 g/L的胡蘿卜籽提取液，用分光光度法測定其在不同波長下的吸光度，結果見圖4。

顯然，波長為240 nm時，吸光度最大。

2.2.2 粗提物的光穩(wěn)定性

配制濃度為0.01 g/L的胡蘿卜籽提取液，置于自然光下，定期測其吸光度，結果見圖5。

由圖5可知，粗提物的光穩(wěn)定性較差，在18 d內(nèi)吸光度由0.626減小到0.555，變化了11.3%。

2.2.3 粗提物的熱穩(wěn)定性

配制濃度為0.01 g/L的胡蘿卜籽提取液，分別在20、50、70、90℃ 加熱，每隔 30 min取樣測吸光度，結果見圖6。

由圖6可以看出，當在20、50℃加熱180 min，吸光度分別變化了2.1%和7.7%，變化較小，70℃時變化了17.3%，90℃時變化了74.9%。說明在50℃以下有較好的熱穩(wěn)定性，在50℃以上時熱穩(wěn)定性下降，尤其在90℃加熱，30 min內(nèi)吸光度就發(fā)生很大改變，而后變化不大。

2.2.4 粗提物對酸堿度的穩(wěn)定性

向濃度為0.01 g/L的提取液中分別滴加0.2 mol/L HCl和NaOH溶液，使提取液的pH分別為1、2、3、4、

由圖7可以看出，當pH從1增大到6時，吸光度從0.499到0.520，變化了4.2%，當pH從6增加到7時，吸光度從0.520減小到0.438，變化了15.8%，胡蘿卜籽粗提液的穩(wěn)定性降低。

3 結論

胡蘿卜籽提取物對羥自由基、過氧化氫都有較好的清除作用，有較強的還原能力，其抗氧化能力及清除作用與提取物濃度成正量效關系。

胡蘿卜籽提取物對光穩(wěn)定性不好，當溫度超過50℃，熱穩(wěn)定性下降，而在酸性條件下有較好的穩(wěn)定性。因此，該提取物在低溫、避光條件下保存較好。

[1]江蘇新醫(yī)學院.中藥大辭典：下卷[M].上海：上海科學技術出版社，2004：1552

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Study on the Antioxidant Activity and Stabitity of Crude Extract from the Carrot Seeds

LI Feng1,WANG Wei2
（1.College of Chemical Engineering，Xin Jiang Agriculture University，Urumqi 830052，Xinjiang,China；2.College of Food Science，Xin Jiang Agriculture University，Urumqi 830052，Xinjiang,China）

2009-11-04

李鋒（1977—），女（漢），講師，碩士，研究方向：應用化學。