家兔膽囊炎模型腹部循膽經(jīng)高溫反應(yīng)與NE、5-HT、E含量變化的觀察＊

羅明富，郭 瑩，張 棟，馬惠敏，王淑友

（中國中醫(yī)科學(xué)院 針灸研究所，北京 100700）

研究證明，循經(jīng)高溫現(xiàn)象（紅外輻射軌跡）是經(jīng)絡(luò)生物物理特性的一個顯著特征，是反映經(jīng)穴生理或病理現(xiàn)象較客觀的指標(biāo)之一［1］。已有實驗證明，兔膽囊炎模型可在腹部沿膽經(jīng)出現(xiàn)高溫反應(yīng)現(xiàn)象。去甲腎上腺素（NE）、E（腎上腺素）和5-羥色胺（5-HT）對組織物質(zhì)能量代謝有調(diào)控作用。目前，對NE、5-HT、E在循膽經(jīng)高溫反應(yīng)組織內(nèi)的變化還缺乏了解。故本實驗以兔膽囊炎模型為基礎(chǔ)，觀察NE、E、5-HT與循膽經(jīng)高溫反應(yīng)的相關(guān)性。

1 材料與方法

1.1 動物與分組

清潔級日本大耳白家兔14只，體重1.5kg～2.5kg，雌雄各半，由中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院實驗動物中心提供。飼養(yǎng)1周后，隨機分為對照組6只，膽囊炎模型組（簡稱模型組）8只。

1.2 主要儀器與試劑

AGA-782型紅外熱像儀系統(tǒng)（AGA公司產(chǎn)），AH-2型高級顯微鏡（OLYMPUS），酶聯(lián)免疫試劑盒（北京華英生物技術(shù)研究所），STAT FAX 2100全自動酶標(biāo)儀。

1.3 模型制作

按照張棟等報道的膽囊炎模型制作方法造模［2］，術(shù)后家兔自由飲食。對照組除不做手術(shù)外，其他處理均與模型組相同。

1.4 紅外熱像觀測方法

造模后，飼養(yǎng)動物 11d，期間分 3d、7d、11d 3個時段沿膽經(jīng)腹段，采用紅外熱像儀系統(tǒng)做體表熱像圖觀察和記錄，并用標(biāo)記筆標(biāo)記出高溫線的具體位置。

1.5 檢測指標(biāo)

紅外熱像觀察結(jié)束后麻醉動物，在左右腹側(cè)沿膽經(jīng)的位置，迅速切取模型組的循經(jīng)高溫反應(yīng)部位和對照組相應(yīng)部位的皮下組織（0.5g/只）進行勻漿，12000 rpm離心5 min離心處理后取上清液，采用酶聯(lián)免疫技術(shù)對上清液內(nèi)的 NE、E、5-HT進行檢測。

1.6 統(tǒng)計學(xué)分析

用SPPS 11.5統(tǒng)計軟件分析，數(shù)據(jù)采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，組間采用單因素方差分析，以t檢驗對實驗數(shù)據(jù)進行顯著性分析。

2 結(jié)果

2.1 紅外熱像檢測

體表紅外熱像檢測結(jié)果顯示模型組在造模后的第3、7、11天，約70％的動物在左右腹側(cè)沿膽經(jīng)的位置出現(xiàn)長短不一的循經(jīng)溫度變化帶或區(qū)，與對照組或造模前比較循經(jīng)高溫反應(yīng)一般隨天數(shù)的增加而增加，特別在第7天和11天后，循經(jīng)高溫反應(yīng)則逐漸明顯。這些循經(jīng)高溫反應(yīng)的帶或區(qū)，其走行與膽經(jīng)相近，出現(xiàn)率右側(cè)腹部（患部）多于左腹部側(cè)（對側(cè)），而對照組相應(yīng)部位的溫度變化則不明顯（圖1A～D）。結(jié)果顯示模型組的循經(jīng)高溫反應(yīng)均比造模前或?qū)φ战M的循經(jīng)溫度升高約0.5℃ ～1.4℃。

2.2 膽囊炎模型兩側(cè)腹部循膽經(jīng)組織內(nèi)NE、E和5-HT的檢測

表1顯示，取膽囊炎模型兩側(cè)腹部循膽經(jīng)發(fā)生高溫反應(yīng)部位的組織和對照組相應(yīng)部位組織進行勻槳和離心等處理，采用酶免疫法對各樣品 NE、E和5-HT含量進行檢測和統(tǒng)計學(xué)處理。結(jié)果如下：與對照組比較，模型組兩側(cè)腹部循膽經(jīng)發(fā)生高溫反應(yīng)部位的組織內(nèi) NE、5-HT含量升高，差異有顯著性意義（P＜0.05）。同體的對側(cè)（左側(cè)）與患側(cè)（右側(cè)）比較，NE和5-HT含量變化均沒有顯著性差異性，2組E含量沒有顯著性差異（P＞0.05）。

表1 2組腹部循膽經(jīng)組織內(nèi)NE、5-HT、E含量的變化（ng/L）±s）

表1 2組腹部循膽經(jīng)組織內(nèi)NE、5-HT、E含量的變化（ng/L）±s）

注：與對照組比較：*P＜0.05；與對照組比較：#P＞0.05，E含量的變化（μg/L）

組 別 n NE 患側(cè)對側(cè)5-HT E NE 5-HT E對照組 6 26.61±1.5 37.98±2.09 2.01±0.19 27.19±1.3238.92± 2.12 1.95±0.14模型組 8 34.59±8.18* 47.26±7.39* 2.08±0.32# 32.51±5.72* 49.70±12.15* 2.03±0.48#

結(jié)果表明，NE和5-HT與膽囊炎引起的腹部循膽經(jīng)高溫反應(yīng)有一定相關(guān)性。

圖1 （A）造模前，左右腹側(cè)沿膽經(jīng)的熱像圖溫度約35.8℃；（B～D）分別為造模后第3、7、11天，循膽經(jīng)的熱像圖溫度依次為 35.3℃、36℃、37.2℃

3 討論

循經(jīng)感傳是經(jīng)絡(luò)的主要功能之一，也是臨床判斷針灸療效的重要標(biāo)準(zhǔn)?，F(xiàn)代紅外技術(shù)證明，臟腑發(fā)生病變可在體表出現(xiàn)循經(jīng)高溫反應(yīng)，為經(jīng)絡(luò)研究提供客觀指標(biāo)。本實驗觀察到，在模型組右側(cè)和左側(cè)腹部循膽經(jīng)高溫反應(yīng)組織內(nèi)NE含量明顯高于對照組，表明循經(jīng)高溫反應(yīng)組織內(nèi)NE釋放增多。NE可作用于脂肪細(xì)胞 β3受體，通過UCP使細(xì)胞產(chǎn)熱增加，進而使組織溫度增加影響局部組織的溫度變化或循經(jīng)感傳。5-HT又稱血清素，它既是神經(jīng)遞質(zhì)又是炎癥介質(zhì)，參與免疫調(diào)節(jié)過程。5-HT其相應(yīng)的受體可分為7種類型和至少14種亞型，除5-HT3受體為配體門控離子通道外，其余則為G蛋白偶聯(lián)受體，可見5-HT從中樞到外周廣泛分布，參與機體的許多生理或病理過程［3］。根據(jù)臨床研究，5-HT使內(nèi)皮細(xì)胞上的5-HT1受體啟動，可通過釋放內(nèi)皮細(xì)胞舒張因子（EDRF）和前列腺素（PGS）使血管平滑肌收縮、毛細(xì)血管擴張、通透性增高，引起皮膚紅斑水腫、發(fā)紅發(fā)熱、出血、疼痛及瘙癢等炎癥反應(yīng)。據(jù)實驗研究報道，電針穴位所產(chǎn)生的氣至病所效應(yīng)與抑制上述炎性介質(zhì)的釋放有關(guān)［4］。眾所周知，熱反應(yīng)是炎癥的主要癥狀之一，實驗性膽囊炎所引起的循經(jīng)高溫現(xiàn)象也是一種病理反應(yīng)的結(jié)果，并與5-HT含量的增加呈正相關(guān)性，表明5-HT作為一種炎癥介質(zhì)可能參與了臟腑體表相關(guān)的病理反應(yīng)過程。

當(dāng)然，本研究的這些結(jié)果只是從NE和5-HT等因素對循經(jīng)高溫現(xiàn)象進行一些探索，對循經(jīng)高溫反應(yīng)復(fù)雜機制的揭示還需做更深入的研究。

［1］胡翔龍，培清，許金森，等.人體體表循經(jīng)紅外輻射軌跡的熱源及其形成機理的探討［J］.針刺研究，2002，27（6）：258-260.

［2］張棟，付衛(wèi)星，葉燕燕，等.實驗性膽囊炎家兔體表循經(jīng)高溫線顯示［J］. 上海針灸雜志，2001，20（1）：42-43.

［3］周舒，婁艾琳.5-羥色胺的生理和病理生理［M］.北京：人民衛(wèi)生社，1998.1-49.

［4］李熳，施靜，李玲俐，等.“氣至病所”對相關(guān)皮瓣浸泡液內(nèi)5-羥色胺、腎上腺素、去甲腎上腺素含量的影響［J］.針刺研究，2001，26（4）：292-298.